Laboratoriediagnose

Differensialdiagnose blant andre ameba

Patogene Entamoeba-arter må differensieres fra andre intestinale protozoer som Ikke-patogene ameba (Entamoeba coli, e. hartmanni, e. gingivalis, Endolimax nana, Iodamoeba buetschlii) og flagellat Dientamoeba fragilis. Morfologisk differensiering blant disse er mulig, men potensielt komplisert, basert på morfologiske egenskapene til cyster og trophozoites.

i kultur, differensielle vekstegenskaper Av E. moshkovskii kan hjelpe til med å skille den fra andre arter, men kulturmetoder har viktige begrensninger (manglende blandede infeksjoner, forurensning, arbeidsintensiv, begrenset tilgjengelighet). Historisk var differensiering Av e. dispar og e. histolytica basert på isoenzymatisk eller immunologisk analyse, men disse er ikke lenger favorisert med tilgjengeligheten av effektive molekylære metoder og utføres sjelden. Molekylære metoder anbefales for tiden for å skille mellom patogene Entamoeba-arter.

Mikroskopisk Deteksjon

Mikroskopisk identifisering av cyster og trofozoitter i avføringen er den vanlige metoden for å diagnostisere patogene Entamoeba-arter. Dette kan oppnås ved å bruke:

• Frisk avføring: våte fester og permanent farget preparater(f. eks trichrome).
• Konsentrater fra fersk avføring: våte fester, med eller uten jod flekk, og permanent farget preparater(f. eks trichrome). Mens det er nyttig for cyster, kan konsentrasjonsmetoder ikke være nyttige for å demonstrere trofozoitter.Mikroskopi har også lav følsomhet hvis bare en avføringsprøve analyseres, og krever personell opplært i morfologisk diagnose. Innsamling og analyse av tre påfølgende avføringsprøver innen ti dager forbedrer sjansene for deteksjon. Også, e. dispar, e. histolytica Og e. moshkovskii er ikke skillebare basert på morfologi.Trofozoitter kan også identifiseres i aspirater eller biopsiprøver oppnådd under koloskopi eller kirurgi.
  

  Immunodiagnosis

  Enzymimmunoassay (EIA) kits For Entamoeba histolytica antistoff deteksjon samt EIA kits for antigen deteksjon er kommersielt tilgjengelig i Usa. Antistoffdeteksjon er mest nyttig hos pasienter med ekstraintestinal sykdom (dvs. amebisk leverabscess) når organismer vanligvis ikke finnes ved avføring. Antistoffdeteksjon er av begrenset diagnostisk verdi hos pasienter fra svært endemiske områder som sannsynligvis har tidligere eksponering og serokonversjon, men kan være av mer bruk hos pasienter fra områder hvor patogen Entamoeba Spp. er sjeldne. Antigen deteksjon under aktive infeksjoner kan være nyttig som et supplement til mikroskopisk diagnose ved påvisning av parasitter og kan skille mellom patogene og ikke-patogene infeksjoner.

  Antistoffdeteksjon

  den indirekte hemagglutineringstesten (iha) er erstattet av kommersielt tilgjengelige EIA – testsett for rutinemessig serodiagnose av amebiasis. Antigen består av et råoppløselig ekstrakt av aksenisk dyrkede organismer. EIA-testen oppdager antistoff spesifikt For E. histolytica hos ca 95% av pasientene med ekstraintestinal amebiasis, 70% av pasientene med aktiv tarminfeksjon og 10% av asymptomatiske personer som passerer cyster Av e. histolytica. Hvis antistoffer ikke kan påvises hos pasienter med akutt mistanke om amebisk leverabscess, bør det tas en ny prøve 7-10 dager senere. Hvis det andre prøven ikke viser serokonversjon, bør andre midler vurderes. Detekterbar E. histolytica-spesifikke antistoffer kan vedvare i mange år etter vellykket behandling, så tilstedeværelsen av antistoffer indikerer ikke nødvendigvis akutt eller aktuell infeksjon. Også pasienter som har bodd i svært endemiske områder, er sannsynligvis seropositive på grunn av tidligere eksponeringer. Specificitet er 95% eller høyere: falske positive reaksjoner forekommer sjelden.

  selv om påvisning Av IgM-antistoffer som er spesifikke For e. histolytica er rapportert, er sensitiviteten bare ca. 64% hos pasienter med nåværende invasiv sykdom. Flere kommersielle EIA-sett for antistoffdeteksjon er tilgjengelige i Usa. Det finnes ingen kommersielle antistoffdeteksjonssett for E. dispar eller e. moshkovskii eller e. bangladesh.

  Antigen deteksjon

  antigen deteksjon kan være nyttig som et supplement til mikroskopisk diagnose ved påvisning av parasitter og for å skille mellom patogene og ikke-patogene infeksjoner. Verktøyet er imidlertid begrenset for frosne eller faste prøver og for prøver etter behandling. Nyere studier indikerer økt sensitivitet og spesifisitet av fecal antigen analyser ved bruk av monoklonale antistoffer som kan skille Mellom e. histolytica og e. dispar infeksjoner. Minst ett kommersielt sett er tilgjengelig som bare oppdager patogen e. histolytica-infeksjon i avføring; flere sett er tilgjengelige som oppdager e. histolytica-antigener i avføring, men utelukker Ikke e. dispar-infeksjoner.

  Molekylær Diagnose

  Konvensjonell PCR

  i referansediagnostikklaboratorier er molekylær analyse ved konvensjonelle PCR-baserte analyser den valgte metoden for å diskriminere Mellom e. histolytica og E. dispar. Noen analyser kan også skille E. moshkovskii. En TaqMan sanntids PCR-tilnærming har blitt validert VED CDC og brukes til differensiell laboratoriediagnose av amebiasis. Analysen retter seg mot 18s rRNA-genet med artsspesifikke TaqMan-prober i et dupleksformat, noe som gjør det mulig å oppdage Både e. histolyrica og E. dispar i samme reaksjonsbeholder.Qvarnstrom Y, James C, Xayavong M, Holloway B, Moura I, Visvesvara GS, Et al. Sammenligning AV sanntids PCR-rasjoner for differensial laboratoriediagnose av amebiasis. J Clin Mikrobiol 2005; 43: 5491-5497.

  Laboratoriesikkerhet

  Cyster i ufiksede avføringsprøver er potensielt smittsomme. Følg standard forholdsregler som gjelder for avføringsprøver: https://www.cdc.gov/dpdx/diagnosticprocedures/stool/safety.html.