을 수행 HPLC

소개

고성능 액체 크로마토그래피 기본적으로 매우 향상된 형태의 열 크로마토그래피. 용매가 중력 하에서 칼럼을 통해 물방울이 허용되는 대신에,최대 400 기압의 고압 하에서 강제된다. 그러면 훨씬 빨라집니다.

그것은 또한 당신을 사용하여 매우 더 작은 입자 크기는 열에 대한 포장 재료는 훨씬 더 큰 표면적에 대한 간의 상호 작용을 정지되는 단계와 분자가 흐르는 지난니다. 이것은 혼합물의 성분을 훨씬 더 잘 분리 할 수있게합니다.

칼럼 크로마토 그래피에 대한 다른 주요 개선 사항은 사용될 수있는 검출 방법에 관한 것이다. 이러한 방법은 고도로 자동화되고 매우 민감합니다.

열 용매

혼동을 일으킬 정도,두 변종에서 사용 HPLC 에 따라 상대 극성의 용매와 고정 단계입니다.

정상적인 단계 HPLC

이것은 본질적으로 동일 당신이 이미 읽기에 대해서 얇은 층 착색인쇄기 또는 열 크로마토그래피. “정상적인”것으로 묘사되지만 가장 일반적으로 사용되는 HPLC 형태는 아닙니다.

칼럼은 작은 실리카 입자로 채워지고,용매는 예를 들어 비극성-헥산이다. 일반적인 열고있는 내부 직경의 4.6mm(과될 수 있습보다),길이 150~250mm.

북극의 화합물에 혼합물을 통해 전달되는 열이 지팡이는 더 이상 북극 실리카 이상 비극성 화합물을 것입니다. 따라서 비극성 것들은 기둥을 통해 더 빨리 지나갈 것입니다.

역 단계 HPLC

이 경우에는 열의 크기는 같지만은 실리카가 수정하여 그 비극을 연결하여 긴 탄화수소 체인의 표면 일반적으로 중 하나에 8 개 18 소자들. 극성 용매(예:물 및 메탄올과 같은 알코올의 혼합물)가 사용됩니다.

이 경우,칼럼을 통해 전달되는 혼합물의 극성 용매와 극성 분자 사이에 강한 매력이있을 것이다. 실리카(고정상)에 부착 된 탄화수소 사슬과 용액의 극성 분자 사이에는 많은 매력이 없을 것입니다. 따라서 혼합물의 극성 분자는 용매와 함께 이동하는 데 대부분의 시간을 소비 할 것입니다.

혼합물의 비극성 화합물은 반 데르 발스 분산력 때문에 탄화수소 그룹과 어트랙션을 형성하는 경향이 있습니다. 그들은 또한이 적은 수용성에 있는 용매 때문에 휴식 할 필요가 수소 결합으로 그들 사이에 압착합 물 또는 메탄올 분자,예를 들어. 그러므로 그들은 적은 시간을 보내서 솔루션에 용이 느리게에 그들의 방법을 통해 열이 있습니다.

즉,이제 열을 통해 더 빨리 여행 할 극성 분자임을 의미합니다.

반전 위상 HPLC 는 가장 일반적으로 사용되는 hplc 형태입니다.