no laboratório, enzimas de restrição (ou endonucleases de restrição) são usadas para cortar o ADN em fragmentos menores. Os cortes são sempre feitos em sequências nucleotídicas específicas. Diferentes enzimas de restrição reconhecem e cortam diferentes sequências de ADN.de onde vêm as enzimas de restrição?as enzimas de restrição são encontradas em bactérias. As bactérias usam enzimas de restrição para matar vírus – as enzimas atacam o ADN viral e quebram-no em fragmentos inúteis.como funcionam as enzimas de restrição?

Como todas as enzimas, uma enzima de restrição obras, forma-para-forma de correspondência. Quando entra em contato com uma sequência de DNA com uma forma que corresponde a uma parte da enzima, chamada de local de reconhecimento, ela envolve o DNA e causa uma quebra em ambas as cadeias da molécula de DNA.cada enzima de restrição reconhece um local de reconhecimento diferente e específico, ou uma sequência de ADN. Os locais de reconhecimento são geralmente apenas nucleótidos curtos-4-8.quando são utilizadas enzimas de restrição?

As enzimas de restrição são uma ferramenta básica para a investigação biotecnológica. Eles são usados para clonagem de DNA e impressões digitais de DNA.os cientistas identificaram e purificaram centenas de diferentes tipos de enzimas de restrição. Eles são nomeados a partir do gênero e espécies do organismo de que foram isolados e são dados um número para indicar a ordem em que foram encontrados. Por exemplo, o EcoRI foi a primeira enzima de restrição isolada da estirpe RY13 de Escherichia coli, enquanto que o hindi foi a terceira enzima isolada da estirpe R D.

fragmentos de ADN: extremidades rombo ou pegajosas?

o ADN consiste em duas cadeias complementares de nucleótidos que espiralam entre si numa dupla hélice. As enzimas de restrição cortam ambas as cadeias de nucleótidos, quebrando o ADN em fragmentos, mas nem sempre fazem isto da mesma forma.

SmaI é um exemplo de uma enzima de restrição que corta diretamente através das cadeias de DNA, criando fragmentos de DNA com uma extremidade plana ou contundente.

outras enzimas de restrição, como EcoRI, cortam através das cadeias de ADN em nucleótidos que não são exactamente opostos um ao outro. Isto cria fragmentos de ADN com uma cadeia de nucleótidos que se espalha no fim. Esta cadeia de nucleótidos é chamada de extremidade pegajosa porque pode facilmente se ligar com fragmentos de DNA complementares.