az Agaricus blazei Murill hatása a Streptozotocin által kiváltott cukorbetegségben szenvedő állatok Tüdőszövetére
absztrakt
a jelen vizsgálatot úgy tervezték, hogy értékelje az Agaricus blazei Muril (A. Blazei) oxidatív stresszét, valamint terápiás hatását streptozotocin által kiváltott cukorbetegségben szenvedő patkányokban. 25 Wistar patkányt használtunk, és a DM-et streptozotocin (70 mg/Kg i.p.) injekcióval indukáltuk. Az Agaricus blazei Muril-t a betegség kialakulását követő 40 napon belül naponta alkalmazták. A. A Blazei-t fitokémiai összetételének vizes kivonataként tesztelték, valamint antioxidáns aktivitását in vitro is értékelték. A tüdőszövetben a lipoperoxidációt (LPO) és a szuperoxid-diszmutázt (SOD), a katalázt és a glutation-peroxidáz aktivitást, valamint az indukálható nitrogén-monoxid-szintáz (iNOS) jelenlétét mértük immunhisztokémián keresztül. Anatómopatológiai vizsgálatot is végeztek. Az A. Blazei fitokémiai vizsgálata alkaloidok és szaponinok jelenlétét mutatta ki. A kivonat jelentős antioxidáns aktivitást mutatott a DPPH-scavengingben és a hipoxantin/xantin-oxidáz vizsgálatokban. A diabéteszes állatokban (; ) a kontrollcsoporthoz () képest a pulmonalis LPO emelkedett, majd az A. Blazei-vel kezelt csoportban (;) csökkent. az iNOS-t diabéteszes patkányokban a tüdőben növelték, és az A. Blazei-vel kezelt csoportban csökkentették. A diabéteszes patkányokban a tüdőszövet a streptozotocin kezeléssel összefüggő oxidatív változásokat mutatott. Az A. Blazei kezelés hatékonyan csökkentette az oxidatív stresszt, és hozzájárult a szövetek helyreállításához.
1. Bevezetés a
Diabetes mellitus (DM) egy endokrin metabolikus betegség, melynek előfordulási gyakorisága és klinikai jelentősége magas morbiditási és mortalitási arány mellett növekszik . Krónikus szövődményei közé tartoznak a vese -, kardiovaszkuláris és idegrendszeri mikro-és makro érbetegségek . Az elmúlt két évtizedben azonban klinikai és kísérleti vizsgálatokban a légzésfunkció változásáról is beszámoltak. Csökkent a pulmonalis funkció az évek során, ami a csökkent pulmonalis térfogat és kapacitás, igazolták a diabéteszes betegek csökkent metabolikus kontroll . A pulmonalis kapilláris endothelium alapmembránjának szerkezeti változásai szintén jelen vannak a DM-ben, az alveolus-kapilláris membrán megvastagodásával és a diffúz képesség csökkenésével . Ezenkívül a cukorbetegek hajlamosabbak a tüdőfertőzésekre, különösen a tuberkulózisra, amely ebben a populációban négyszer nagyobb gyakorisággal fordul elő . Bár ezeket a változásokat klinikai és kísérleti vizsgálatok igazolták, kevés tanulmány vizsgálta a DM-hez kapcsolódó tüdő szövődményekkel járó fő fiziopathológiai mechanizmusokat.
a DM krónikus szövődményeihez 4 út kapcsolódik, nevezetesen a poliol út, a protein kináz C (PKC) aktiváció, a hexozamin út fokozott áramlása, valamint az előrehaladott glikozilációs végtermékek útja (kor). Bár minden esetben eltérő módon jelenik meg, az oxidatív stressz (OS) szerepet játszik a fent említett négy úton .
rengeteg bizonyíték azt mutatja, hogy a növekedés, a nitrogén-monoxid (NO), alakult a keresetet a gerjesztett nitrogén-oxid szintáz (iNOS) a felelős tényezők mind a patogenezisében, valamint a szövődmények eredő DM . Az exogén antioxidánsok használata nagy terápiás potenciált jelenthet a DM
kezelésére a basidiomycete Agaricus blazei Murill (A. Blazei), közismert nevén “napgomba”, Brazíliában őshonos, és gyógyászati tulajdonságai miatt Japánban széles körben termesztik. Ezt a gombát hagyományosan atherosclerosis, hepatitis, hyperlipidaemia, dermatitis és rák kezelésére használják, és kimutatták, hogy immunmoduláló és antimutagén hatása van mind in vivo, mind in vitro. Poliszacharidok α-glikán és β-glikán felelősek az immunológiai és tumorellenes stimuláció működéséért .
