Nissl染色

核およびnissl体（粗小胞体）をクレシルバイオレットで青紫色に染色する。Ｋｌｕｖｅｒ−Ｂａｒｒｅｒａ（Ｋ Ｂ）染色にはＮｉｓｓｌ染色を使用する。＜／ｐ＞＜ｐ＞Ｎｉｓｓｌ染色を使用する。

• 染色手順
• 分化に関する重要な考慮事項

染色手順

1	デパラフィン化	キシレン	3つの変更、各10minuntes
2	キシレンの除去	100％エタノール	3つの変更、5分ごと
3	水和	95％、70％エタノール	5分ごと
4	洗浄	水道水を実行	2分	tr>
5	リンス	リンス	リンス	リンス	水
6	染色	0.1％クレシルバイオレット溶液	10分、37℃
7	分化	95％エタノール+10％酢酸溶液を数滴	約5-10分。 脱色は次のステップで進行するので、過剰分化しないように注意する必要があります。
8	分化	95％、100％エタノール	それぞれ約1分。 核とnissl体のみが青紫色になるまで区別する。
9	微視的チェック		ステップ⑦&moreは、より多くの分化が必要な場合に繰り返されることがあります。
100%エタノール	2変化、それぞれ5分
11クリア	キシレン	3変化、それぞれ10分
12	カバースリ

0.1%クレシルバイオレット水溶液（使用前のフィルター）

クレシルバイオレット

1g

蒸留水

1000ml

クレシルバイオレットのpH

染色方法は、染色液のpHによって異なります。 3.0に近いpHでは、Nissl体、核小体、および核膜のみが淡い青色に染色される。 グリア細胞の核は非常にわずかに染色されているだけです。 PHが増加すると、色は全体的に暗くなり、神経細胞、神経線維、およびグリア細胞の細胞質は共染色される。 共染色は4.0のpHの近くで激化します。 そのため、より長い分化時間が必要とされる。

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  ph3.0
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  ph4.7

クレシルバイオレットの種類

クレシルバイオレットの三つのタイプは、現在、神経病理学th>

製品名 メーカー 可用性 クレシルバイオレットアセテート EMサイエンス 在庫切れ クレシルバイオレットアセテート クレシルバイオレットアセテート シグマ 市販されている クレシルバイオレットアセテート シグマ 市販されている 市販されている 市販されている 市販されている 市販されている 市販されている クレシルバイオレット（酢酸） メルク 市販されている

クレシルバイオレット製品によって分化時間が異なる

染色液 したがって、染色方法も異なる。 製品によって差別化に必要な時間が異なることに注意することが重要です。 しかし、いずれの製品を使用しても、顕微鏡下での試料の分化および観察によって、最終的に同じ染色色画像を得ることができる。

製品名	メーカー	pH0.1％クレシルバイオレット溶液	95％エタノールでの分化時間
クレシルバイオレットアセテート	EM SCIENCE	3。5	10-30秒
酢酸クレシルバイオレット	シグマ	4.7	10分約
クレシルバイオレット（酢酸）	メルク	4.8	10分約

※sigmaおよびmerck染色液に10％酢酸を適切な量添加することにより、phを3.5から約3.8に調整することができ、95％エタノールでの分化に必要な時間 ただし、このソリューションを再利用することはお勧めしません。

分化に関する重要な考慮事項

背景が白くなるまで分化を実行します。 神経細胞核の核小体および核膜を明瞭にし、クロマチンをかすかに染色することが理想的である。

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クレシルバイオレットアセテート（シグマC5042）PH4.7は、両方のセクションで使用されました。

左の写真：95％エタノールのみ10秒間分化。 分化が不十分であると、神経細胞全体が青色に染色され、核およびNissl体を同定することが不可能になる。右の写真：95％エタノールを10分間分化させる。 十分な分化は、ニューロンの核およびNissl体を明確に分化させることを可能にする。