Articles

effekt af Agaricus murill på lungevæv hos dyr med Streptocin-induceret Diabetes

Abstract

denne undersøgelse er designet til at evaluere den oksidative stress såvel som den terapeutiske virkning af Agaricus Muril (A. Muril) hos rotter med streptocin-induceret diabetes. Vi brugte 25 Vistarrotter, og DM blev induceret ved injektion af streptocin (70 mg/Kg i.P.). Agaricus muril blev administreret dagligt startende 40 dage efter sygdomsdebut. A. Det blev også testet som et vandigt ekstrakt for dets fytokemiske sammensætning, og dets antioksidantaktivitet in vitro blev også evalueret. I de fleste tilfælde kan det være nødvendigt at foretage en undersøgelse for at sikre, at patienten er i stand til at kontrollere, om patienten er i stand til at foretage en undersøgelse. En anatomopatologisk undersøgelse blev også udført. En af de mest almindelige årsager til denne sygdom er, at der er tale om en alvorlig sygdom. Dette er en af de mest almindelige årsager til, at der er tale om en alvorlig sygdom. Pulmonal LPO steg hos diabetiske dyr (;) sammenlignet med kontrolgruppen () efterfulgt af en reduktion i Den A. Blisei-behandlede gruppe (;). iNOS blev fundet øget i lungerne hos diabetiske rotter og reduceret i Den A. Lungevævet hos diabetiske rotter udviste oksidative ændringer i forbindelse med behandlingen med streptotocin. A. C. behandling effektivt reduceret iltning stress og bidrog til væv opsving.

1. Introduktion

Diabetes mellitus (DM) er en endokrin metabolisk sygdom med stigende forekomst og klinisk relevans med høj sygelighed og dødelighed . Blandt dets kroniske komplikationer er mikro-og makrovaskulære lidelser relateret til nyre -, kardiovaskulære og nervesystemer . I de sidste to årtier er der imidlertid også rapporteret om ændringer i åndedrætsfunktionen i kliniske og eksperimentelle undersøgelser. Fald i lungefunktionen gennem årene, relateret til de nedsatte målinger af lungevolumener og kapacitet, blev påvist hos diabetespatienter med nedsat metabolisk kontrol . Strukturelle ændringer i basalmembranen i det pulmonale kapillære endotel er også til stede i DM med en fortykkelse af alveolus-kapillærmembranen og reduktion i diffusionskapaciteten . Desuden er diabetespatienter mere modtagelige for lungeinfektioner, især tuberkulose, som har en fire gange større forekomst i denne særlige population . Selvom alle disse ændringer blev påvist i kliniske og eksperimentelle undersøgelser, undersøgte få undersøgelser de vigtigste fysiopatologiske mekanismer, der involverede lungekomplikationer relateret til DM.

der er 4 veje forbundet med kroniske komplikationer af DM, nemlig polyolvejen, proteinkinase C (PKC) aktivering, øget strømning i geksosaminvejen og vejen for avancerede glykosileringsslutprodukter (alder). Selvom det præsenteres forskelligt i hvert tilfælde, er oksidativ stress (OS) impliceret i de fire veje, der er citeret ovenfor .

der er masser af beviser, der viser, at stigningen af salpetersyre (NO), dannet ved virkningen af inducerbar salpetersyresyntase (iNOS) er en af de faktorer, der er ansvarlige for både patogenesen og komplikationerne som følge af DM . Brugen af eksogene antioksidanter kan udgøre et stort terapeutisk potentiale til behandling af DM

basidiomycete Agaricus Murill (A. Flammei), populært kendt som “solsvamp”, er hjemmehørende i Brasilien og dyrkes bredt i Japan på grund af dets medicinske egenskaber. Denne svamp bruges traditionelt til behandling af aterosklerose, hepatitis, hyperlipidæmi, dermatitis og kræft, og det har vist sig at have immunmodulerende og antimutagene virkninger både in vivo og in vitro. Polysaccharider er ansvarlige for funktionen af immunologisk og antitumoral stimulering .det har allerede vist sig at være gavnligt ved insulinresistens relateret til type 2-diabetes, men ingen undersøgelser har vist potentialet for antioksidant A. in vivo i DM . Denne undersøgelse blev således designet til at evaluere den oksidative stress såvel som den terapeutiske virkning af A. Blisei i lungevæv hos dyr med streptotocin-induceret DM.