A. Blazei már kimutatták, hogy előnyös a 2-es típusú cukorbetegséggel kapcsolatos inzulinrezisztenciában, de egyetlen tanulmány sem mutatta az A. Blazei antioxidáns potenciálját in vivo DM-ben . Így ezt a vizsgálatot úgy tervezték, hogy értékelje az oxidatív stresszt, valamint az A. Blazei terápiás hatását a streptozotocin által kiváltott DM-vel rendelkező állatok tüdőszövetében.
2. Módszerek
2.1. A gomba
az Agaricus blazei Murill (C típusú) fajba tartozó, levegőn szárított gomba Dr. Luiz Antônio Graciollo, a brazíliai São Paulo Állami Egyetem (UNESP) Engeneering Tanszékének ajándéka volt.
2.2. Az A. blazei vizes extraktum
levegőn szárított részeket (100 g) őrölték, a vizes extrahálást infúzióval (1/10 gomba/oldószer) állítottuk elő. Az infúzió szobahőmérsékleten 30 percig állt. Lehűlés és szűrés után a kivonatot lefagyasztottuk és liofilizációval koncentráltuk öt napig egy éjszakán át, hogy megkapjuk az A. blazei vizes kivonatot.
2.3. A Sigma-tól (St. Louis, USA) vegyszereket és reagenseket vásároltak
2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH), hipoxantin, xantin-oxidáz, trolox és szalicilsav.
2.4. Fitokémiai szűrés
az a fitokémiai elemzése (flavonoidok, tanninok, antrakinonok, alkaloidok, szaponinok, kumarinok és szívglikozidok). blazei-t a Harborne által leírt módszerek szerint hajtották végre . A vékonyréteg-kromatográfiás elemzéseket a Wagner és Bladt által jelzett rendszerek és fejlesztők alapján végezték .
2, 5. Hypoxanthine / Xanthine Oxidase Assay
a kivonatok hidroxil radikális eltávolító képességének vizsgálatára alkalmazott módszer Owen et al módszerén alapult. . Röviden, a kivonatot feloldottuk a vizsgálati pufferben (hipoxantin, Fe (III), EDTA és szalicilsav) 2,0 mg/mL koncentrációban, és megfelelően (három példányban) hígítottuk vizsgálati pufferben 1-es végső térfogatra.0 mL, 0,1–2,0 mg/mL tartományban. A reakció megindításához 5 L xantin-oxidázt adtak hozzá 3,2 M (NH4)2SO4-ben oldva. A mintacsöveket 3 órán át inkubáltuk 37°C-on, ekkor a reakció befejeződött. A reakcióelegy 30 L-es aliquotját HPLC-vel elemeztük kromatográfiás körülmények között, Owen et al. . A kromatográfiás analízist metanol/víz/ecetsav alapú gradienssel, µBondaPak C18 fordított fázisú oszloppal és 325 nm-es detektálással végezték. A HPLC berendezésnek 2695 elválasztó modulja és 2487 UV-detektorja volt. A szalicilsav és a hipoxantin hidroxilációját a = 325, illetve a = 278 nm-en figyelték meg. A szalicilsavra adott hidroxil radikális (OH•) támadással előállított dihidroxifenolok (2,5-dihidroxibenzoesav és 2,3-DHBA) (2,5-DHBA és 2,3-DHBA) mennyiségét a megfelelő tiszta dihidroxifenolokkal készített standard görbékből határozták meg.
