Articles

Restrikční enzymy

V laboratoři, restrikční enzymy (nebo restriction endonucleases) se používají ke snížení DNA na menší fragmenty. Řezy jsou vždy prováděny na specifických nukleotidových sekvencích. Různé restrikční enzymy rozpoznávají a řezají různé sekvence DNA.

odkud pocházejí restrikční enzymy?

restrikční enzymy se nacházejí v bakteriích. Bakterie používají restrikční enzymy k zabíjení virů-enzymy napadají virovou DNA a rozkládají ji na zbytečné fragmenty.

jak restrikční enzymy fungují?

stejně Jako všechny enzymy, omezení enzym funguje podle tvaru-tvar odpovídající. Když přijde do styku se sekvencí DNA s tvarem, který odpovídá části enzymu, nazývaného rozpoznávací místo, ovine se kolem DNA a způsobí přerušení obou řetězců molekuly DNA.

každý restrikční enzym rozpoznává jiné a specifické rozpoznávací místo nebo sekvenci DNA. Rozpoznávací místa jsou obvykle jen krátká-4-8 nukleotidů.

kdy se používají restrikční enzymy?

restrikční enzymy jsou základním nástrojem pro biotechnologický výzkum. Používají se pro klonování DNA a otisky prstů DNA.

Různé typy omezení enzym

Vědci identifikovali a čistí stovky různých typů restrikční enzymy. Jsou pojmenovány podle rodu a druhu organismu, ze kterého byly izolovány, a dostávají číslo, které označuje pořadí, ve kterém byly nalezeny. Například, EcoRI byl první restrikční enzym izolovaný z bakterie Escherichia coli kmen RY13, vzhledem k tomu, HindIII byl třetí enzym izolovaný z bakterií Haemophilus influenzae kmen R d.

DNA fragmentů: Tupé, nebo lepivé konce?

DNA se skládá ze dvou komplementárních řetězců nukleotidů, které se točí kolem sebe ve dvojité šroubovice. Restrikční enzymy řez přes obě nukleotidů prameny, rozbití DNA na fragmenty, ale ne vždy to udělat stejným způsobem.

Několik je příklad omezení enzym, který řeže přímo skrze DNA, vytváření fragmentů DNA s plochou nebo tupým koncem.

Další restrikční enzymy, jako je EcoRI, procházejí řetězci DNA v nukleotidech, které nejsou přesně proti sobě. Tím se vytvoří fragmenty DNA s jedním nukleotidovým řetězcem, který na konci převisuje. Tento převislý nukleotidový řetězec se nazývá lepivý konec, protože se může snadno spojit s komplementárními fragmenty DNA.