2. Metoder

2.1. Svampe

lufttørrede svampe af arten Agaricus murill Murill (C-type) var en gave fra Dr. Luis Ant Larrisnio Graciollo, Institut for Engeneering ved State University of S Kurro Paulo (UNESP), Brasilien.

2, 2. A. vandig ekstrakt

lufttørrede dele (100 g) blev formalet, og det ekstraherede vand blev fremstillet ved infusion (1/10 svamp/solvens). Infusionen stod ved stuetemperatur i 30 minutter. Efter afkøling og filtrering blev ekstraktet frosset og koncentreret ved lyofilisering i fem dage natten over for at opnå det vandige ekstrakt A.

2, 3. Kemikalier og reagenser

2,2-Diphenil-1-picrylhidrasyl (DPPH), hypoksantin, troloksog salicylsyre blev købt fra Sigma (St. Louis, USA).

2, 4. Fytokemisk Screening

den fytokemiske analyse (flavonoider, tanniner, antrakinoner, alkaloider, saponiner, coumariner og hjerteglykosider) af A. han blev udført i overensstemmelse med de metoder, der er beskrevet af Harborne . Tyndlagskromatografianalyserne blev udført efter systemer og udviklere angivet af Vagner og Bladt .

2, 5. H5>

den metode, der blev anvendt til at analysere ekstraktenes hydroksyl-radikale opfangningsevne, var baseret på metoden for Oven et al. . Kort sagt blev ekstraktet opløst i assaybufferen (Hypoksantin, Fe(III), EDTA og salicylsyre) i en koncentration på 2,0 mg/mL og fortyndet passende (i tre eksemplarer) i assaybuffer til et slutvolumen på 1.0 mL giver et interval på 0,1 – 2,0 mg/mL. En 5 L alikvot opløst i 3,2 M (NH4)2so4 blev tilsat for at initiere reaktionen. Prøverørene blev inkuberet i 3 timer ved 37 liter C, på hvilket tidspunkt reaktionen var afsluttet. En 30 L alikvot af reaktionsblandingen blev analyseret ved HPLC under anvendelse af kromatografiske betingelser som beskrevet af Oven et al. . Kromatografisk analyse blev udført ved anvendelse af en gradient baseret på methanol/vand/eddikesyre med en reversfasekolonne af K18 og detektion ved 325 nm. HPLC-udstyret havde et 2695 separationsmodul og UV-detektor 2487. Hydroksyleringen af salicylsyre og hypoksantin blev overvåget ved hhv. a = 325 og a = 278 nm. Mængden af dihydroksyfenoler (2,5-dihydroksibensyre og 2,3-DIHYDROKSIBENSYRE) (2,5-DHBA og 2,3-DHBA) produceret ved hydroksyl radikal (OH•) angreb på salicylsyre blev bestemt ud fra standardkurver fremstillet med de respektive rene dihydroksifenoler.

2, 6. DPPH-Scavenging Assay

Scavenging af DPPH frie radikaler blev målt ved hjælp af en modificeret metode beskrevet af Yamaguchi et al. hvori de forskellige methanoliske planteekstrakter blev tilsat Tris-HCl (100 mM) buffer, pH 7,0, indeholdende 250 mM DPPH opløst i methanol. Mindst seks forskellige fortyndinger af hvert ekstrakt blev testet og fik lov til at stå 20 minutter i mørke, før absorbansen blev målt ved 517 nm ved hjælp af en UV-1602pc (Kyoto, Japan). Forsøget blev udført i tre eksemplarer. ANTIOKSIDANT aktivitet (AOA) blev udtrykt som IC50 (hæmmende koncentration i g/mL prøver eller positive kontroller, der er nødvendige for at reducere absorbansen af DPPH med 50% sammenlignet med den negative kontrol). Jo lavere IC50, jo højere er AOA .

