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⑫염색을위한 조직 학적 방법

Nissl 염색

핵 및 nissl 몸체(거친 endoplasmic reticulum)는 cresyl violet 으로 청자색으로 염색된다.

Nissl 염색은 Klüver-Barrera(KB)염색에 사용됩니다.

  • 얼룩 절차
  • 중요한 고려 사항에 대해 차별화

얼룩 절차

1 Deparaffinization Xylene 3 변경 10minuntes 각
2 제거 xylene 100%에탄올 3 변경,5 분마
3 수화 95%,70% 에탄올 5 분마
4 세척 실행 탭 물
5 헹구기 증류 물
6 얼룩 0.1%cresyl 바이올렛 솔루션 10 분 37℃
7 차별화 95%에탄올+몇 방울의 10% 아세트산 솔루션 약 5~10 분 거리에 있습니다. 탈색은 다음 단계에서 진행될 것이므로 과분화하지 않도록주의해야합니다.
8 분화 95%,100%에탄올 각각 약 1 분. 핵과 nissl 몸체 만 청자색이 될 때까지 차별화하십시오.
9 미세한 검사 단계⑦&⑧반복 될 수 있습니다면 더 많은 차별화가 필요합니다.
10 탈수 100%ehtanol 2 변경,5 분마
11 지우기 Xylene 3 변경 10minuntes 각
12 Coverslipping

0.1%cresyl 보라빛 수용액(필터를 사용하기 전에)

cresyl 바이올렛

1g

증류 물

1000ml

pH 의 cresyl 바이올렛

염색법에 따라 다릅니다 pH 의 얼룩 솔루션입니다. 3.0 에 가까운 pH 에서 Nissl 몸체,nucleoli 및 핵막 만이 옅은 파란색으로 염색됩니다. 신경아 교세포 핵은 아주 약간만 염색되어 있습니다. 으로 pH 를 증가,색상이 어둡고,세포질 신경세포,신경 섬유 및 신경세포가 공동진다. 공동 염색은 4.0 의 pH 에 가깝게 강화됩니다. 따라서 더 긴 차별화 시간이 필요합니다.


  • pH3.0

  • pH4.7

유형의 cresyl 바이올렛

세 가지 유형의 cresyl 바이올렛은 현재 사용되는 실험실에서의 Neuropathology.

제품 이름 제조업체 가용성
Cresyl 바이올렛 아세테이트 EM 과학 재고가
Cresyl 바이올렛 아세테이트 시그마 상업적으로 사용할 수 있
Cresyl 바이올렛(아세테이트) MERCK 상업적으로 사용할 수 있

차별화를 시간에 따라 다릅니다 cresyl 바이올렛 제품

pH 의 염색한 솔루션에 따라 다릅니다. 따라서 염색 방법도 다릅니다. 차별화에 필요한 시간은 제품마다 다르다는 것을 인식하는 것이 중요합니다. 그러나 어떤 제품을 사용,동일한 염 색채 이미지할 수 있습 궁극적으로 얻을 수 있을 통해 차별화 및 관찰 견본 후 현미경으로 관찰합니다.

제품 이름 제조업체 pH 의 0.1%cresyl 바이올렛 솔루션 차별화에서 시간 95% 에탄올
Cresyl 바이올렛 아세테이트 EM 과학 3.5 10~30 초
Cresyl 바이올렛 아세테이트 시그마 4.7 10min 약
Cresyl 바이올렛(아세테이트) MERCK 4.8 10min 약

※pH 조정할 수 있습 3.5 약 3.8 추가하여 적당한 금액의 10%아세트산의 시그마와 머크는 염색한 솔루션이 필요한 시간을 단축에 대한 차별화 95%에탄올이다. 그러나이 솔루션을 재사용하는 것은 권장하지 않습니다.

차별화에 관한 중요한 고려 사항

배경이 흰색으로 변할 때까지 차별화를 수행하십시오. 신경 세포 핵의 핵과 핵막이 명확하고 염색질이 희미하게 염색되는 것이 이상적입니다.

Cresyl Violet acetate(Sigma C5042)pH4.7 을 두 섹션에서 사용하였다.

왼쪽 사진:95%에탄올 분화 단 10 초. 분화가 불충분하면 전체 신경 세포가 파란색으로 염색되어 핵과 Nissl 체를 식별 할 수 없게됩니다.

오른쪽 사진:10 분 동안 95%에탄올 분화. 충분한 분화는 뉴런의 핵과 Nissl 몸체를 명확하게 분화 할 수있게합니다.