진단

임상 진단 임상의 사진으로 고통 받는 환자에서 클라미디아 감염이 될 수 있다는 오해의 소지가 70~80%를 감염된 여성의 50%감염된 사람은 증상이 없어지게 될 것입니다. 일반적으로 복잡하지 않은 클라미디아 감염이있는 여성은 소양증이없는 냄새가없는 점액 성 질 분비물로 나타납니다. 요도가 관련되어 있다면 빈도 나 긴급함이없는 배뇨 장애가 불평 될 것입니다. 또한,pid 에서는 고열,연하 곤란,연장 된 생리주기 및 intermenstural 출혈이있는 심한 복통의 병력이 유발 될 수 있습니다. 검사에서 os 에서 노란색,흐린 점액 성 분비물이있는 자궁 경부염을 볼 수 있습니다. 자궁 경부는 주걱이나 브러시로 긁을 때 쉽게 출혈하는 경향이 있습니다. 소변 검사는 urethritis13 을 암시하는>5WBC/HPF(고출력 필드)의 존재를 나타낼 것입니다. 클라미디아 감염은 임상 적으로 다른 요도 감염과 구별 될 수 없습니다. 아민 검사(즉,중요한 냄새 릴리스의 추가 코를 질 분비)도울 수 있는 차별화 클라미디아 감염에서 다른 낮은 생식기 감염이지만 저렴한 특수성입니다.

남성의 클라미디아 감염은 15-55%의 요도염으로 나타나며 35 년 미만 또는 같으며 때때로 부고환염이 seen2 일 수 있습니다. 경증에서 중등도의 맑은 흰색 요도 배출은 환자가 공극하기 전에 아침에 보입니다. 부고환염에서 음낭 홍반,부고환 이상의 압통 또는 붓기가있는 일방적 인 고환 통증의 병력이 유발 될 수 있습니다. 진단 설정할 수 있습의 존재에 의해 농성에서 방전하는 남근에서 그람 염색을 보여 줍>5WBC/HPF 와의 부재는 세포내 그램 음 diplococci. 라이터 증후군은 치료되지 않은 클라미디아 감염의 드문 합병증 일 수 있습니다. 반응성 관절염 포함하는 인조의 요도염/자궁 경부염에서 여성,conjuntivitis 고 고통 농성 분화에 손바닥과 발바닥에서 본 라이터의 syndrome29. 여성은 남성보다 더 일반적으로 영향을받습니다. 하지에 대한 편애가있는 비대칭 다중 관절 비자발성이 있습니다.

진단 실험실:증상이 없는 자연의 질환과 증가하는 스펙트럼의 감염에 의해 발생 C. 트라코마티스의 필요성을 강조한 민감하고 신뢰할 수 있는 실험 방법이 있습니다.

표본 수집 및 운송에 대한 숙련도는 진단 테스트의 정확성에 가장 중요합니다. C.trachomatis 에 대한 진단 검사의 민감도와 특이성 모두 표본의 적절성과 직접 관련이있는 것으로 나타났습니다. 호스트 세포는 항구는 유기체이 포함되어야에서의 견본 수집으로 chlamydiae 는 의무를 세포내 병원에서 특히 기술을 포함하는 직접적인 시각화의 유기체입니다.

샘플링 사이트의 선택은 병원체를 회수 할 가능성에 영향을 줄 수 있습니다. 10-20%증가 복구의 C. 트라코마티스에서 생식기관은 관찰되는 경우 자궁경부고 요도 표본에 비해 경 샘플링 only42. 자궁경부 면봉,질/introital 봉,외 음부봉뿐만 아니라 요도 및 직장봉 처음 catch 소변은 일반적인 샘플 취에서 여성 환자입니다. 요도 및 직장봉 처음 catch 소변 샘플 수집할 수도 있습에서는 남성 환자 외에 다른 특정한 샘플 같은 전립선니다.