2.6. DPPH-Scavenging Assay
A DPPH szabad gyökök összegyűjtését a Yamaguchi et al.által leírt módosított módszerrel mértük. ahol a különböző metanol növényi kivonatokat hozzáadták a Tris–HCl (100 mM) pufferhez, a pH 7,0-hoz, amely 250 mM DPPH-t tartalmaz metanolban oldva. Az egyes kivonatok legalább hat különböző hígítását tesztelték, és 20 percig állni hagyták a sötétben, mielőtt az abszorbanciát 517 nm-en mérték az UV-1602PC (Kyoto, Japán) Shimadzu spektrofotométer modell segítségével. A kísérletet három példányban végezték. Az antioxidáns aktivitást (AOA) IC50-ként fejeztük ki (gátló koncentráció g/mL mintákban vagy pozitív kontrollok, amelyek szükségesek a DPPH abszorbanciájának 50% – os csökkentéséhez a negatív kontrollhoz képest). Minél alacsonyabb az IC50, annál magasabb az AOA .
2.7. Az állatok és kísérleti protokoll
az alkalmazott kísérleti protokoll megfelelt a Porto Alegre-i Kórház de Clínicas kutatási és posztgraduális tanulmányok csoportjának etikai és Egészségügyi Kutatási Bizottsága által megállapított normáknak, valamint az állatokkal kapcsolatos kutatási elveknek (NAS). Csak hím Wistar patkányokat használtak, amelyeket az Instituto de Ciências Básicas da Saúde da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS) tenyésztő kolóniájából nyertek. Az állatok átlagos súlya a vizsgálat kezdetén 200-300 gramm volt. 12 : 12 óra fény/sötét ciklus alatt tartották őket (fény reggel 7-től este 7-ig) hőmérséklet-szabályozott környezetben (22 ± 4°c).
a DM-et streptozotocin i.p. (STZ, Sigma Chemical Company, St. Louis, MO, EUA) egyszeri injekcióval indukálták 70 mg/ttkg dózisban . Az STZ-t nátrium-citrát pufferben oldottuk (0,1 M, pH 4.5) és a pufferoldatban való feloldódás után körülbelül 10 perccel az állat bal hasi régiójában adják be. A kontrollcsoportba tartozó állatok csak 0,9% – os NaCl-t kaptak az STZ feloldásához használt puffer azonos térfogatánál. Az A. blazei kivonatot desztillált víz oldatában 0,1 g/mL (10%) koncentrációra hígítottuk, majd szobahőmérsékleten 2 órán át hagytuk . A beadás módja gyomormosás volt, 2 mL-es végleges oldattal, és a kezelést a diabetes indukció 40. napjától kezdték. Az állatokat randomizálták a különböző csoportokban: kontroll (CO), NaCl-lel (DM) kezelt diabéteszes és A. blazei-vel (DM + A. blazei) kezelt diabéteszes betegek. Vérmintákat gyűjtöttek a retro-orbitális plexusból egy nappal az indukció előtt, 2 és 30 nappal a kísérlet kezdete után. A 60 napos vizsgálat végén az állatokat kivéreztetéssel eutanáziára indították, miután xilasinnal és ketaminnal altatták őket. A retro-orbitális plexus véréből mintát vettek, a jobb tüdőt kivágták, és szövettani analízis céljából 4% formaldehidben tartották. A bal tüdőt eltávolították és -80°C-on lefagyasztották további elemzések céljából.
2, 8. Szérum analízis
a vérmintákat heparinnal (Liquemin) ellátott vizsgálati csőbe helyeztük a koaguláció elkerülése érdekében. Az anyagot ezután 1,800 g-ra centrifugáltuk 15 percig. A csapadékot kidobták és a plazmát eltávolították.
a glükóz, a koleszterin és a trigliceridek szintjének meghatározásához a kolorimetriás enzimatikus tesztet (Kit Labtest, Bio Diagnostica) használtuk, az abszorbanciát pedig spektrofotométerben (CARY 3E-UV-látható spektrofotométer Varian) mértük. A 250 mg/dL feletti glükózkoncentrációjú állatokat cukorbetegnek tekintették.