2, 7. Dyr og eksperimentel protokol

den anvendte eksperimentelle protokol overholdt de normer, der blev fastlagt af Det Etiske og Sundhedsforskningsudvalg for gruppen for forskning og Postgraduate studier på Hospital De Cl Kurternicas i Porto Alegre samt med principperne for forskning, der involverer dyr (NAS). Kun hanrotter blev brugt, opnået fra avlskolonien i Instituto de ci Larsncias B Larsicas da sa Larsde da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS). Den gennemsnitlige vægt af dyr i starten af undersøgelsen var 200-300 gram. De blev holdt under en 12: 12 timer lys/mørk cyklus (lys fra 7 til 7 pm) i et temperaturstyret miljø (22 liter 4 liter C).

DM blev induceret ved en enkelt injektion af streptocin i.p. (STS, Sigma Chemical Company, St. Louis, MO, ere) i en dosis på 70 mg / Kg legemsvægt . Natriumcitrat buffer (0,1 M, pH 4.5) og indgives i dyrets venstre abdominalområde ca.10 minutter efter opløsning i bufferopløsningen. Dyrene i kontrolgruppen modtog kun NaCl 0,9% i. p. Ved samme volumen af bufferen, der blev brugt til at opløse STS. A. blisei-ekstraktet blev fortyndet til en koncentration på 0,1 g/mL (10%) i en opløsning af destilleret vand og efterladt i 2 timer ved stuetemperatur . Indgivelsesvejen var gastrisk sonde med en endelig opløsning på 2 mL, og behandlingen blev indledt fra den 40.dag med diabetesinduktion. Dyrene blev randomiseret i de forskellige grupper: kontrol (CO), diabetiker behandlet med NaCl (DM) og diabetiker behandlet med A. blisei (DM + A. blisei). Blodprøver blev indsamlet fra retro-orbitalpleksen en dag før induktion og 2 og 30 dage efter forsøgets begyndelse. I slutningen af de 60 dages forsøg blev dyrene induceret til eutanasi ved ekssanguination efter bedøvelse med ksilasin og ketamin. Blod fra retro-orbitalpleksen blev udtaget, og den højre lunge blev dissekeret ud og opbevaret i 4% formaldehyd til histologisk analyse. Den venstre lunge blev fjernet og frosset ved -80 kr.C til yderligere analyser.

2, 8. Serumanalyser

blodprøverne blev anbragt i et testrør med heparin (Likemin) for at undgå koagulation. Materialet blev derefter centrifugeret ved 1.800 g i 15 minutter. Bundfaldet blev kasseret og plasmaet fjernet. til bestemmelse af glucose, kolesterol og triglycerider anvendte vi den kolorimetriske Test (Kit Labtest, Bio Diagnacus), og absorbansen blev målt i spektrofotometer (CARY 3e-UV-synligt Spektrofotometer Varian). Dyr med en glukosekoncentration over 250 mg/dL blev betragtet som diabetiske.

2, 9.

lungerne blev homogeniseret med 9 mL phosphatbuffer (KCL 140 mM, phosphat 20 mM, pH 7,4) pr.Gram væv. Proteinkoncentrationen i disse lungehomogenater blev bestemt under anvendelse af en standardopløsning af bovint albumin ifølge Lavry et al. .

pulmonal lipoperoksidering blev bestemt ved fremgangsmåden af thiobarbitursyrereaktive stoffer (TBA-RS) .aktivitet i lungevævet blev bestemt ved anvendelse af en teknik baseret på inhibering af adrenokromdannelse i epinephrin autoksidering . Katalaseaktiviteten i lungevævet blev bestemt som beskrevet andetsteds, og bestemmelsen af selenafhængig glutathionperoksidase i lungevævet blev opnået ved hjælp af en teknik, der bestod i måling af NADPH-iltning med glutathionreduktase .

2, 10. Histologisk undersøgelse

til den histologiske analyse blev prøverne indlejret i paraffin to gange. Ved anvendelse af et mikrotom blev paraffinblokkene skåret i 3 m seriate sektioner. I farvningsfasen blev objektglassene nedsænket i hæmatoksylin-eosin og picrosirius. I dehydreringsfasen gik strukturerne gennem tre beholdere med absolut alkohol og to beholdere med ksylol. Læsning blev udført med lysmikroskopi (Nikon Labophot) ved 100. Analysen blev udført af 2 patologer, der ikke kendte undersøgelsesdetaljerne.

