Efecto de Agaricus blazei Murill en el Tejido pulmonar de Animales con Diabetes Inducida por estreptozotocina
Resumen
El presente estudio se diseñó para evaluar el estrés oxidativo y el efecto terapéutico de Agaricus blazei Muril (A. Blazei) en ratas con diabetes inducida por estreptozotocina. Utilizamos 25 ratas Wistar, y la DM se indujo inyectando estreptozotocina (70 mg / Kg i. p.). Agaricus blazei Muril se administró diariamente comenzando 40 días después de la aparición de la enfermedad. A. Blazei se probó como extracto acuoso por su composición fitoquímica, y también se evaluó su actividad antioxidante in vitro. Se midieron las actividades de lipoperoxidación (LPO), superóxido dismutasa (SOD), catalasa y glutatión peroxidasa en el tejido pulmonar, así como la presencia de óxido nítrico sintasa inducible (iNOS), mediante inmunohistoquímica. También se realizó un estudio anatomopatológico. El cribado fitoquímico de A. Blazei detectó la presencia de alcaloides y saponinas. El extracto exhibió una actividad antioxidante significativa en los ensayos de eliminación de DPPH y hipoxantina/xantina oxidasa. La LPO pulmonar aumentó en animales diabéticos (; ) en comparación con el grupo de control (), seguido de una reducción en el grupo tratado con A. Blazei (; ). Se encontró un aumento de iNOS en los pulmones en ratas diabéticas y una reducción en el grupo tratado con A. Blazei. El tejido pulmonar en ratas diabéticas mostró alteraciones oxidativas relacionadas con el tratamiento con estreptozotocina. El tratamiento con A. Blazei redujo eficazmente el estrés oxidativo y contribuyó a la recuperación de los tejidos.
1. Introducción
La diabetes mellitus (DM) es una enfermedad metabólica endocrina de creciente incidencia y relevancia clínica con altas tasas de morbimortalidad . Entre sus complicaciones crónicas se encuentran los trastornos vasculares micro y macro relacionados con los sistemas renal, cardiovascular y nervioso . Sin embargo, en las últimas dos décadas, también se han reportado cambios en la función respiratoria en estudios clínicos y experimentales. La disminución de la función pulmonar a lo largo de los años, relacionada con la disminución de las medidas de volumen y capacidad pulmonares, se evidenció en pacientes diabéticos con deterioro del control metabólico . Las alteraciones estructurales de la membrana basal del endotelio capilar pulmonar también están presentes en la DM, con un engrosamiento de la membrana alveolo-capilar y reducción de la capacidad difusora . Además, los pacientes diabéticos son más susceptibles a las infecciones pulmonares, en particular la tuberculosis, que tiene una incidencia cuatro veces mayor en esta población en particular . Aunque todas estas alteraciones se evidenciaron en estudios clínicos y experimentales, pocos estudios investigaron los principales mecanismos fisiopatológicos que involucran complicaciones pulmonares relacionadas con la DM.
Hay 4 vías asociadas con complicaciones crónicas de la DM, a saber, la vía del poliol, la activación de la proteína quinasa C (PKC), el aumento del flujo en la vía de la hexosamina y la vía de los productos finales de glicosilación avanzada (AGE). Aunque se presenta de manera diferente en cada caso, el estrés oxidativo (SG) está implicado en las cuatro vías citadas anteriormente .
Hay mucha evidencia que muestra que el aumento del óxido nítrico (NO), formado por la acción de la óxido nítrico sintasa inducible (iNOS) es uno de los factores responsables tanto de la patogénesis como de las complicaciones resultantes de la DM . El uso de antioxidantes exógenos puede representar un gran potencial terapéutico para el tratamiento de la DM
El basidiomiceto Agaricus blazei Murill (A. Blazei), popularmente conocido como «hongo solar», es nativo de Brasil y ampliamente cultivado en Japón debido a sus propiedades medicinales. Este hongo se utiliza tradicionalmente en el tratamiento de la aterosclerosis, la hepatitis, la hiperlipidemia, la dermatitis y el cáncer, y se ha demostrado que tiene efectos inmunomoduladores y antimutagénicos tanto in vivo como in vitro. Los polisacáridos α-glicano y β-glicano son responsables de la función de estimulación inmunológica y antitumoral .
