Blod Og Marg Analyse

Begrensninger ledsager på generering av cellesuspensjoner gjelder ikke for pasienter med blod eller marg involvering av kroniske lymfoproliferative sykdommer. Subklassifisering av disse lesjonene er avhengig av flowcytometri.42,44,49-51 Kronisk lymfocytisk leukemi (KLL) er i hovedsak definert av dets immunfenotypiske egenskaper. Andre b-celle lymfoproliferative lidelser har karakteristiske, om ikke alltid helt spesifikke, fenotyper. Mantelcellelymfom kan ofte gjenkjennes i sin leukemiske fase, selv om den mest spesifikke markøren, cyclin D1, er svært vanskelig å oppdage ved strømning med dagens teknikker. Hårete celle leukemi har omvendt ikke bare en egenskap, men også en svært spesifikk fenotype42,50,52; noen ganger kan pasienter med uforklarlig pancytopeni bestemmes å ha hårete celle leukemi når bare et lite antall blodceller med den klassiske fenotypen er identifisert52 (Fig. 15-3).

Flowcytometri kan også oppdage prognostiske faktorer hos personer MED KLL. Erkjennelsen AV AT KLL kan deles inn i en dårlig prognose type assosiert med nonmutated immunoglobulin V region gener og en bedre prognose mutert fenotype, har flere studier forsøkt å identifisere flyt surrogater. DEN første markøren funnet å være prognostisk VAR CD38, selv om korrelasjonen med enten mutasjonsstatus eller prognose er ufullkommen.53,54 Zeta-kjede-assosiert proteinkinase 70 (ZAP 70) ser ut til å være en bedre surrogatmarkør, selv om den også ikke er perfekt; det gir imidlertid prognostisk informasjon.55-57 men selv om denne analysen er allment tilgjengelig, spesielt i kommersielle referanselaboratorier, kan cutoffs mellom positive og negative være vilkårlig, og dermed kan det være betydelig variasjon i resultatene mellom laboratorier.58,59 Forsøk har blitt Gjort for å forbedre reproduserbarheten, 60 men det er ikke alltid sikkert at en bestemt analyse vil gi de samme resultatene som i den publiserte kliniske litteraturen. Det er gjort andre forsøk på å definere prognostisk signifikante undergrupper av pasienter MED KLL ved bruk av andre kombinasjoner av markører, 61 men disse kombinasjonene er ikke vedtatt i rutinemessig praksis.den primære verdien av flowcytometri ved vurdering av kronisk leukemi er dens evne til å demonstrere klonalitet I b-cellepopulasjoner basert på begrenset ekspresjon av en type immunglobulin-lettkjede. Denne funksjonen er spesielt verdifull i evalueringen av pasienter med uforklarlig lymfocytose62, 63 og er også nyttig for å bestemme scenen hos pasienter med b-celle non-Hodgkin lymfom,64, 65 fordi tilstedeværelsen av så lite som 0,5% til 1% av en klonal b-cellepopulasjon, eller enda mindre, kan påvises i marg eller blod hos noen pasienter. Den høye sensitiviteten til flowcytometri for å påvise klonale populasjoner har imidlertid vist små klonale b-cellepopulasjoner hos noen pasienter uten åpenbar lymfom eller leukemi.66 funn av en liten benmargsklon bør derfor tolkes med forsiktighet i fravær av andre tegn på lymfom, analogt med å finne en monoklonal gammopati hos en pasient uten tegn på myelom.

Flowcytometri har også blitt brukt mye i studien av pasienter med myelom. En begrensning av flowcytometri er at plasmaceller er underrepresentert på margs aspirater studert ved strømning sammenlignet med forekomsten av celler på filmer eller i biopsier; som et resultat kan denne teknikken ikke brukes til å kvantifisere myelomceller og kan derfor ikke erstatte morfologi ved bruk av tradisjonelle diagnostiske kriterier. Plasmaceller har imidlertid en karakteristisk fenotype, inkludert meget lyst uttrykk FOR CD38 OG uttrykk FOR CD138, 67, 68 og er dermed lett å gjenkjenne. Ved bruk av membranpermeabiliseringsteknikker er det lett å demonstrere cytoplasmatisk immunoglobulin (Ig) lettkjedebegrensning.67 det er av større betydning at neoplastiske plasmaceller vanligvis har unormale fenotyper. Selv om ingen enkelt spesifikk fenotypisk abnormitet tillater skille mellom godartet monoklonal gammopati og myelom, kan flowcytometri likevel være nyttig for å skille myelom fra monoklonal gammopati av ubestemt betydning, eller å forutsi progresjon av monoklonal gammopati av ubestemt betydning eller ulmende myelom.69-71 videre har flowcytometrisk vurdering av unormale plasmaceller ved myelomdiagnose vist seg å ha prognostisk betydning.72 i tillegg er påvisning av sirkulerende plasmaceller eller varighet av en unormal fenotype etter behandling, inkludert påvisning av minimal restsykdom, prediktiv for utfallet hos pasienter med myelom.69,71,73-76

Klonalitet Av t-cellepopulasjoner kan også påvises ved flowcytometri, selv om metoden er mer kompleks og ikke er så allment tilgjengelig som den som brukes For B-celler. Denne teknikken er basert på demonstrasjon av begrensning Av V-beta-genbruk I T-celle leukemier.77-79 T – celle maligniteter viser også ofte unormale t-celle fenotyper, som oftest er preget av tap av et normalt pan-T-antigen eller uttrykk for Et t-celle antigen ved unormal intensitet.44,80,81 fordi visse små, uvanlige og til og med klonale t-cellepopulasjoner kan ses i små tall i ikke-neoplastiske forhold, har denne teknikken mer begrenset følsomhet enn demonstrasjon av en klonal b-cellepopulasjon. Men når unormale t-celler står for mer enn en svært liten prosentandel av celler, viser multiparameter flowcytometri dem lett og spiller en viktig rolle i å kategorisere disse uvanlige svulstene.