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Implicación de radicales superóxido en la formación de adrenocromo estimulada por ácido araquidónico en vesículas sarcolémicas de corazón bovino

Membranas sarcolémicas altamente purificadas preparadas a partir de músculo cardiaco bovino producen radicales superóxido, especialmente cuando se incuban con NADPH o NADH, como se revela por la oxidación de adrenalina a adrenocromo. La reacción fue inhibida por la superóxido dismutasa o por la desnaturalización térmica de las vesículas sarcolémicas. Menos evidente fue el efecto inhibitorio mostrado por la catalasa, mientras que el manitol, la deferoxamina o el dicumarol fueron ineficaces. La formación de adrenocromo fue una reacción dependiente del oxígeno con un Km de adrenalina de 8-10 microM. Además, la reacción fue inhibida por la preincubación de las membranas sarcolémicas con propranolol, mientras que el antagonista alfa fentolamina no tuvo efecto. La oxidación de adrenalina no se vio afectada por la presencia de ácido linolénico exógeno o ácido metilaraquidónico, mientras que el ácido araquidónico, con un Km para esta reacción de 175 microM, mostró un marcado efecto estimulante. Esta activación fue suprimida por superóxido dismutasa, catalasa y NaCN, mientras que el manitol no tuvo efecto. Además, la reacción fue bloqueada por el inhibidor de la ciclooxigenasa indometacina, a diferencia del inhibidor de la lipooxigenasa ácido nordihidroguaiarético. Además, la incubación de las vesículas sarcolémicas con fosfolipasa A2 y calcio produjo una estimulación de la formación de adrenocromo que fue parcialmente suprimida por la albúmina. En los experimentos con ácido araquidónico o fosfolipasa A2, la adición de indometacina bloqueó la oxidación de adrenalina. Estos resultados indican que el ácido araquidónico acentuó la formación de adrenocromo sarcolémico cardíaco presumiblemente al participar en la reacción de ciclooxigenasa.