광속 스캔 분광광도계

두 가지 주요 클래스의 장치:single 빔 이중 빔입니다. 두 배 광속 분광 광도계 비교하여 빛의 강도 사이에 두 개의 가벼운 경로,하나의 경로를 포함하는 기준 샘플 및 다른 테스트 샘플입니다. 단일 빔 분광 광도계는 테스트 샘플이 삽입되기 전후에 빔의 상대 광 강도를 측정합니다. 하지만 비교 측정에서 두 배 광속 기기가 더 쉽고 안정적이,단일 빔기할 수 있는 더 큰 동적 범위가 광학적으로 더 간단하고 컴팩트합니다. 또한 현미경 또는 망원경에 내장 된 분광 광도계와 같은 일부 특수 계측기는 실용성으로 인해 단일 빔 계측기입니다.

역사적으로 분광 광도계는 회절 격자를 포함하는 단색계를 사용하여 분석 스펙트럼을 생성합니다. 격자는 움직일 수 있거나 고정 될 수 있습니다. 는 경우에는 단일 감지기와 같은 광전 증배관 또는 포토다이오드를 사용할 수 있는 격자 검사할 단계(스캔 분광광도계)도록 검출기 측정할 수 있는 빛의 강도에서 각 파장(는 것에 해당하는 각 단계””). 전하 결합 장치(ccd)또는 포토 다이오드 어레이(pda)와 같은 검출기(어레이 분광 광도계)의 어레이도 사용될 수있다. 이러한 시스템에서,격자는 고정되고 빛의 각 파장의 강도는 어레이의 다른 검출기에 의해 측정된다. 또한 대부분의 최신 중 적외선 분광 광도계는 푸리에 변환 기술을 사용하여 스펙트럼 정보를 얻습니다. 이 기술을 푸리에 변환 적외선 분광법이라고합니다.

경우를 만드는 전송 측정,분광광도계 정량적으로 비교한 분수의 빛과하는 참조를 통해 솔루션하고 테스트 솔루션,그때 전자적으로 비교합 강도의 신호 및 계산 비율의 전송의 샘플을 비교 참조 표준입니다. 반사율 측정의 경우 분광 광도계는 참조 및 테스트 샘플에서 반사되는 빛의 분율을 정량적으로 비교합니다. 가벼운 소스에서 램프를 통해 전달 단색화 장치는 diffracts 빛으로”무지개”의 파장을 통해 회전하는 프리즘 및 출력을 좁은 대역폭의 이 회절 스펙트럼을 통해 기계적인 틈새 출력에서 측면의 단색화 장치. 이러한 대역폭은 테스트 샘플을 통해 전송됩니다. 다음 photon flux density(와트 미터당 제곱 보통)의 전송 또는 반사된 빛은 측정 포토다이오드,요금 결합되는 장치 또는 기타 가벼운 감지기입니다. 투과율이나 값을 반사율에 대한 각 파장에서 테스트 샘플의는 다음에 비해 전송이나 반사에서 값을 참조 샘플입니다. 대부분의 악기를 적용하는 로그 기능의 선형선 투과율을 계산하는’흡수성’,샘플의 값에 비례 하는’농도’의 화학적 측정됩니다.

에서 짧은 시퀀스에서 이벤트의 스캔 분광광도계는 다음과 같습니다:

1. 광원이 났으로 단색화 장치,회절로 무지개,그리고으로 분할 두 개의 기둥이 있습니다. 그런 다음 샘플 및 참조 솔루션을 통해 스캔됩니다.
2. 입사 파장의 분획은 샘플 및 참조를 통해 전송되거나 반사됩니다.
3. 결과 광은 두 광선의 상대 강도를 비교하는 광 검출기 장치를 친다.
4. 전자 회로는 상대 전류를 선형 전송 백분율 및/또는 흡광도/농도 값으로 변환합니다.