2, 9. Az oxidatív stressz és antioxidáns vizsgálat biokémiai analízise
a tüdőt homogenizáltuk 9 mL foszfátpufferrel (KCL 140 mM, foszfát 20 mM, pH 7,4) gramm szövetenként. A fehérje koncentrációját ezekben a tüdő homogenitákban a szarvasmarha-albumin standard oldatával határoztuk meg Lowry et al szerint. .
a pulmonalis lipoperoxidációt tiobarbitursav reaktív anyagok (TBA-RS) módszerével határoztuk meg .
a szuperoxid-diszmutáz (SOD) aktivitását a tüdőszövetben az adrenokróm képződésnek az epinefrin autoxidációban történő gátlásán alapuló technikával határoztuk meg . A tüdőszövetben a kataláz (CAT) aktivitását máshol leírtak szerint határoztuk meg, és a szelénfüggő glutation-peroxidáz meghatározását a tüdőszövetben a NADPH-oxidáció glutation-reduktázzal történő méréséből álló módszerrel kaptuk meg .
2.10. Szövettani vizsgálat
a szövettani elemzéshez a mintákat kétszer paraffinba ágyazták. Mikrotóm segítségével a paraffin blokkokat 3 m-es szeriátszakaszokra vágtuk. A festési fázisban a diákat hematoxilin-eozinba és picrosiriusba merítették. A dehidrációs fázisban a szerkezetek három, abszolút alkohollal ellátott tartályon, két xilollal ellátott tartályon mentek keresztül. Az olvasást 100-nál fénymikroszkóppal (Nikon Labophot) végezték. Az elemzést 2 patológus végezte, akik nem tudták a tanulmány részleteit.
2.11. Az iNOS
immunhisztokémiai reakcióit a tüdőszöveti szakaszokban a streptavidin-biotin-peroxidáz komplex (StreptABC, DAKO) technikáján keresztül végezték el. A diákat korábban 4% acetonban hígított szilánoldattal (APTS, Sigma) vonták be. 3 m vastag szakaszokat mechanikus mikrotómával kaptunk. A szekciókat ezután depaffinizálták és egymás után xilolba és etanolba merítették, majd 15 percig citrátpuffer (10 mM, pH 6.0) alkalmazásával besugárzási hővel (Eterna, Nigro) mutatták be antigén visszanyerésre. A peroxidáz-blokkolást 3% – os hidrogén-peroxid oldattal végeztük, majd a NOS-2 elleni elsődleges antitesttel (iNOS, 1 : 40, Santa Cruz) inkubáltuk. A reakciókat 60 mg% – os diaminobenzidin (DAB, Sigma) oldattal jelölték meg, és Harris hematoxilinnel (Merck) ellensúlyozták. Minden egyes reakció esetében pozitív kontrollt alkalmaztak olyan szövetekre, amelyekről ismert, hogy pozitívak a vizsgált antitest esetében. Két negatív kontrollt is alkalmaztak, az elsőt az elsődleges antitest hiányában, a második pedig a másodlagos antitest eltávolításával a reakció lépései során. Az eseteket iNOS-pozitívnak tekintették, amikor a sejt citoplazmájában és a sejtek több mint 10% – ában a legalább mérsékelt intenzitású barna színezés látható volt.
2.12. Statisztikai elemzés
az adatokat átlag ± szórásként (SD) mutatjuk be, és statisztikai szoftver segítségével elemeztük SPSS 15.0. A változókat a Kolmogorov-Smirnov teszten keresztül tesztelték a normalitás szempontjából. A variancia (ANOVA) egyirányú elemzését csoportközi különbségekre használták. A diák Newman-Keuls post hoc tesztet parametrikus változókra, a Kruskal-Wallis pedig a nemparametrikus változókra használták. Az alkalmazott szignifikancia szintje volt .
3. Eredmények
3.1. Az A. blazei fitokémiai analízise
szaponinok és alkaloidok jelenlétét jelezte. Egyéb másodlagos metabolitokat, például antrakinonokat, szívglikozidokat, köményeket, flavonoidokat, fenolsavakat és tanninokat nem észleltek.