의 품질 보증의 수집 및 전송 시편의:견본 타당성에 의해 결정될 수 있습니다 시각화의 squamo-원주 세포하는 동안 현미경. 표본은 슬라이드 당 하나의 원주/메타 플라 틱 셀을 포함하는 경우 적절한 것으로 간주됩니다. 가능성의 격리는 최적화 경험 냉장한 후 바로 컬렉션에서 2-8°C 사이의 시간 샘플 수집 및 처리하는 것이 이상적이보다 48 시간,가능하지 않으면 이러한될 수 있습 냉동에 -70°C 까지 processed16. Foetal 둔감한 혈청(2-5%)는 얼 것이다 견본에 있는 chlamydiae 의 생존 능력을 보존하는 것을 돕습니다. 2 몰 자당 인산염(2-MSP)또는 자당 글루타메이트 인산염이 가장 일반적으로 사용되는 수송 매체입니다. 합성 수송에 대한 미디어의 문화와 몇몇 비 문화 테스트는 개발되고 승인에 대한 진단용,즉 M4 전송 매체,플렉스 트랜스 매체고 새로운 M4 합성/보편적인 매체입니다.

실험실의 진단 클라미디아로 구성되어 있 다음 방법

(i)특정 테

세포 문화의 격리는 유기체입니다 결정적인 방법의 진단을 위한 클라미디아 감염. 클라미디아는 의무적 인 세포 내 병원체이며,따라서 배양을위한 배아 암탉의 난자 또는 동물 세포주가 필요합니다. 이러한 문화의 방법으로 기술적으로 어렵,노동 집약적,성가시고,그리고 비싼 있지 않은 광범위하게 채택된 상태로 일상적인 테스트를 수행에서 일반적인 임상 실험실. 그러나,3 개의 시험 관내 시스템이 클라미디아 즉 배양에 사용되어왔다. 마우스 접종(복강 내,두개 내 및 정맥 내),노른자 낭 접종(7-8 일 된 병아리 배아 노른자 낭 접종)및 세포 배양 라인 16. 가장 일반적으로 사용되는 세포주는 HeLa229 세포,McCoy 세포,BHK21 및 BGMK 세포 24 를 포함합니다.

의 감성을 위한 세포 배양의 격리 chlamydiae 에 의해 강화된 전의 치료 셀 polycations,DEAE-dextrans,원심분리의 inoculum 에 대하여 세포 단층 및 법인의 반대로 대사 산물 등과 같은 cycloheximide 또는 cytochalasin B 셀 문화 medium42. 세포 단층을 위한 문화의 C. 트라코마티스에서 성장 드럼 또는 셸 튜브에 유리 coverslips 또는 우물의 multiwell 세포 배양 요리입니다. 쉘 바이알 방법은 교차 오염 가능성이 적기 때문에 멀티 웰 세포 배양보다 임상 표본에 더 민감합니다 42. 접종 전에,표본은 숙주 세포를 교란시키고 클라미디아 개재물을 분리하기 위해 sonicated 되어야 한다. 접종 세포 배양,overlying 문화체 제거해야하고 대체로 충분히 시편에서 문화를 전송 매체 커버 단층 및을 방지합니다.

가장 일반적으로 사용되는 성장 배지는 아미노산과 비타민이 보충 된 Eagles Minimal Essential Medium(EMEM),foetal calf serum(5-10),extra glucose(0.056m)및 2-glutamine42 입니다. 접종 후,배양 물을 37o C 에서 2-3 일 동안 배양한다. 이어서,클라미디아 내포물은 면역 형광 염색에 의해 관찰된다. 격리 감도는 실험실 및 사용 된 배양 시스템에 따라 70-85%범위 인 것으로 나타났습니다. 전통적으로,이것은 C.trachomatis 의 진단을위한”황금 표준”으로 100%specific42 입니다. 불행하게도,그것은 기도의 대부분의 민간 및 공공 실험실로 인해 그것의 기술적 수요,노동 강렬하고 높은 비용.

직접 형광 시험(DFA): DFA 추가 테스트에 상당한 이점이 클라미디아의 특정 항체 염색하는 직접적인 검사의 표본 중 하나 남아있는 가장 유용한 진단 기술이 있습니다. 이 테스트에서 신속한 식별 초등학교의 몸에서 얼룩진 flourescein isothiocynate-활용된 단일 클론항체(FITC-Mab)에 대한 MOMP 또는 속 특정 LPS 사용됩니다. 초등학교 몸으로 나타나 뚜렷한 급격하게 설명,애플 그린,디스크 모양의(300nm)입자와 reticulate 몸에 나타나에 대한 세 배 이상의 초등학체 데 fluorescing halo.