2, 11. Immunhistokemisk påvisning af Inos

immunhistokemiske reaktioner blev udført i lungevævssektionerne ved hjælp af streptavidin-biotinperoksidasekomplekset (StreptABC, DAKO). Objektglassene blev tidligere overtrukket med en silanopløsning (APTS, Sigma) fortyndet i 4% acetone. 3 m tykke sektioner blev opnået under anvendelse af et mekanisk mikrotom. Sektionerne blev derefter deparaffineret og successivt nedsænket i ksylol og ethanol og underkastet antigengen genopretning ved bestrålingsvarme i trykkomfur (Eterna, Nigro) ved anvendelse af citratbuffer (10 mM, pH 6,0) i 15 minutter. Peroksidaseblokering blev udført ved anvendelse af en brintoverilteopløsning ved 3% efterfulgt af inkubation med primært antistof mod NOS-2 (iNOS, 1 : 40, Santa Cruce). Reaktionerne blev markeret med diaminobensidin (DAB, Sigma) opløsning ved 60 mg% og modfarvet med Harris ‘ hæmatoksylin (Merck). For hver reaktion blev der anvendt en positiv kontrol til væv, der var kendt for at være positivt for det testede antistof. To negative kontroller blev også anvendt, den første ved fravær af det primære antistof og det andet ved at fjerne det sekundære antistof under reaktionstrinnene. Sagerne blev betragtet som iNOS-positive, når den brune farve med mindst moderat intensitet var synlig i cellecytoplasmaet og i mere end 10% af cellerne.

2, 12. Statistisk analyse

dataene præsenteres som gennemsnitlig standardafvigelse (SD) og blev analyseret gennem statistisk program SPSS 15.0. Variablerne blev testet for normalitet gennem Kolmogorov-Smirnov-testen. Envejsanalyse af varians (ANOVA) blev brugt til intergruppeforskelle. Studerende Nyman-Keuls post hoc-test blev brugt til parametriske variabler og Kruskal-vægge til de ikke-parametriske. Det anvendte signifikansniveau var .

3. Resultater

3.1. Fytokemiske analyser

fytokemiske analyser af A. Andre sekundære metabolitter såsom antrakinoner, hjerteglykosider, cumariner, flavonoider, fenolsyrer og tanniner blev ikke påvist.

3.2. Dette er en af de mest almindelige årsager til hypoksantin/H5>

ved at overvåge produktionen af hypoksantin / KSANTIN (DHBA) som et produkt af det hydroksylradikale angreb på salicylsyre i hipoksantin-ksantinsyreassayet. Ved at reducere de samlede iltningsprodukter som en funktion af koncentrationen af vandigt ekstrakt fra A. blisei, der blev tilsat til analysen, resulterede det i en dosisafhængig in vitro-antioksidantkapacitet. Det vandige ekstrakt af A. blisei reducerede dannelsen af begge DHBA-arter til 45.2 % i den højeste anvendte koncentration (2 mg/mL). IC50-værdien blev beregnet og viste sig at være 0,99 mg / mL. En anden type svampe (Lentinula edodes), som forfatterne ikke fandt tilstedeværelsen af alkaloider, blev anvendt som kontrolprøve (IC50 på 1,95 mg/mL). E-vitamin blev anvendt som positiv kontrol og viste en IC50 på 0,34 mg/mL (Figur 1).

Figur 1

inhibering af dannelsen af reaktive iltarter ved vandige ekstrakter af luftdele af Agaricus (), lentinula edodes () og Troloks, anvendt som positiv kontrol () system. Datapunkter er præsenteret som middelværdi af SD, = 3.

