Vér, Csontvelő Elemzés

Korlátozások kísérő generáló sejtszuszpenziók nem kell alkalmazni, hogy a betegek a vér-vagy csontvelő bevonása a krónikus lymphoproliferatív betegségek. Ezen elváltozások alosztályozása nagymértékben támaszkodik az áramlási citometriára.A 42,44,49-51 krónikus limfocitikus leukémiát (CLL) alapvetően immunofenotípusos jellemzői határozzák meg. Más B-sejtes limfoproliferatív rendellenességek jellemző, ha nem mindig teljesen specifikusak, fenotípusok. A köpenysejtes limfóma gyakran felismerhető leukémiás fázisában, bár a legspecifikusabb marker, a cyclin D1, nagyon nehéz áramlással kimutatni a jelenlegi technikákkal. Szőrös sejt leukémia, ezzel szemben, nem csak egy jellemző, hanem egy nagyon specifikus fenotípus42, 50, 52; alkalmanként betegek megmagyarázhatatlan pancytopenia lehet meghatározni, hogy szőrös sejt leukémia, ha csak egy kis számú vérsejtek a klasszikus fenotípus azonosított52 (ábra. 15-3).

az áramlási citometria prognosztikai tényezőket is észlelhet a CLL-ben szenvedő személyeknél. Felismerve, hogy a CLL lehet osztani egy rossz prognózis típus kapcsolódó nonmutated immunglobulin V régió gének, illetve jobb-prognózis mutáns fenotípus, számos tanulmány megpróbálta azonosítani flow robotokkal. Az első prognosztikusnak talált marker a CD38 volt, bár a mutációs státusszal vagy a prognózissal való korreláció tökéletlen.53,54 a Zeta–lánchoz kapcsolódó protein kináz 70 (ZAP 70) jobb helyettesítő markernek tűnik, bár ez sem tökéletes; ugyanakkor prognosztikai információkat nyújt.55-57 azonban annak ellenére, hogy ez a vizsgálat széles körben elérhető, különösen a kereskedelmi referencialaboratóriumokban, a pozitív és a negatív közötti eltérés önkényes lehet, így a laboratóriumok között jelentős eltérések lehetnek az eredményekben.58,59 kísérletet tettek a reprodukálhatóság javítására, 60, de nem mindig biztos, hogy egy adott vizsgálat ugyanazokat az eredményeket fogja adni, mint a közzétett klinikai szakirodalomban. Más kísérletek történtek a CLL-ben szenvedő betegek prognosztikusan szignifikáns részhalmazának meghatározására a markerek más kombinációival,61, de ezeket a kombinációkat a rutin gyakorlatban nem fogadták el.

Az elsődleges értéke citometria értékelésekor krónikus leukémia, hogy képes bizonyítani, clonality a B-sejt populáció alapján tiltott kifejezés az egyik típusú immunglobulin könnyű lánc. Ez a tulajdonság különösen értékes a megmagyarázhatatlan limfocitózisban szenvedő betegek értékelésében62, 63,és hasznos a B-sejtes nem-Hodgkin limfómában szenvedő betegek állapotának meghatározására is,64, 65, mivel a klonális B-sejtes populáció 0,5-1% – ának, vagy még kevesebbnek a jelenléte néhány beteg csontvelőjében vagy vérében bizonyítható. A klonális populációk kimutatására szolgáló áramlási citometria nagy érzékenysége azonban bizonyos, nyilvánvaló lymphoma vagy leukémia nélküli betegeknél kis klonális B-sejtpopulációkat mutatott.66 ezért a kis csontvelő-klón megállapítását óvatosan kell értelmezni, ha nincs más lymphoma bizonyíték, hasonlóan a monoklonális gammopathia megállapításához egy myeloma bizonyíték nélküli betegben.

az áramlási citometriát széles körben alkalmazták myelomában szenvedő betegek vizsgálata során is. Az áramlási citometria egyik korlátozása az, hogy a plazmasejtek alulreprezentáltak az áramlással vizsgált csontvelő-aspirátumokon, összehasonlítva a sejtek prevalenciájával filmeken vagy biopsziákban; ennek eredményeként ez a technika nem használható a myeloma sejtek számszerűsítésére, így nem helyettesítheti a morfológiát a hagyományos diagnosztikai kritériumok alkalmazása során. A plazmasejtek azonban jellegzetes fenotípussal rendelkeznek, beleértve a CD38 nagyon fényes expresszióját,valamint a CD138,67, 68 expresszióját, így könnyen felismerhetők. A membrán-permeabilizációs technikák alkalmazásával könnyen kimutatható a citoplazmatikus immunglobulin (Ig) fénylánc-korlátozás.67 nagyobb jelentőséggel bír, hogy a neoplasztikus plazmasejtek általában abnormális fenotípusokkal rendelkeznek. Bár egyetlen specifikus fenotípusos rendellenesség sem tesz lehetővé különbséget a jóindulatú monoklonális gammopathia és a myeloma között, az áramlási citometria továbbra is hasznos lehet A myeloma megkülönböztetése a meghatározatlan jelentőségű monoklonális gammopathiától, vagy a meghatározatlan jelentőségű monoklonális gammopathia progressziójának előrejelzése vagy a parázsló myeloma.69-71 ezenkívül a myeloma diagnosztizálásakor a kóros plazmasejtek áramlási citometriás értékelése prognosztikai jelentőséggel bír.72 ezenkívül a keringő plazmasejtek kimutatása vagy a kóros fenotípus perzisztenciája a kezelés után, beleértve a minimális maradék betegség kimutatását, előrejelzi a myeloma betegek kimenetelét.69,71,73-76

A t-sejtpopulációk Klonalitása áramlási citometriával is bizonyítható, bár a módszer összetettebb, és nem olyan széles körben elérhető, mint a B-sejtek esetében. Ez a technika a V-béta gén használatának korlátozásán alapul a T-sejtes leukémiákban.A 77-79 T-sejtes rosszindulatú daganatok gyakran abnormális T-sejt fenotípusokat is mutatnak, amelyeket leggyakrabban egy normál pan-t antigén elvesztése vagy egy T-sejt antigén expressziója jellemez abnormális intenzitással.44,80,81 mivel bizonyos kis, szokatlan, sőt klonális t-sejtpopulációk kis számban láthatók nem neoplasztikus körülmények között, ez a technika korlátozottabb érzékenységgel rendelkezik, mint a klonális B-sejtpopuláció kimutatása. Ha azonban az abnormális T-sejtek a sejtek több mint egy nagyon kis százalékát teszik ki, a többparaméteres áramlási citometria könnyen bemutatja őket, és jelentős szerepet játszik ezeknek a nem gyakori daganatoknak a kategorizálásában.