이 절차를 요구하지 않는 엄격한 조건에 대한 표본 수송으로 침대 측 얼룩은 준비된 이후로 이송하여 처리됩니다. C.trachomatis 의 MOMP 를 사용하면 dfa 의 민감도와 특이도는 culture43 과 관련하여 각각 80-90%와 98-99%인 것으로 나타났습니다. DFA 의 높은 특이성은 클라미디아 내포물의 특유한 형태학 및 염색 특성의 시각화에 대한 의존성에 기인한다. DFA 는 스미어에 존재하는 상피 세포의 시각화에 의한 표본 적정성의 동시 평가를 허용하는 유일한 진단 검사입니다. 신속하고 단순하지만(처리 시간 약 30 분)현미경 검사 및 결과 해석에는 전문 지식이 필요합니다. 따라서이 방법은 저용량 실험실에 권장됩니다. 이 검사는 외래 부위에도 적용될 수 있습니다. 그것은 자궁 내막 또는 tubal specimen42 에서 클라미디아의 검출을위한 문화보다 더 민감한 것으로보고됩니다.

ELISA(enzyme linked immunosorbant assay): ELISA 는 C.trachomatis 항원의 검출을 위해 유효합니다. 상업적으로 이용 가능한 여러 ELISA 키트가 목적에 따라 제공됩니다. 이들 대부분은 MOMP 보다 용해성 인 chlamydial LPS 를 검출합니다. 효소 면역 분석(eia)검사는 세포 배양에 비해 62-96%의 민감도와 86-99%의 특이성을 갖는 것으로보고되었습니다 44. 이 검사는 세포 배양에 접근 할 수없는 실험실에 적합합니다. 그러나 인도를 포함한 전 세계의 다른 크고 작은 연구들은 DFA 와 PCR45,46,47 에 비해 ELISA 의 민감도가 좋지 않은 것으로보고되었습니다.

세포학:세포학은 쉽게 사용할 수 있고 사용하기 쉽고 비용 효율적인 진단 테스트입니다. 표본 저장 및 운송에 대한 예방 조치가 필요하지 않으며 생존 할 수없는/비 감염성 입자도 검출 할 수 있습니다. 의 품질 임상 시편을 평가할 수 있습에 의해 현미경 기법 및 기술적 절차에 사용되는 이러한 테스트는 일반적으로 더 빠르고 간단하게 수행보다 문화입니다. Giemsa,immunoflourescence 및 요오드 염색 방법이 가장 일반적으로 사용됩니다. 기타 얼룩과 같은 immunoperoxidase,immunoferritin 수 있습니다,Grunwald,Giemenez,Macchiavello 및 아크리딘 오렌지에도 사용할 수 있습 검출 클라미디아에 포함 exfoliated 세포입니다. 의 존재 intracytoplasmic 포함 pathogonomic 클라미디아에 대한 안구에서 감염을 신생아,그러나,이 방법은 사용하지 않는 것이 좋을 진단하는 결막염 또는 생식기 감염을 성인에서의 부족으로 인해 감도가 있습니다. 세 가지 방법 중 면역 형광법은 Giemsa 와 iodine staining42 가 뒤 따르는 가장 높은 감도를 제공합니다.

분자 방법: 전통적인 진단 방법에는 낮은 감도,긴 테스트 시간 및 높은 비용을 포함하는 몇 가지 제한 사항이 있습니다. 따라서 DNA 및 RNA 서열의 직접 인식에 기반한 테스트가 고안되었습니다. 상업적으로 사용할 수 있 DNA 프로브의 검출을 위한 클라미디아도 2 시험(조사 분석 화학 향상된)48,를 검출 할 수있 neisseria 임질 또는 동위원소 DNA 프로브의 탐지를 위한 특정 부분의 r-RNA C. 트라코마티스에서는 자궁경부고 요도는 표본이다. 다른 DNA 프로브,페이스 2C 테스트도 개발되었습니다 동시에 감지하여 C. 트라코마티스와 N. 이 소요됩에서 하나의 표본;그러나,추가의 평가는 속도 2C 하기 전에 필요한에서의 사용합니다. 이 테스트는 chlamydial16S rRNA 의 종 특이 적 서열에 하이브리드 화하는 화학 발광 DNA 프로브를 사용합니다. 일단 DNA-rRNA 하이브리드가 형성되면,자기 비드 상에 흡착되고 화학 발광 반응은 루미 노미터로 정량적으로 검출된다. 적극적으로 분열하는 클라미디아는 16S rRNA 의 최대 104 개의 사본을 포함하기 때문에 PACE2 테스트는 이론적으로 항원 검출 시스템보다 민감해야합니다. DNA 증폭 표준에 상대적인 PACE2 의 민감도는 아직 잘 평가되지 않았지만 한 연구에서 77~93%48 인 것으로보고되었습니다.