3.2. Hipoxantin / xantin-oxidáz in Vitro vizsgálat
a kivonat in vitro antioxidáns aktivitását a hidroxil-benzoesavak (DHBA) termelésének nyomon követésével határoztuk meg, mint a szalicilsavra gyakorolt hidroxil radikális támadás termékét a hipoxantin-xantin-oxidáz vizsgálatban. A vizsgálathoz hozzáadott A. blazei vizes kivonat koncentrációjának függvényében a teljes oxidációs termékek csökkentése in vitro antioxidáns kapacitást eredményezett dózisfüggő módon. Az A. blazei vizes kivonata mindkét DHBA faj kialakulását 45-re csökkentette.2 % az alkalmazott legmagasabb koncentrációban (2 mg/mL). Az IC50 értéket kiszámították és 0,99 mg/mL-nek találták. A második típusú gomba (Lentinula edodes), amelyre a szerzők nem találták az alkaloidok jelenlétét, kontrollmintaként használták (IC50 1,95 mg/mL). A troloxot (E-vitamin) pozitív kontrollként alkalmazták, és 0, 34 mg/mL IC50-et mutattak ki (1.ábra).
Gátlása a generációs reaktív oxigén fajok vizes kivonatok a légi részei Agaricus blazei (), Lentinula edodes (), valamint a Trolox, használni, mint a pozitív kontroll () segítségével a hipoxantin/xantin-oxidáz rendszer. Az adatpontokat ± SD, = 3 átlagban mutatjuk be.
3.3. DPPH-Scavenging Assay
az A. blazei vizes kivonatának szabad gyökök scavenging hatása, L. az edodoes vizes kivonatot, valamint a troloxot pozitív kontrollként tesztelték, a DPPH szabad gyökök scavenging assay segítségével . Az A. blazei vizes kivonatra és az L. edodes kivonatra vonatkozó IC50 értékeket az 1.táblázat mutatja. A vizsgálat validálására a trolox szabadgyökök tisztító hatásának (IC50 = 0,02 mg/mL) pozitív kontrollként használt eredményeit használták fel. Bár a kivonatok szabad gyökök leválasztási kapacitása alacsonyabb volt (nagyobb koncentráció szükséges a DPPH abszorbanciájának 50% – kal történő csökkentéséhez), mint a trolox hatása, az A. a blazei vizes kivonat (a legmagasabb flavanon tartalmú) ígéretes antioxidáns aktivitást mutatott 1,77 mg/mL IC50-rel. L. edodes, másrészt, volt a legalacsonyabb scavenging aktivitás (IC50 = 3,22 mg / mL), amely egyetért azzal, hogy nincs alckloids ebben a fajta gomba.
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| három egyedi meghatározás átlag ± szórása. Az eredmények a 20 perc alatt mért értékeken alapultak. A troloxot pozitív kontrollként használták. * DPPH: 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3.4. Testtömeg és Szérumanalízis
a diabéteszes állatok testtömege jelentősen csökkent, és az A. Blazei-vel kezelt állatok testsúlya még ennél is nagyobb volt (2.táblázat). Az A. Blazei kivonat nyilvánvalóan csökkentette a vércukorszintet a diabéteszes patkányokban () , de a glikémiás görbe hasonló volt a diabéteszes és kezelt állatoknál. Az A. Blazei azonban jelentősen csökkentette a teljes koleszterin-és trigliceridszintet (). A DM és a DM + A. Blazei csoportok különböző mintaméretűek voltak, mivel a kísérlet során a DM csoport állatainak nagyobb mortalitása miatt.
|
|||||||||||||||||||||||||||||||
3.5. Biokémiai analízis és oxidatív stressz
A. Blazei szignifikánsan csökkentette () a TBA-RS által meghatározott lipoperoxidációs szintet (3.táblázat). Az antioxidáns enzimek aktivitása azonban nem mutatott különbséget a csoportok között. A GPX enzim aktivitása jelentősen nőtt a diabéteszes csoportban, és csökkent az A. Blazei-vel kezelt csoportban ().
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Data appear as mean ± SD. CO: Control, DM: Diabetes Mellitus and DM + A. Blazei: Diabetes Mellitus+ Agaricus blazei. CO versus DM. DM versus DM + A. Blazei. |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||
3.6. Szövettani analízis
STZ-indukált Diabetes Mellitus súlyos érrendszeri sérülést okozott a tüdőszövetben(2.ábra c))), ahol alveoláris változásokat, például septa szakadást is bizonyítottak. A Picrosirius-festés feltárta a konjunktív Szövet terjeszkedését a diabéteszes csoport alveolokapilláris térében(2.ábra d)), és ennek a mintának az Ab-kezelt csoportban való látszólagos reverzióját (2. ábra f)).
