Administration af monoklonale antistoffer (mAb) til CD3 fremkalder et immunrespons på mAb og et akut toksisk syndrom, der er tilskrevet frigivelsen af cytokiner fra aktiverede T-celler. For at afklare det cellulære grundlag for disse effekter brugte vi anti-lymfocyt mAb til at nedbryde udvalgte T-celleundersæt fra BALB/c-mus inden administration af anti-CD3. I vores første serie af eksperimenter blokerede anti-CD4 gentagne gange immunresponset mod anti-CD3, men forhindrede ikke alvorlig toksicitet. Denne observation antydede, at andre T-celle-undergrupper kunne bidrage til anti-CD3-induceret toksicitet. Derfor behandlede vi mus med mAb til CD8 såvel som mAb til CD4 inden administration af anti-CD3. På trods af udtømning af > 95% af CD8+ – og CD4+ T-celler blev toksicitet ikke undertrykt. Dette fund rejser tvivl om troen på, at toksicitet skyldes aktivering af enten CD4+ eller CD8+ T-celler af anti-CD3. Derfor vurderede vi rollen af thymocytter (som ikke slettes af MAB) og gamma delta + T-celler. Thymektomi forhindrede ikke toksicitet i CD4/CD8-udtømte mus, hvilket viste, at thymocytter ikke er ansvarlige for toksicitet. Anti-alpha beta TCR mAb frembragte en toksisk reaktion svarende til anti-CD3, mens anti-gamma delta TCR mAb ikke gjorde det, hvilket tyder på, at gamma delta+ T-celler ikke er kilden til toksiske cytokiner. Derudover beviste vi, at anti-CD3-induceret toksicitet ikke skyldtes direkte virkninger på makrofager eller andre ikke-specifikke faktorer forbundet med hamster mAb. Disse fund antyder, at nogle få resterende modne T-celler i mus behandlet med mAb til CD4 og CD8 er tilstrækkelige til fuld ekspression af det anti-CD3-inducerede toksiske syndrom. For at bekræfte, at både CD4+ og CD8+ T-celler kan formidle toksicitet, viste vi, at:(i) SCID-mus, som normalt ikke udvikler anti-CD3-induceret toksicitet, kan gøres modtagelige ved rekonstitution med oprensede CD4+ T-celler; og (ii) CD4-knockout-mus, der mangler CD4+ T-celler, men har normale CD8+ T-celler, er modtagelige for anti-CD3-induceret toksicitet. Disse fund viser, at både CD4+-og CD8+ – celler bidrager til de toksiske virkninger af anti-CD3, og at relativt få celler er nødvendige for at formidle den fulde effekt.