3.3. DPPH-Scavenging Assay

den frie radikale scavenging effekt af begge af A. edodoes vandig ekstrakt, samt troloks, som positiv kontrol, blev testet, under anvendelse af DPPH frie radikaler scavenging assay . IC50-værdierne for vandigt ekstrakt af A. L. edodes og for ekstrakt af L. edodes er vist i tabel 1. Resultaterne af den frie radikale rensningseffekt af troloks (IC50 = 0,02 mg/mL), anvendt som positiv kontrol, blev anvendt til at validere analysen. Selv om ekstraktets frie radikalfangningskapacitet var lavere (højere koncentration er nødvendig for at reducere absorbansen af DPPH med 50%) end virkningen af troloks, A. vandigt ekstrakt (med det højeste indhold af flavanon) viste lovende antioksidantaktivitet med en IC50 på 1,77 mg/mL. L. edodes havde på den anden side den laveste rensningsaktivitet (IC50 = 3, 22 mg/mL), hvilket er i overensstemmelse med fraværet af alckloider i denne svampeart.

prøve hæmning af DPPH (%)
koncentration 0, 1 g/ml 0, 25 mg/ml 0.5 mg/mL 1 mg/mL 2 mg/mL IC50 (mg/mL)
Trolox 91.27 93.53 96.71 99.03 99.89 0.02 ± 0.00
Agaricus blazei 7.28 10.77 17.09 46.32 48.81 1.77 ± 0.08
Lentinula edodes 2.19 4.68 8.33 18.56 30.63 3.22 ± 0.12
gennemsnitlig standardafvigelse af tre individuelle bestemmelser. Resultaterne var baseret på værdierne målt på 20 minutter. Troloks blev brugt som positiv kontrol. * DPPH: 2,2-diphenyl-1-picrylhydrat.
tabel 1
hæmning af DPPH*, IC50-værdier for DPPH-analysen af vandige ekstrakter af agaricus-og Lentinula-edodesvampe og troloks.

3.4. Legemsvægt og Serumanalyser

legemsvægten af diabetiske dyr blev signifikant reduceret, og A. Blisei-behandlede dyr tabte sig endnu mere (tabel 2). Ekstraktet reducerede tilsyneladende glykæmi hos diabetiske rotter (), men den glykæmiske kurve var ens på tværs af diabetiske og behandlede dyr. Imidlertid reducerede A. C. signifikant det samlede kolesterol-og triglyceridniveau (). DM-og DM + A. Flæsei-grupperne havde forskellige prøvestørrelser på grund af den højere dødelighed hos dyrene i DM-gruppen under eksperimentet.

N Weight (g) Glucose (mg/dL) Total Cholesterol (mg/dL) Triglycerides (mg/dL)
CO 5 442.00 ± 10.95 244.17 ± 68.01 28.35 ± 4.62 61.33 ± 33.43
DM 8 306.22 ± 32.11† 482.37 ± 36.81* 42.88 ± 6.44* 161.00 ± 76.80##
DM + A. 12 282.00 ret 44.11# 468.19 ret 62.46# 33.99 ret 5.23** 45.87 ret 10.61**

data ser ud til at være m-Kurt A. Co: kontrol, d: diabetes mellitus i D + A. blisei: diabetes mellitus+ agaricus blisei.
CO versus af.
D mod D + A.
CO versus af.
, D mod D + A.
CO versus af.

tabel 2
ændringer i kropsvægt og glukose, kolesterol og triglycerider plasmaniveauer.

3, 5. Biokemisk analyse og Oksidativ Stress

A. Lipoperoksidationsniveauerne blev signifikant reduceret () som bestemt af TBA-RS (tabel 3). Imidlertid viste aktiviteten af SOD og CAT ingen forskelle mellem grupperne. Aktiviteten blev signifikant forøget i diabetesgruppen og reduceret i Den A.

TBARS (nmoles/mg of protein) SOD (U/mg de proteín) CAT (pmoles/mg de protein) GPx (nmoles/mg de protein)
CO 0.18 ± 0.02 76.33 ± 3.39 0.10 ± 0.04 0.41 ± 0.07
DM 0.43 ± 0.09* 69.32 ± 11.73 0.18 ± 0.07 1.10 ± 0.53*
DM + A. Blazei 0.33 ± 0.04** 74.84 ± 8.75 0.15 ± 0.03 0.45 ± 0.09**
Data appear as mean ± SD. CO: Control, DM: Diabetes Mellitus and DM + A. Blazei: Diabetes Mellitus+ Agaricus blazei.
CO versus DM.
DM versus DM + A. Blazei.
Table 3
Biochemical analyses of oxidative stress in lung tissue.

