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Microscopie U – La source pour l’éducation en microscopie

Le résultat est le grossissement minimum pour l’observation visuelle des détails de l’échantillon finement espacés, qui est environ 500 fois l’ouverture numérique objective. Cette discussion s’applique aux spécimens ayant un contraste moyen, mais avec des spécimens de contraste plus élevé, les deux points peuvent être résolus par des grossissements plus élevés même s’ils sont plus proches l’un de l’autre. En pratique, on utilise souvent des grossissements s’écartant considérablement de la plage de grossissement utile. Par exemple, des grossissements très faibles (1x à 4x) sont souvent utilisés pour cartographier un spécimen (comme une section mince colorée histologiquement) où un large champ de vision est souhaitable afin de noter rapidement toutes les caractéristiques de l’échantillon disponible. Dans de nombreux cas, un objectif de 2,5 x peut être combiné à un oculaire à champ large avec un grossissement de 10x pour révéler une zone ayant un diamètre de 8 millimètres ou plus.

À des grossissements élevés, la limite de grossissement utile est parfois dépassée afin de visualiser l’image plus confortablement. C’est souvent le cas lorsque de petites particules ou organismes sont observés et comptés à des ouvertures et des grossissements numériques très élevés. La netteté des détails de l’échantillon est ensuite sacrifiée, ce qui n’interfère généralement pas avec l’analyse quantitative de l’image.

Des précautions doivent être prises dans le choix des combinaisons oculaire / objectif pour assurer un grossissement optimal des détails de l’échantillon sans ajouter d’artefacts inutiles. Par exemple, pour obtenir un grossissement de 250x, le microscopiste pourrait choisir un oculaire 25x couplé à un objectif 10x. Un autre choix pour le même grossissement serait un oculaire 10x avec un objectif 25x. Parce que l’objectif 25x a une ouverture numérique plus élevée (environ 0,65) que l’objectif 10x (environ 0,25), et compte tenu du fait que les valeurs d’ouverture numériques définissent la résolution d’un objectif, il est clair que ce dernier choix serait le meilleur. Si des photomicrographies du même champ de vision étaient réalisées avec chaque combinaison objectif / oculaire décrite ci-dessus, il serait évident que le duo oculaire 10x / objectif 25x produirait des photomicrographies qui excelleraient dans le détail et la clarté de l’échantillon par rapport à la combinaison alternative.