A. Blazei ya ha demostrado ser beneficioso en la resistencia a la insulina relacionada con la diabetes tipo 2, pero ningún estudio ha demostrado el potencial antioxidante de A. Blazei in vivo en DM . Así, este estudio fue diseñado para evaluar el estrés oxidativo y el efecto terapéutico de A. Blazei en el tejido pulmonar de animales con DM inducida por estreptozotocina.
2. Métodos
2.1. Setas
Setas secadas al aire de la especie Agaricus blazei Murill (tipo C) fueron un regalo del Dr. Luiz Antônio Graciollo, Departamento de Ingeniería de la Universidad Estadual de São Paulo (UNESP), Brasil.
2.2. Preparación de Extracto acuoso de A. blazei
Se molieron partes secadas al aire (100 g) y el extracto acuoso se preparó por infusión (1/10 hongo/disolvente). La perfusión se mantuvo a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después del enfriamiento y filtración, el extracto se congeló y concentró por liofilización durante cinco días durante la noche, para obtener el extracto acuoso de A. blazei.
2.3. Productos químicos y reactivos
2,2-Difenil-1-picrilhidrazilo (DPPH), hipoxantina, xantina oxidasa, trolox y ácido salicílico se compraron a Sigma (St.Louis, EE. UU.).
2.4. Cribado fitoquímico
Análisis fitoquímico (flavonoides, taninos, antraquinonas, alcaloides, saponinas, cumarinas y glucósidos cardíacos) de A. blazei se llevó a cabo de acuerdo con los métodos descritos por Harborne . Los análisis de cromatografía de capa delgada se realizaron siguiendo los sistemas y desarrolladores indicados por Wagner y Bladt .
2.5. Ensayo de hipoxantina/Xantina Oxidasa
El método empleado para evaluar la capacidad de eliminación de radicales hidroxilo de los extractos se basó en el método de Owen et al. . Brevemente, el extracto se disolvió en el tampón de ensayo (hipoxantina, Fe(III), EDTA y ácido salicílico) a una concentración de 2,0 mg/ml y se diluyó adecuadamente (por triplicado) en el tampón de ensayo hasta un volumen final de 1.0 mL dando un rango de 0,1 a 2,0 mg / ml. Se añadió una alícuota de 5 L de xantina oxidasa disuelta en 3,2 M (NH4)2SO4 para iniciar la reacción. Los tubos de muestra se incubaron durante 3 horas a 37 ° C, momento en el que se completó la reacción. Se analizó una alícuota de 30 L de la mezcla de reacción por HPLC utilizando condiciones cromatográficas descritas por Owen et al. . El análisis cromatográfico se realizó utilizando un gradiente basado en metanol/agua/ácido acético con una columna de fase inversa µBondaPak C18 y detección a 325 nm. El equipo de HPLC tenía un módulo de separación 2695 y un detector UV 2487. Se monitorizó la hidroxilación del ácido salicílico y la hipoxantina a = 325 nm y A = 278 nm, respectivamente. La cantidad de dihidroxifenoles (ácido 2,5-dihidroxibenzoico y ácido 2,3-dihidroxibenzoico) (2,5-DHBA y 2,3-DHBA) producidos por el ataque del radical hidroxilo (OH•) al ácido salicílico se determinó a partir de curvas estándar preparadas con los respectivos dihidroxifenoles puros.
2.6. Ensayo de eliminación de DPPH
La eliminación de radicales libres de DPPH se midió utilizando un método modificado descrito por Yamaguchi et al. en el que se añadieron los diferentes extractos de plantas metanólicas al tampón Tris–HCl (100 mm), pH 7,0, que contiene 250 mm de DPPH disuelto en metanol. Se probaron al menos seis diluciones diferentes de cada extracto, que se dejaron reposar 20 minutos en la oscuridad, antes de medir la absorbancia a 517 nm utilizando un espectrofotómetro Shimadzu modelo UV-1602PC (Kioto, Japón). El experimento se realizó por triplicado. La actividad antioxidante (AOA) se expresó como CI50 (concentración inhibitoria en g/ml de muestras o controles positivos necesarios para reducir la absorbancia de DPPH en un 50% en comparación con el control negativo). Cuanto más bajo es el IC50, más alto es el AOA .