3.6. Histologisk analyse

STS-induceret Diabetes Mellitus forårsagede alvorlig vaskulær skade på lungevævet (figur 2(c)), hvor alveolære ændringer såsom septabrud også blev påvist. Picrosirius-farvning afslørede en udvidelse af det konjunktive væv i det alveolokapillære rum i diabetesgruppen (figur 2(d)) og en tilsyneladende reversion af dette mønster i den Ab-behandlede gruppe (figur 2(f)).

(a)
(a)
(b)
(b)
(c)
(c)
(d)
(d)
(e)
(e)
(f)
(f)

(a)
(a)(b)
(b)(c)
(c)(d)
(d)(e)
(e)(f)
(f)

Figure 2
histologi af lungevæv farvet af HE (A, c og e) og picrosirius (b, d og f). Forstørrelse 100: A) og b): kontrol, C) og d): Diabetes Mellitus, e) og f): Diabetes Mellitus behandlet med Agaricus blisei.

3.7. Immunhistokemisk analyse af iNOS

figur 3 viser Inos-fordeling i lungevævet som påvist gennem immunhistokemi. Den positive plet i brun set i det pulmonale bronchiale epitel og kapillært endotel i DM-gruppen indikerede iNOS-positivitet. iNOS-farvning var mindre tydelig i A. Blazei group and absent in the CO group.

(a)
(a)
(b)
(b)
(c)
(c)

(a)
(a)(b)
(b)(c)
(c)

Figure 3

iNOS immunohistochemistry in lung tissue. Magnification 400: There was no staining in the control group (a); reduction in the treated group (b) versus DM (c).

4. Resultaterne af den frie radikalfjernende virkning af det vandige ekstrakt fra A. V. I in vitro-analysen og i DPPH-analysen af frie radikaler viste en signifikant in vitro-antioksidant aktivitet. I begge analyser udtrykte ekstraktet en højere antioksidant aktivitet sammenlignet med det vandige ekstrakt af L. edodes, som er en anden svampeart, og som kun præsenterer saponiner, men ikke alkaloider eller flavonoider eller tanniner. Det er blevet foreslået af Ribeiro et al. kan være relateret til tilstedeværelsen af alkaloider i svampen. Med andre ord genererer højere alkaloidkoncentrationer bedre antioksidant aktivitet . det vigtigste fund i denne undersøgelse var reduktion af pulmonal lipoperoksidering hos rotter med diabetes efter behandling med Agaricus blisei. Tidligere undersøgelser har vist en glykæmi-reducerende virkning, som nedsætter insulinresistensen og forbedrer frigivelsen af det ved-pancreasceller . Imidlertid, A. Behandling her viste en gavnlig effekt med hensyn til variablerne relateret til den oksidative stress, på trods af ikke at reducere hyperglykæmi.

Kim et al. antidiabetogene virkninger af-glucaner ekstraheret fra A. Lamsei og dets hydrolyserede oligosacharider, evaluering af in vitro-og in vivo-virkningerne i dyrkning af-pancreasceller og hos dyr med diabetes. Efter behandling med-glucaner og oligosacharid viste dyrene reduktion i glykæmi, triglycerider og kolesterolniveauer og i aterosklerotisk aktivitet . I vores undersøgelse blev behandlingen udført ved anvendelse af et bruttoekstrakt af A. Blisei uden at isolere nogen af dets forbindelser, og dette er sandsynligvis forklaringen på manglen på antiglykæmisk virkning.