배열 분광 광도계에서 시퀀스는 다음과 같습니다:

1. 광원이 빛나는 샘플과 집중으로 틈새
2. 전송된 빛을 굴절로 무지개를 가진 격자를 반영
3. 결과 빛을 친 광검출기 장치는 비교한 강도의 빔
4. 전자 회로 변환 상대 전류는 선형으로 전송 비율 및/또는 흡수/농도 값

많은 오래된측기 교정되어야 합으로 알려진 방법에 의해”제”의 균형을 맞추기 위해 null 현재의 출력은 두 개의 기둥에서 검출기입니다. 의 전송에 대한 참조는 물질은 설정으로 기준(datum)값 그래서 전송의 기타 모든 물질은 상대 기록되는 초기”제”물질입니다. 분광 광도계로 변환하고 전송 비율로 흡수성’,농도의 특정 구성 요소를 테스트 샘플의 상대적 초기 물질입니다.

응용 프로그램에서 biochemistryEdit

분광 광도법은 중요 기술에서 사용되는 많은 생화학 실험을 포함하는 DNA,RNA,단백질 분리,효소 반응 속도와 생화학적 분석이 가능합니다. 이러한 응용 분야의 샘플은 대량으로 쉽게 사용할 수 없기 때문에 특히이 비파괴 기술로 분석되는 데 적합합니다. 또한 완벽한 분석을 위해 샘플 1ul 이 필요한 마이크로 볼륨 플랫폼을 활용하여 귀중한 샘플을 절약 할 수 있습니다. 에 대한 간략한 설명은 절차의 분광 광도법을 포함한 비 흡수성의 빈 샘플을 포함하지 않는 컬러 화합물 샘플을 포함하는 컬러 화합물입니다. 이 색칠 수행할 수 있습 중 하나에 의해 염료와 같은 Coomasie Brilliant Blue G-250 염료에서 측정 595nm 또는 효소 반응으로 본 사이 β-galactosidase 및 ONPG(변 샘플 노란색)에서 측정 420nm.:21-119 분광광도계 사용을 측정하는 컬러는 화합물에 표시 가능 영역의 빛(사 350nm 와 800nm):65 따라서 그것은 사용할 수 있습에 대한 자세한 정보를 원하시면 되는 물질을 공부한다. 에서 생화학실험,화학적 및/또는 물리적 특성은 선택과하는 절차를 사용하여 특정 속성을 유도하기 위해 더 많은 정보에 대해 샘플 등의 수량,순도,효소 활동,등등. 분광 광도법 사용할 수 있는 기술의 수를 결정하는 등 최적의 파장을 흡광도의 샘플을 결정하는 최적의 pH 에 대한 흡광도의 샘플을 결정 농도의 알 수 없는 샘플을 확인 pKa 의 다양한 샘플입니다.:21-119 분광 광도법은 도움이 되는 프로세스에 대한 단백질 정제 및로 사용할 수 있습 방법을 만들기 광학적인 분석 실험의 화합물입니다. Spectrophotometric 데이터를 사용할 수도 있습과 함께 맥주-Lambert 방정식,A=−log10⁡T=ϵ c l=O D{\textstyle A=-\로그_{10}T=\엡실론 cl=OD}

, 을 결정하기 위해 다양한 간의 관계 투과율과 집중력,그리고 흡광도 및 농도이다.:21-119 기 때문 분광광도계를 측정한 파장의 화합물을 통해 그것의 색깔,염료 바인딩은 물질에 추가할 수 있도록 그것을 받을 수 있는 색깔 변화를 측정합니다. 각 성분의 표준 용액의 흡수 스펙트럼을 사용하여 2 성분 혼합물의 농도를 아는 것이 가능합니다. 이를 위해,그것을 알 필요가 있다고 멸종계수의 이 혼합물에서 두 개의 파 길이와 멸종의 계수를 포함하는 솔루션을 알려진의 무게를 두 요소를 사용합니다. 분광 광도계는 수십 년에 걸쳐 개발되고 개선되어 화학자들 사이에서 널리 사용되었습니다. 또한 분광 광도계는 자외선 또는 가시 광선 파장 흡광도 값을 측정하도록 전문화되어 있습니다.:21-119 것으로 간주 될 수 있는 매우 정확한 악기는 또한 매우 민감하므로 매우 정확하고,특히 결정하는 색상을 변경합니다. 이 방법은 저렴하고 비교적 간단한 과정이기 때문에 실험실 실험에서도 사용하기에 편리합니다.