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
HE (A, c és e) és picrosirius (b, d és f) által megfestett tüdőszövet szövettana. Nagyítás 100: A) és b): kontroll, C) és d): Diabetes Mellitus, E) és f): Agaricus blazei-vel kezelt Diabetes Mellitus.
3.7. Az iNOS
3. ábra az iNOS eloszlását mutatja a tüdőszövetben az immunhisztokémia révén kimutatott módon. A pulmonalis bronchialis epitheliumban és a kapilláris endotheliumban a DM-csoportban látható pozitív barna folt iNOS pozitivitást mutatott. az iNOS festése kevésbé volt látható az A-ban. Blazei group and absent in the CO group.
(a)
(b)
(c)
(a)
(b)
(c)
iNOS immunohistochemistry in lung tissue. Magnification 400: There was no staining in the control group (a); reduction in the treated group (b) versus DM (c).
4. Vita
a hipoxantin/xantin-oxidáz in vitro vizsgálatában az A. blazei vizes kivonat szabadgyök-eltávolító hatásának eredményei, valamint a DPPH szabadgyök-eltávolító vizsgálatban jelentős in vitro antioxidáns aktivitást mutattak. Mindkét vizsgálatban a kivonat magasabb antioxidáns aktivitást mutatott, összehasonlítva az L. edodes vizes kivonatával, amely egy másik gombafaj, amely csak szaponinokat mutat be, de nem alkaloidokat, flavonoidokat vagy tanninokat. Ezt javasolta Ribeiro et al. hogy az antioxidáns aktivitás összefügghet az alkaloidok jelenlétével a gombában. Más szavakkal, a magasabb alkaloid koncentrációk jobb antioxidáns aktivitást generálnak .
a vizsgálat fő megállapítása a pulmonalis lipoperoxidáció csökkentése volt streptozotocin által kiváltott cukorbetegségben szenvedő patkányokban az Agaricus blazei-kezelés után. A korábbi vizsgálatok glikémiás redukáló hatást mutattak, ami csökkenti az inzulinrezisztenciát, és fokozza a hasnyálmirigy-sejtek felszabadulását . Azonban A. A Blazei-kezelés itt kedvező hatást mutatott az oxidatív stresszhez kapcsolódó változók tekintetében, annak ellenére, hogy nem csökkentette a hiperglikémiát.
Kim et al. az A. Blazei-ből és enzimesen hidrolizált oligoszacharidjaiból kivont glükánok antidiabetogén hatásait írja le, a hasnyálmirigy-sejtek tenyészetében és streptozotocin által kiváltott cukorbetegségben szenvedő állatokban kifejtett in vitro és in vivo hatásokat értékelve. A-glükánokkal és oligoszachariddal végzett kezelést követően az állatok csökkentették a glikémiát, a triglicerideket és a koleszterinszintet, valamint az ateroszklerotikus aktivitást . Vizsgálatunkban a kezelést az A. Blazei bruttó kivonatával végeztük, anélkül, hogy bármelyik vegyületét elkülönítettük volna, valószínűleg ez a magyarázat az antiglikémiás hatás hiányára.
az A. Blazei kivonat in vitro és in vivo antioxidáns hatást mutatott, azonban a kezelés jelentősen csökkentette az állatok súlyát. Ez a tény magyarázható az A. blazei kivonat nagy dózisainak köszönhetően, amelyeket ebben a kísérletben használnak, eltérően a más vizsgálatokban alkalmazott dózisoktól, amelyek nem bizonyítják a súlycsökkenést . Azonban egy tanulmányt, hogy értékelje 90 napos szubkrónikus toxicitás vizes kivonat a patkányok, nem volt következetes kezelés kapcsolatos változások, a klinikai tünetek, a testsúly, illetve az élelmiszer-fogyasztás az adag 2654 mg kg−1 férfi patkány, egy nagyobb adag, mint használt a tanulmány . További vizsgálatokra volt szükség az A. Blazei toxikus hatásának értékeléséhez ezekben a dózisokban, specifikus változók elemzésével.