2.7. Animales y Protocolo Experimental
El protocolo experimental utilizado cumplió con las normas establecidas por el Comité de Investigación Ética y en Salud del Grupo de Investigación y Estudios de Posgrado del Hospital de Clínicas de Porto Alegre, así como con los Principios para la Investigación con Animales (NAS). Solo se utilizaron ratas Wistar macho, obtenidas de la colonia de cría del Instituto de Ciências Básicas da Saúde da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS). El peso medio de los animales al inicio del estudio era de 200-300 gramos. Se mantuvieron en un ciclo de luz/oscuridad de 12 : 12 horas (luz de 7 a.m. a 7 p. m.) en un ambiente con temperatura controlada (22 ± 4°C).
La DM se indujo mediante una inyección única de estreptozotocina i. p. (STZ, Sigma Chemical Company, St. Louis, MO, EUA) a una dosis de 70 mg/Kg de peso corporal . STZ se disolvió en tampón de citrato de sodio (0,1 M, pH 4.5) y administrado en la región abdominal izquierda del animal aproximadamente 10 minutos después de la disolución en la solución tampón. Los animales del grupo de control recibieron solamente NaCl al 0,9% i. p. al mismo volumen del tampón utilizado para disolver la ZST. El extracto de A. blazei se diluyó a una concentración de 0,1 g / ml (10%) en una solución de agua destilada y se dejó durante 2 horas a temperatura ambiente . La vía de administración fue una sonda gástrica con una solución final de 2 ml y el tratamiento se inició a partir del día 40 de inducción de la diabetes. Los animales fueron aleatorizados en los diferentes grupos: control (CO), diabéticos tratados con NaCl (DM) y diabéticos tratados con A. blazei (DM + A. blazei). Se recogieron muestras de sangre del plexo retroorbitario un día antes de la inducción y 2 y 30 días después del inicio del experimento. Al final de los 60 días de ensayo, los animales fueron inducidos a la eutanasia por desangrado, después de anestesiados con xilasina y ketamina. Se muestreó sangre del plexo retroorbitario y se diseccionó el pulmón derecho y se mantuvo en formaldehído al 4% para el análisis histológico. Se extirpó el pulmón izquierdo y se congeló a -80 ° C para análisis adicionales.
2.8. Análisis séricos
Las muestras de sangre se colocaron en un tubo de prueba con heparina (liquemina) para evitar la coagulación. El material se centrifugó a 1.800 g durante 15 minutos. Se desechó el precipitado y se eliminó el plasma.
Para determinar los niveles de glucosa, colesterol y triglicéridos se utilizó la prueba enzimática colorimétrica (Kit Labtest, Bio Diagnóstico) y se midió la absorbancia en espectrofotómetro (CARY 3E-Espectrofotómetro UV-Visible Varian). Los animales con una concentración de glucosa superior a 250 mg/dL se consideraron diabéticos.
2.9. Análisis Bioquímicos de Estrés Oxidativo y Ensayo Antioxidante
Los pulmones se homogeneizaron con 9 mL de tampón de fosfato (KCL 140 mM, fosfato 20 mM, pH 7,4) por gramo de tejido. La concentración de proteínas en estos homogeneizados pulmonares se determinó utilizando una solución estándar de albúmina bovina según Lowry et al. .
La lipoperoxidación pulmonar se determinó por el método de sustancias reactivas del ácido tiobarbitúrico (TBA-RS) .La actividad de la superóxido dismutasa (SOD) en el tejido pulmonar se determinó mediante una técnica basada en la inhibición de la formación de adrenocromo en la autoxidación de epinefrina . La actividad de la catalasa (CAT) en el tejido pulmonar se determinó como se describe en otra parte y la determinación de la glutatión peroxidasa dependiente de selenio en el tejido pulmonar se obtuvo a través de una técnica que consiste en la medición de la oxidación de NADPH por glutatión reductasa .
2.10. Estudio histológico
Para el análisis histológico, las muestras se incrustaron en parafina dos veces. Usando un microtomo, los bloques de parafina se cortaron en secciones seriadas de 3 m. En la fase de tinción, los portaobjetos se sumergieron en hematoxilina-eosina y picrosirio. En la fase de deshidratación, las estructuras pasaron por tres recipientes con alcohol absoluto y dos recipientes con xilol. La lectura se realizó con microscopía de luz (Nikon Labophot) a 100. El análisis fue realizado por 2 patólogos que desconocían los detalles del estudio.
