Enzimas de restricción
En el laboratorio, las enzimas de restricción (o endonucleasas de restricción) se utilizan para cortar el ADN en fragmentos más pequeños. Los cortes siempre se realizan en secuencias de nucleótidos específicas. Diferentes enzimas de restricción reconocen y cortan diferentes secuencias de ADN.
¿De dónde vienen las enzimas de restricción?
Las enzimas de restricción se encuentran en las bacterias. Las bacterias usan enzimas de restricción para matar virus: las enzimas atacan el ADN viral y lo rompen en fragmentos inútiles.
¿Cómo funcionan las enzimas de restricción?
Como todas las enzimas, una enzima de la restricción obras de la forma a la forma de adaptación. Cuando entra en contacto con una secuencia de ADN con una forma que coincide con una parte de la enzima, llamada el sitio de reconocimiento, envuelve el ADN y causa una ruptura en ambas hebras de la molécula de ADN.
Cada enzima de restricción reconoce un lugar de reconocimiento diferente y específico, o secuencia de ADN. Los sitios de reconocimiento suelen ser solo nucleótidos cortos – 4-8.
¿Cuándo se usan enzimas de restricción?
Las enzimas de restricción son una herramienta básica para la investigación biotecnológica. Se utilizan para la clonación de ADN y la toma de huellas dactilares de ADN.
Diferentes tipos de enzimas de restricción
Los científicos han identificado y purificado cientos de tipos diferentes de enzimas de restricción. Llevan el nombre del género y la especie del organismo del que fueron aislados y se les da un número para indicar el orden en que fueron encontrados. Por ejemplo, EcoRI fue la primera enzima de restricción aislada de la cepa RY13 de Escherichia coli, mientras que HindIII fue la tercera enzima aislada de la cepa R d de Haemophilus influenzae.
Fragmentos de ADN: Extremos romos o pegajosos?
El ADN consiste en dos hebras complementarias de nucleótidos que giran en espiral una alrededor de la otra en una doble hélice. Las enzimas de restricción cortan ambas hebras de nucleótidos, rompiendo el ADN en fragmentos, pero no siempre lo hacen de la misma manera.
SmaI es un ejemplo de enzima de restricción que corta directamente a través de las hebras de ADN, creando fragmentos de ADN con un extremo plano o romo.
Otras enzimas de restricción, como EcoRI, cortan las hebras de ADN en nucleótidos que no están exactamente opuestos entre sí. Esto crea fragmentos de ADN con una hebra de nucleótidos que sobresale al final. Esta hebra de nucleótidos saliente se denomina extremo pegajoso porque se puede unir fácilmente con fragmentos de ADN complementarios.
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