血液および骨髄分析

細胞懸濁液の生成に関する制限は、慢性リンパ増殖性疾患による血液または骨髄の関与を有する患者には適用されない。 これらの病変の亜分類は、フローサイトメトリーに大きく依存している。42,44,49-51慢性リンパ球性白血病（CLL）は、本質的にその免疫表現型特性によって定義されています。 他のB細胞リンパ増殖性疾患は、必ずしも絶対的に特異的ではないにしても、特徴的な表現型を有する。 最も特異的なマーカーであるサイクリンD1は、現在の技術では流れによって検出することは非常に困難であるが、マントル細胞リンパ腫はしばしばその白血病期に認識されることがある。 有毛細胞白血病は、逆に、特徴だけでなく、非常に特異的な表現型を有する42,50,52;時折、原因不明の汎血球減少症を有する患者は、古典的な表現型を有する血液細胞のほんの数が同定されたときに有毛細胞白血病を有すると決定することができる52(Fig. 15-3).

フローサイトメトリーは、CLL患者の予後因子を検出することもできます。 CLLは、非変異免疫グロブリンV領域遺伝子とより良い予後変異表現型に関連付けられている予後不良型に細分することができることを認識し、いくつかの研究は、フローサロゲートを同定しようとしています。 予後であることが判明した最初のマーカーはCD38であったが、変異状態または予後のいずれかとの相関は不完全である。それはあまりにも完璧ではありませんが、53,54ゼータ鎖関連プロテインキナーゼ70（ZAP70）は、より良いサロゲートマーカーであるように見えます; しかし、それは予後情報を提供します。55-57しかし、このアッセイは、特に商業的な参照実験室で広く利用可能であるにもかかわらず、正と負の間のカットオフは任意であり、したがって、結果の有意な変動は、実験室間で存在する可能性があります。再現性を改善するために58,59の試みが行われているが、特定のアッセイが公表された臨床文献の結果と同じ結果を与えることは必ずしも確実ではない60。 他のマーカーの組み合わせを使用してCLL患者の予後的に有意なサブセットを定義するための他の試みがなされている61が、これらの組み合わせは、ルーチン

慢性白血病を評価する際のフローサイトメトリーの主要な価値は、免疫グロブリン軽鎖の一つのタイプの制限された発現に基づいてB細胞集団 この特徴は、原因不明のリンパ球を有する患者の評価において特に有用である62,63また、b細胞非ホジキンリンパ腫を有する患者の段階を決定するために有用である64,65クローンB細胞集団の0.5％から1％、またはそれ以下の存在が一部の患者の骨髄または血液中で実証される可能性があるためである。 しかし，クローン集団を検出するためのフローサイトメトリーの高感度は，明らかなリンパ腫または白血病のない一部の患者において小さなクローンＢ細胞集団を示した。66したがって、骨髄腫の証拠のない患者でモノクローナルガンモパシーを発見するのと同様に、リンパ腫の他の証拠がない場合には、小さな骨髄クローンの発見は慎重に解釈されるべきである。

フローサイトメトリーは、骨髄腫患者の研究にも広く使用されている。 フローサイトメトリーの一つの制限は、形質細胞は、フィルム上または生検で細胞の有病率と比較して流れによって研究骨髄吸引に過小評価されている; その結果、この技術は骨髄腫細胞を定量化するために使用することができず、伝統的な診断基準を適用するときに形態を代用することができない。 しかし、形質細胞は、ＣＤ３ ８の非常に明るい発現およびＣＤ１ ３ ８、６ ７、６ ８の発現を含む特徴的な表現型を有し、したがって認識が容易である。 膜透過性技術を使用することにより、細胞質免疫グロブリン（Ｉ ｇ）軽鎖制限を示すことは容易である。腫瘍性形質細胞が通常異常な表現型を有することはより重要である。 単一の特定の表現型の異常が温和なmonoclonal gammopathyと骨髄腫の区別を可能にしないが、フローサイトメトリーはまだ未確定の重大さのmonoclonal gammopathyから骨髄腫を区別するか、または未確定の重大さのmonoclonal gammopathyまたはくすぶる骨髄腫の進行を予測するのに有用である。69-71さらに、骨髄腫の診断時の異常形質細胞のフローサイトメトリー評価は、予後的意義を有することが示されている。さらに、循環形質細胞の検出または治療後の異常な表現型の持続（最小残存疾患の検出を含む）は、骨髄腫患者における転帰の予測である。69,71,73-76

t細胞集団のクローン性は、フローサイトメトリーによっても実証することができますが、この方法はより複雑であり、B細胞に使用されるほど広 この技術は、T細胞白血病におけるV-β遺伝子使用の制限の実証に基づいています。77-79T細胞悪性腫瘍はまた、しばしば異常なT細胞表現型を示し、最も頻繁には、正常なpan-T抗原の喪失または異常な強度でのT細胞抗原の発現によ44,80,81特定の小さな、珍しい、さらにはクローンT細胞集団は、非腫瘍性条件で少数で見ることができるので、この技術は、クローンB細胞集団の実証よりも ただし、異常なT細胞が細胞の非常に小さいパーセントより多くを占めるとき、multiparameterの流れのcytometryは容易にそれらを示し、これらの珍しい腫瘍の分類の重要な