2.11. La detección inmunohistoquímica de reacciones inmunohistoquímicas de iNOS
se realizó en secciones de tejido pulmonar mediante la técnica del complejo estreptavidina-biotina peroxidasa (StreptABC, DAKO). Los portaobjetos se recubrieron previamente con una solución de silano (APTS, Sigma) diluida en acetona al 4%. se obtuvieron secciones de 3 m de espesor utilizando un microtomo mecánico. Las secciones se desparafinizaron y se sumergieron sucesivamente en xilol y etanol y se sometieron a recuperación antigénica por irradiación de calor en olla a presión (Eterna, Nigro) utilizando tampón de citrato (10 mM, pH 6,0) durante 15 minutos. El bloqueo de peroxidasa se realizó con una solución de peróxido de hidrógeno al 3%, seguida de incubación con anticuerpo primario contra NOS-2 (iNOS, 1 : 40, Santa Cruz). Las reacciones se marcaron con solución de diaminobencidina (DAB, Sigma) a 60 mg% y se contrarrestaron con hematoxilina de Harris (Merck). Para cada reacción se utilizó un control positivo para el tejido que se sabía que era positivo para el anticuerpo analizado. También se utilizaron dos controles negativos, el primero por ausencia del anticuerpo primario y el segundo por eliminación del anticuerpo secundario durante los pasos de reacción. Los casos se consideraron como iNOS positivos cuando la coloración marrón de al menos intensidad moderada era visible en el citoplasma celular y en más del 10% de las células.
2.12. Análisis estadístico
Los datos se presentan como media ± desviación estándar (DE) y se analizaron mediante el software estadístico SPSS 15.0. La normalidad de las variables se comprobó mediante la prueba de Kolmogorov-Smirnov. Para las diferencias intergrupales se utilizó el análisis de varianza unidireccional (ANOVA). Se utilizó el test post hoc de Student Newman-Keuls para las variables paramétricas y de Kruskal-Wallis para las no paramétricas. El nivel de significación utilizado fue .
3. Resultados
3.1. Análisis fitoquímicos
Los análisis fitoquímicos de A. blazei indicaron la presencia de saponinas y alcaloides. No se detectaron otros metabolitos secundarios, como antraquinonas, glucósidos cardíacos, cumarinas, flavonoides, ácidos fenólicos y taninos.
3.2. Ensayo in Vitro de hipoxantina/Xantina Oxidasa
La actividad antioxidante in vitro del extracto se determinó mediante el control de la producción de ácidos hidroxil benzoicos (DHBA) como producto del ataque de radicales hidroxilo al ácido salicílico en el ensayo de hipoxantina-xantina oxidasa. La reducción de los productos de oxidación total en función de la concentración de extracto acuoso de A. blazei añadido al ensayo dio lugar a una capacidad antioxidante in vitro dependiente de la dosis. El extracto acuoso de A. blazei redujo la formación de ambas especies de DHBA a 45.2 % en la concentración más alta utilizada (2 mg/ml). Se calculó el valor de CI50 y se encontró que era de 0,99 mg / ml. Un segundo tipo de hongo (Lentinula edodes) para el que los autores no encontraron la presencia de alcaloides se utilizó como muestra de control (CI50 de 1,95 mg/ml). Se utilizó Trolox (vitamina E) como control positivo y se mostró una CI50 de 0,34 mg/ml (Figura 1).
3.3. Ensayo de eliminación de DPPH
El efecto de eliminación de radicales libres de los dos extractos acuosos de A. blazei, L. se probó el extracto acuoso de edodoes, así como trolox, como control positivo, utilizando el ensayo de eliminación de radicales libres DPPH . Los valores de CI50 para el extracto acuoso de A. blazei y para el extracto de L. edodes se muestran en la Tabla 1. Para validar el ensayo se utilizaron los resultados del efecto eliminador de radicales libres de trolox (CI50 = 0,02 mg/ml), utilizado como control positivo. Aunque la capacidad de eliminación de radicales libres de los extractos fue menor (se necesitan concentraciones más altas para reducir la absorbancia de DPPH en un 50%) que el efecto de trolox, la A. el extracto acuoso de blazei (con mayor contenido de flavanona) presentó una actividad antioxidante prometedora con una CI50 de 1,77 mg/ml. L. edodes, por otro lado, tuvo la actividad de eliminación de residuos más baja (IC50 = 3,22 mg/ml), lo que concuerda con la ausencia de alckloides en esta especie de hongo.
