Articles

enzime de restricție

în laborator, enzimele de restricție (sau endonucleazele de restricție) sunt utilizate pentru a tăia ADN-ul în fragmente mai mici. Tăieturile se fac întotdeauna la secvențe nucleotidice specifice. Diferite enzime de restricție recunosc și taie diferite secvențe de ADN.

de unde provin enzimele de restricție?

enzimele de restricție se găsesc în bacterii. Bacteriile folosesc enzime de restricție pentru a ucide virușii-enzimele atacă ADN-ul viral și îl rup în fragmente inutile.

cum funcționează enzimele de restricție?

ca toate enzimele, o enzimă de restricție funcționează prin potrivirea formă-la-formă. Când vine în contact cu o secvență de ADN cu o formă care se potrivește cu o parte a enzimei, numită site-ul de recunoaștere, se înfășoară în jurul ADN-ului și provoacă o ruptură în ambele fire ale moleculei de ADN.

fiecare enzimă de restricție recunoaște un situs de recunoaștere diferit și specific sau o secvență ADN. Locurile de recunoaștere sunt de obicei doar scurte – 4-8 nucleotide.

când se utilizează enzimele de restricție?

enzimele de restricție sunt un instrument de bază pentru cercetarea biotehnologiei. Acestea sunt utilizate pentru clonarea ADN-ului și amprentarea ADN-ului.

diferite tipuri de enzime de restricție

oamenii de știință au identificat și purificat sute de tipuri diferite de enzime de restricție. Acestea sunt numite după genul și speciile organismului din care au fost izolate și li se dă un număr pentru a indica ordinea în care au fost găsite. De exemplu, EcoRI a fost prima enzimă de restricție izolată din tulpina Escherichia coli RY13, în timp ce HindIII a fost a treia enzimă izolată din tulpina Haemophilus influenzae R d.

fragmente de ADN: capete contondente sau lipicioase?

ADN-ul este format din două catene complementare de nucleotide care se învârt una în jurul celeilalte într-o spirală dublă. Enzimele de restricție taie ambele fire nucleotidice, rupând ADN-ul în fragmente, dar nu fac întotdeauna acest lucru în același mod.

SmaI este un exemplu de enzimă de restricție care taie direct prin firele de ADN, creând fragmente de ADN cu un capăt plat sau contondent.

alte enzime de restricție, cum ar fi EcoRI, taie firele ADN la nucleotide care nu sunt exact opuse. Acest lucru creează fragmente de ADN cu o catenă nucleotidică care se suprapune la sfârșit. Această catenă nucleotidică proeminentă se numește capăt lipicios, deoarece se poate lega cu ușurință cu fragmente de ADN complementare.