의 개발을 기반으로 테스트하는 핵산 증폭 기술(가 포함되어 있을 수 있습니다)되었습니다 가장 중요한 발전의 분야에서 클라미디아 진단 이후에 체외 세포 배양 기술 대체 난황낭 문화 절연 유기체의 임상에서의 표본이 아니다. NAAT 는 적어도 20-30%더 민감하고(단일 유전자 사본만큼 적게 검출 할 수 있음)100%specific49,50 입니다. 그것을 할 수있는 기회를 제공합을 사용하는 비침범성처럼 샘플 소변을 화면 위에서 감염 증상이 없는 개인지 않을 사람이 일반적으로 추구 임상 care. 여성의 클라미디아 감염의 대다수와 남성의 감염의 상당 부분이 무증상이기 때문에 이것은 중요한 이점입니다. DNA 증폭 기술 중 가장 널리 알려진 것은 PCR 입니다. PCR 은 프라이머 디자인에 따라 속,종,그룹 또는 변형 특이 적일 수 있습니다. C.trachomatis 의 진단을 목표로하는 유전자는 MOMP 유전자,내인성 플라스미드,포스 포 리파아제 유전자 및 16S 및 23S rRNA 유전자이다. 이후로 모든 핵산 증폭 기술 감지하는 핵산 대상을,이에 따라 달라지지 않나 생존 능력이나 본래 상태 대상의 생물체에 대한 긍정적인 결과입니다. 따라서 샘플의 운송은 중요한 문제가 아닙니다.49. 지만 잘되지 않은 공부는”창에서”대한 문화적,PCR 긍정적인 상태는 다음과 치료 아목시실린과가 나타납하는 마지막까지 3wk29. 이 시간이 지나면 환자 표본은 문화와 PCR 음성 모두가됩니다.

C 의 검출을 위한 PCR 시험. roche Diagnostics 가 개발 한 trachomatis,Basel Switzerland(Roche-Amplicor)는 미국 Fda 의 승인을 얻은 최초의 PCR 테스트였습니다.51. 1993 년부터 Amplicor PCR 은 비뇨 생식기 및 소변 표본 모두에 대해 비교적 잘 평가되었으며,전반적인 민감도와 특이도는 90 및 99~100%,respectively51 입니다. Amplicor PCR 은 자궁 경부,남성 요도 및 남성 소변 표본에 대해 승인되었습니다.

가진 폭발을 분자 생물학의 새로운 기술 분석과 같은 m2000 시스템(Abbott)뿐만 아니라 스트랜드-변위 증폭(SDA)(BD ProbeTec strand 변위 증폭에 의해 개발되 Becton Dickinson and Company,진단 시스템,프랭클린 호수,N.J.)그리고 전사 중재 증폭(TMA)(APTIMA 시스템에 의해 Gen-Probe,Inc.,샌디에고)C.trachomatis 에 사용할 수있게되었습니다. 선진국에서는 인기가 있지만 초기 및 유지 보수 비용이 높기 때문에 자원이 부족한 환경에서 사용하지 못하게됩니다.

C 의 부담. 트라코마티스는 유기체의 생식기관(클라미디아 load)를 검색할 수 있습에 의 정량적 실시간 PCR 와 다를 수 있습에서 10 만 이상의 생물/ml 의 생식기관 secretions52. 이것은 영향을 미칠 가능성이 성과 다른 핵산 증폭 시험하지 않는 정기적으로 구분 사람의 높고 낮은 클라미디아다. 에 차이가 클라미디아 로드록에 포함되어 있지 않을 수 있의 존재와 관련된 임상 증상 transmissibility 와 지속성,감염의하고 위험의 개발을 만성 sequelae53. 따라서 클라미디아 감염의 진단 및 치료에 정량화의 중요한 역할이 있습니다.

NAATs 는 생식기 tract54,55,56 의 chlamydial 및 gonococcal 감염의 선별 및 진단에 가장 민감한 검사입니다. 그러나 유병률이 낮은 지역에서의 성과에 대한 의구심이보고됩니다 57,58. 2002 년 CDC 는 검사의 긍정적 인 예측 값이<90percent59 일 때 C.trachomatis 에 대한 모든 양성 NAATs 를 확인하는 것이 좋습니다. 그러나 NAAT 방법의 진정한 특이성은>99per cent54,55 인 것으로 밝혀졌습니다.