ekstraktet viste in vitro og in vivo antioksidant aktivitet, men behandlingen reducerede signifikant vægten af dyrene. Denne kendsgerning kan forklares på grund af høje doser af A. Blueberry ekstrakt, der anvendes i dette forsøg, forskelligt af doser, der anvendes i andre undersøgelser, der ikke viser vægttab . I en undersøgelse til evaluering af 90-dages subkronisk toksicitet af et vandigt ekstrakt hos rotter var der imidlertid ingen konsistente behandlingsrelaterede ændringer i kliniske tegn, kropsvægt og fødeforbrug i en dosis på 2654 mg kg-1 for hanrotter, en højere dosis end anvendt i vores undersøgelse . Flere undersøgelser var nødvendige for at evaluere den toksiske virkning af A. Blisei i disse doser med analysen af specifikke variabler. i diabetikergruppen blev den signifikant reduceret efter behandling med A. Denne stigning i glutathion kan tegne sig for de formindskede niveauer af reduceret glutathion, da det er det vigtigste substrat, der regulerer dets aktivitet. Gumienicek et al. det viser sig, at den pulmonale stress er til stede i eksperimentel DM på grund af reduktion af antioksidant aktivitet og øget lipoperoksidering. Sådanne ændringer er mere signifikante efter uger efter induktion. Under DM er der et fald i Cu,SN-SOD-aktivitet og en stigning i katalaseaktivitet . I vores undersøgelse blev hverken SOD eller katalaseaktivitet ændret i ingen af de forskellige grupper. En mulig forklaring på vores resultater, der adskiller sig fra Gumienicseks, er, at analysen af antioksidanter i vores undersøgelse blev udført tidligere.

i vores eksperimentelle model blev der observeret adskillige histologiske ændringer i lungesystemet. Disse ændringer er i overensstemmelse med dem , der er rapporteret i litteraturen, især med hensyn til stigningen i konjunktivt væv og fortykkelse af basallamina observeret ved hjælp af picrosirius-farvningsteknikken. Efter behandling med A. Blisei blev sådanne ændringer mindre tydelige. Dannelsen af intra-og intermolekylær binding med kollagen, der er resultatet af glycosyleringsprocessen, fører til strukturelle ændringer i vævsproteiner, såsom stigning i stivhed, resistens over for proteolytisk fordøjelse og den ekstracellulære matrice (inklusive fibronectin, procollagenkrus2, type III, IV og VI kollagen og laminina) . I vores undersøgelse kan hovedfaktoren for reversion af denne proces efter behandling med A. Blisei forklares ved reduktion af skader som følge af den oksidative stress demonstreret ved reduktion af pulmonal lipoperoksidering.

en langvarig hyperglykæmisk tilstand er relateret til ændringer i Inos-ekspression i flere væv . I den immunhistokemiske analyse af vores undersøgelse blev iNOS signifikant forøget i lungevævet hos diabetiske rotter og faldt signifikant, når dyrene blev behandlet med A. Blisei. Undersøgelser har vist, at mRNA-ekspression af endotel-nitratsyntase (eNOS) reduceres, hvorimod iNOS kan øges sammen med dannelsen af cyklisk guanosinmonophosphat (c-GMP) .

i en nyligt offentliggjort undersøgelse blev lipoperoksidering, superkilte-dismutaseaktivitet og fordelingen af Inos-og eNOS-isoformer evalueret i lungevæv hos diabetiske rotter. Der blev observeret en stigning i den oksidative stress samtidig med den forøgede iNOS i lungevævet hos diabetiske rotter, som blev reverseret i gruppen behandlet med antioksidant LARP-liposyre . Disse fund er i overensstemmelse med dem, der er rapporteret i det nuværende arbejde, såsom den observerede øgede oksidative stress, de histologiske lungeforandringer og effekten af en antioksidant terapi i denne DM-model.

denne undersøgelse viser den gavnlige virkning af A. Flarei vandig ekstrakt vedrørende oksidative stressvariabler og pulmonal morfopatologi i streptotocin-induceret diabetes. Disse fund kan bidrage væsentligt til en bedre forståelse af lungefysiopatologi i DM. Vores undersøgelse er også relevant og med hensyn til det terapeutiske potentiale af A.

anerkendelse

dette arbejde blev støttet af tilskud fra de brasilianske agenturer “Fundo de Incentvo og begivenheder (FIPE) do Hospital De Cl i Porto Alegre (HCPA)” og “Laborat i de Hepatologia e Fisiologia eksperimentel da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (HCPA / UFRGS)”.