a GPX szignifikánsan emelkedett a diabéteszes csoportban, és jelentősen csökkent az A. Blazei-kezelés után. Ez a GPX-növekedés a csökkent glutation csökkent szintjének tulajdonítható, mivel ez a fő szubsztrát, amely szabályozza tevékenységét. Gumieniczek et al. kimutatták, hogy a kísérleti DM-ben az antioxidáns enzimaktivitás csökkenése és a megnövekedett lipoperoxidáció miatt a pulmonalis oxidatív stressz jelen van. Az ilyen változások az indukciót követő hetek után jelentősebbek. A DM során csökken a Cu, a Zn-SOD aktivitás és nő a kataláz aktivitás. Tanulmányunkban sem a SOD, sem a kataláz aktivitás nem változott a különböző csoportok egyikében sem. A Gumieniczektől eltérő megállapításaink lehetséges magyarázata az, hogy tanulmányunkban az antioxidáns enzimek elemzését korábban végeztük.
kísérleti modellünkben számos szövettani változást figyeltek meg a tüdőrendszerben. Ezek a változások összhangban vannak a szakirodalomban leírtakkal, különösen a kötőszövet növekedése és a bazális lamina megvastagodása tekintetében, amelyet a picrosirius festés technikájával figyeltek meg. Az A. Blazei-val végzett kezelés után az ilyen változások kevésbé nyilvánvalóak. A formáció belüli, illetve intermolecular kötelező a kollagén, amely a folyamat glycosilation, vezet a strukturális elváltozások a szöveti fehérjék, például növeli a merevséget, ellenáll a fehérjebontó emésztést, valamint az extracelluláris mátrix (beleértve a fibronectin, procollagen α2, írja be a III., IV., VI. a kollagén, illetve laminina) . Tanulmányunkban az A. Blazei-kezelés után ennek a folyamatnak a visszafordításának fő tényezője a pulmonalis lipoperoxidáció csökkentésével demonstrált oxidatív stressz okozta károsodás csökkentésével magyarázható.
a hosszú távú hiperglikémiás állapot több szövetben az iNOS expresszió megváltozásával függ össze . Vizsgálatunk immunhisztokémiai analízise során az iNOS jelentősen megnövekedett a diabéteszes patkányok tüdőszövetében, és jelentősen csökkent az A. Blazei-vel kezelt állatoknál. Tanulmányok kimutatták, hogy az endothel-nitrogén-monoxid-szintáz (eNOS) mRNS expressziója csökken, míg az iNOS növelhető a ciklikus guanozin-monofoszfát (C-GMP) generálásával együtt .
egy nemrégiben közzétett vizsgálatban a diabeteses patkányok tüdőszövetében értékelték a lipoperoxidációt, a szuperoxid-diszmutáz aktivitást, valamint az iNOS és eNOS izoformák eloszlását. A diabeteses patkányok tüdőszövetében a megnövekedett iNOS-szal együtt járó oxidatív stressz növekedését figyelték meg, ami az antioxidáns α-liponsavval kezelt csoportban megfordult . Ezek a megállapítások összhangban vannak a jelen munkában leírtakkal, mint például a megfigyelt fokozott oxidatív stressz, a szövettani tüdőváltozások, valamint az antioxidáns terápia hatása ebben a DM modellben.
a jelen tanulmány az A. Blazei vizes kivonat jótékony hatását mutatja az oxidatív stresszváltozókra és a pulmonalis morfopatológiára vonatkozóan streptozotocin által kiváltott cukorbetegségben. Ezek az eredmények jelentősen hozzájárulhatnak a DM tüdőfiziopatológiájának jobb megértéséhez. Tanulmányunk az A. Blazei terápiás potenciáljára is vonatkozik.
nyugtázás
ezt a munkát a brazil “Fundo De Incentvo à Pesquisa e Eventos (FIPE) do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA)” és a “Laboratório de Hepatologia e Fisiologia Experimental da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (HCPA/UFRGS)”támogatások támogatták.
Leave a Reply