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| Media ± desviación estándar de tres determinaciones. Los resultados se basaron en los valores medidos a los 20 minutos. Se utilizó Trolox como control positivo. * DPPH: 2,2-difenil-1-picrilhidracilo. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3.4. Peso corporal y Análisis séricos
El peso corporal de los animales diabéticos se redujo significativamente, y los animales tratados con A. Blazei perdieron peso aún más (Tabla 2). El extracto de A. Blazei aparentemente redujo la glucemia en las ratas diabéticas (), pero la curva glucémica fue similar en los animales diabéticos y tratados. Sin embargo, A. Blazei redujo significativamente los niveles de colesterol total y triglicéridos (). Los grupos de DM y DM + A. Blazei tuvieron diferentes tamaños de muestra debido a la mayor mortalidad de los animales del grupo de DM durante el experimento.
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3.5. El análisis bioquímico y el Estrés Oxidativo
A. Blazei redujeron significativamente () los niveles de lipoperoxidación determinados por TBA-RS (Tabla 3). Sin embargo, la actividad de las enzimas antioxidantes SOD y CAT no mostró diferencias entre los grupos. La actividad enzimática GPx aumentó significativamente en el grupo diabético y se redujo en el grupo tratado con A. Blazei ().
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| Data appear as mean ± SD. CO: Control, DM: Diabetes Mellitus and DM + A. Blazei: Diabetes Mellitus+ Agaricus blazei. CO versus DM. DM versus DM + A. Blazei. |
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3.6. Análisis histológico
La diabetes Mellitus inducida por STZ causó lesión vascular grave en el tejido pulmonar (Figura 2 (c)), donde también se evidenciaron cambios alveolares como ruptura de septos. La tinción de picrosirio reveló una expansión del tejido conjuntivo en el espacio alveolocapilar del grupo diabético (Figura 2 (d)) y una aparente reversión de este patrón en el grupo tratado con Ab (Figura 2(f)).
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3.7. El análisis inmunohistoquímico de iNOS
La Figura 3 muestra la distribución de iNOS en el tejido pulmonar detectada mediante inmunohistoquímica. La tinción positiva en marrón observada en el epitelio bronquial pulmonar y endotelio capilar en el grupo con DM indicó positividad a iNOS. La tinción de iNOS fue menos evidente en la A. Blazei group and absent in the CO group.
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iNOS immunohistochemistry in lung tissue. Magnification 400: There was no staining in the control group (a); reduction in the treated group (b) versus DM (c).
4. Discusión
Los resultados del efecto de eliminación de radicales libres del extracto acuoso de A. blazei en el ensayo in vitro de hipoxantina/xantina oxidasa y en el ensayo de eliminación de radicales libres DPPH mostraron una actividad antioxidante significativa in vitro. En ambos ensayos, el extracto expresó una mayor actividad antioxidante, en comparación con el extracto acuoso de L. edodes, que es otra especie de hongo y que presenta solo saponinas, pero no alcaloides, flavonoides o taninos. Ha sido sugerido por Ribeiro et al. que la actividad antioxidante podría estar relacionada con la presencia de alcaloides en el hongo. En otras palabras, las concentraciones más altas de alcaloides generan una mejor actividad antioxidante .
El principal hallazgo de este estudio fue la reducción de la lipoperoxidación pulmonar en ratas con diabetes inducida por estreptozotocina después del tratamiento con Agaricus blazei. Estudios previos han demostrado un efecto reductor de la glucemia, que disminuye la resistencia a la insulina y mejora la liberación de la misma por las células pancreáticas . Sin Embargo, A. El tratamiento con Blazei mostró un efecto beneficioso con respecto a las variables relacionadas con el estrés oxidativo, a pesar de no reducir la hiperglucemia.
Kim et al. se describieron los efectos antidiabetogénicos de los glucanos extraídos de A. Blazei y sus oligosacáridos hidrolizados enzimáticamente, evaluando los efectos in vitro e in vivo en cultivos de células pancreáticas y en animales con diabetes inducida por estreptozotocina. Después del tratamiento con glucanos y oligosacaridos, los animales presentaron reducciones en los niveles de glucemia, triglicéridos y colesterol y en la actividad aterosclerótica . En nuestro estudio, el tratamiento se realizó utilizando un extracto grueso de A. Blazei, sin aislar ninguno de sus compuestos, y esta es probablemente la explicación de la falta de acción antiglucémica.
