Articles

Restriksjonsenzymer

i laboratoriet brukes restriksjonsenzymer (eller restriksjonsendonukleaser) til å kutte DNA i mindre fragmenter. Kuttene gjøres alltid ved bestemte nukleotidsekvenser. Ulike restriksjonsenzymer gjenkjenner og kutter forskjellige DNA-sekvenser.

Hvor kommer restriksjonsenzymer fra?

Restriksjonsenzymer finnes i bakterier. Bakterier bruker restriksjonsenzymer til å drepe virus-enzymene angriper virusets DNA og bryter det inn i ubrukelige fragmenter.

hvordan virker restriksjonsenzymer?

som alle enzymer fungerer et restriksjonsenzym ved å matche form til form. Når DET kommer I kontakt MED EN DNA-sekvens med en form som samsvarer med en del av enzymet, kalt gjenkjenningsstedet, brytes DET rundt DNA og forårsaker en pause i BEGGE trådene I DNA-molekylet.

hvert restriksjonsenzym gjenkjenner et annet og spesifikt gjenkjenningssted, ELLER DNA-sekvens. Gjenkjenningssteder er vanligvis bare korte-4-8 nukleotider.

når brukes restriksjonsenzymer?

Restriksjonsenzymer er et grunnleggende verktøy for bioteknologisk forskning. De brukes TIL dna-kloning og DNA-fingeravtrykk.

Ulike typer restriksjonsenzym

Forskere har identifisert og renset hundrevis av forskjellige typer restriksjonsenzymer. De er oppkalt etter slekten og arter av organismen de ble isolert fra og er gitt et tall for å angi rekkefølgen de ble funnet i. For Eksempel Var EcoRI Det første restriksjonsenzymet isolert FRA escherichia coli-stammen RY13, Mens HindIII var det tredje enzymet isolert fra Haemophilus influenzae-stammen Rd.

DNA-fragmenter: Stumpe eller klebrige ender?

DNA består av to komplementære tråder av nukleotider som spiral rundt hverandre i en dobbel helix. Restriksjonsenzymer skjærer gjennom begge nukleotidstrenger, bryter DNA i fragmenter, men de gjør ikke alltid dette på samme måte.SmaI Er et eksempel på et restriksjonsenzym som skjærer rett GJENNOM DNA-strengene, og skaper DNA-fragmenter med en flat eller stump ende.Andre restriksjonsenzymer, Som EcoRI, skjærer GJENNOM DNA-strengene ved nukleotider som ikke er nøyaktig motsatt hverandre. DETTE skaper DNA-fragmenter med en nukleotidstreng som overhenger på slutten. Denne overhengende nukleotidstrengen kalles en klebrig ende fordi den lett kan binde seg med komplementære DNA-fragmenter.