CDC 는 또한 여러 가지 전략에 대한 confirmation59 포함하는(i)테스트는 두 번째 견본을 가진 다른 가 포함되어 있을 수 있습니다 같거나 높은 감도를 첫 번째 테스트,(ii)수행하는 다양 가 포함되어 있을 수 있습니다 같거나 높은 감도를 첫 번째 시험 대상으로 다른 핵산 시퀀스에 시편,(iii)반복되는 원래에서 테스트를 원래 견본,그리고(iv)가져 오는 환자는 다시 다시 테스트.

그러나 제한을 설명하는 대부분의 임상의들을 수집하지 않습니다 두 개의 샘플을 동 평가 아니며,그것을 가능하고 다시 환자가 수집하는 또 다른 견본,그리고 가장 실험실이 없 시설/를 수행할 수 있는 기능 두 가지를 다운로드 할 수 있습니다

확인 테스트의 개념은 new57 이 아닙니다. 그러나;그것은 naat 양성 샘플의 취급을 복잡하게하고 이미 값 비싼 선별 검사에 비용을 추가합니다. 또한,객실은 여전히 있다 개선을 위한 감성의 오디오,아마도 더 나은 시편 준비,자동화,또는 대상이다.

(ii)비특이적 검사

백혈구 에스 테라 제(LE)검사는 소변 표본과 함께 사용하기위한 신속한 딥 스틱 검사입니다. 이 검사는 다형 핵(pmn)세포에 의해 생성 된 효소를 검출하여 요로 감염을 검출하도록 설계되었습니다. 긍정적 인 LE 테스트 결과는 C.trachomatis 및 N.gonorrhoeae 를 포함한 여러 가지 다른 에이전트에 의한 감염으로 발생합니다.

C.trachomatis 감염의 검출을위한 LE 검사의 민감도는 31 에서 100 퍼센트까지 매우 다양하며 특이도는 83 에서 100 퍼센트까지 다양합니다. LE 테스트를 최고로 간주됩 심사 테스트를 위한 청소년 남성과에 따르면,대부분의 보고에 사용하지 말아야하며,테스트를위한 표본에서 여자 또는 세 남자 때문에 만족스럽지 못한 성능.

(iii)Rapid point of care(POC)시험

빠른 테스트,또한”point-of-care”테스트를 위한 C. 트라코마티스 사용 EIA 기술에서 형식적으로 막을 캡처 또는 라텍스 immunodiffusion. 신속한 검사는 의사 사무실에서 수행되며 정교한 장비가 필요하지 않으며 약 30 분 안에 완료 할 수 있습니다. 결과는 시각적으로 읽혀 지므로 질적입니다. 비록 여러 키트가 상업적으로 이용 가능하지만 아무도 잘 평가되지 않았다. 일반적으로 신속한 테스트는 실험실에서 수행 한 EIAs 보다 훨씬 덜 민감하고 구체적입니다. PCR 과 비교하여 Clearview 테스트(Unipath Ltd.,영국)은 endocervical 면봉 표본으로 각각 53.8 및 99.1%,필리핀 여성에서 질 면봉 표본으로 31.1 및 95.2%였다. 신속한 테스트는 결과가 환자 관리를 위해 즉시 요구되는 경우에만 기존의 실험실 테스트에 비해 이점을 제공합니다. 신속한 검사는 거짓 양성 결과의 가능성으로 인해 유병률이 낮은 인구 집단이나 무증상 개인에게 사용되어서는 안됩니다. 신속한 테스트의 결과는 항상 추정적인 것으로 간주되어야하며 긍정적 인 경우 실험실에서 수행 한 테스트에 의해 확인되어야합니다.

결론적으로,배양은 100 퍼센트 특이 적이지만,추정 된 감도는 50 퍼센트만큼 낮을 수있다. 실험실의 대다수는 관련된 비용,시간 및 기술적 어려움으로 인해 문화에서 멀어졌습니다. 따라서 대신의 문화로 진단 골드,표준,확장된 금 표준적인/정의된 표준,즉,일반적으로 일관된 결과 두 개 비즈-문화 기술이 될 것으로 간주는 유용한 연구 tool43.

(iv)혈청학

serological 테스트는 일반적으로 유용하지 않습의 진단에서 생식기관에 의한 감염 C. 트라코마티스. C 에 의해 유도 된 항체. 트라코마티스 감염은 오래 살았으며 양성 항체 검사는 이전의 감염과 현재의 감염을 구별하지 못합니다.