El extracto de A. Blazei demostró actividad antioxidante in vitro e in vivo, sin embargo, el tratamiento redujo significativamente el peso de los animales. Este hecho podría explicarse debido a las altas dosis de extracto de A. blazei utilizadas en este experimento, a diferencia de las dosis utilizadas en otros estudios que no demuestran la reducción de peso . Sin embargo, en un estudio para evaluar la toxicidad subcrónica a 90 días de un extracto acuoso en ratas, no hubo cambios consistentes relacionados con el tratamiento en los signos clínicos, el peso corporal y el consumo de alimentos a la dosis de 2654 mg kg-1 para ratas macho, una dosis más alta que la utilizada en nuestro estudio . Fueron necesarios más estudios para evaluar el efecto tóxico de A. Blazei en estas dosis, con el análisis de variables específicas.
La GPx aumentó significativamente en el grupo diabético y se redujo significativamente después del tratamiento con A. Blazei. Este aumento en GPx puede explicar los niveles disminuidos de glutatión reducido, ya que es el principal sustrato que regula su actividad. Gumieniczek et al. se demostró que en la DM experimental el estrés oxidativo pulmonar está presente debido a la reducción de la actividad enzimática antioxidante y al aumento de la lipoperoxidación. Estos cambios son más significativos después de semanas después de la inducción. Durante la DM hay una disminución de la actividad de Cu, Zn-SOD y un aumento de la actividad de la catalasa . En nuestro estudio, ni la actividad de SOD ni de catalasa se modificaron en ninguno de los diferentes grupos. Una posible explicación de nuestros hallazgos que difieren de los de Gumieniczek es que en nuestro estudio el análisis de enzimas antioxidantes se realizó antes.
En nuestro modelo experimental se observaron numerosas alteraciones histológicas en el sistema pulmonar. Estas alteraciones concuerdan con las reportadas en la literatura , especialmente en lo que se refiere al aumento del tejido conjuntivo y al engrosamiento de la lámina basal observado a través de la técnica de tinción de picrosirio. Después del tratamiento con A. Blazei, esas alteraciones se hicieron menos evidentes. La formación de unión intra e intermolecular con colágeno, resultante del proceso de glicosilación, conduce a alteraciones estructurales en las proteínas tisulares, como aumento de la rigidez, resistencia a la digestión proteolítica y a la matriz extracelular (incluida la fibronectina, el procolágeno α2, el colágeno tipo III, IV y VI y la laminina) . En nuestro estudio, el principal factor de reversión de este proceso después del tratamiento con A. Blazei puede explicarse por la reducción del daño resultante del estrés oxidativo demostrado por la reducción de la lipoperoxidación pulmonar.
Un estado hiperglucémico a largo plazo está relacionado con alteraciones en la expresión de iNOS en varios tejidos . En el análisis inmunohistoquímico de nuestro estudio, iNOS aumentó significativamente en el tejido pulmonar de las ratas diabéticas y disminuyó significativamente cuando los animales fueron tratados con A. Blazei. Los estudios han demostrado que la expresión de ARNm de la sintasa de óxido nítrico endotelial (ENOS) se reduce, mientras que la iNOS puede aumentar junto con la generación de monofosfato de guanosina cíclica (c-GMP) .
En un estudio publicado recientemente, se evaluó la lipoperoxidación, la actividad de la superóxido dismutasa y la distribución de las isoformas de iNOS y eNOS en el tejido pulmonar de ratas diabéticas. Se observó un aumento del estrés oxidativo concomitante con el aumento de iNOS en el tejido pulmonar de ratas diabéticas, que se revirtió en el grupo tratado con ácido α-lipoico antioxidante . Estos hallazgos concuerdan con los reportados en el presente trabajo, como el aumento observado del estrés oxidativo, las alteraciones pulmonares histológicas y el efecto de una terapia antioxidante en este modelo de DM.
El presente estudio demuestra el efecto beneficioso del extracto acuoso de A. Blazei en relación con variables de estrés oxidativo y morfopatología pulmonar en diabetes inducida por estreptozotocina. Estos hallazgos pueden contribuir significativamente a una mejor comprensión de la fisiopatología pulmonar en la DM. Nuestro estudio también es relevante y con respecto al potencial terapéutico de A. Blazei.
Reconocimiento
Este trabajo fue apoyado por subvenciones de las Agencias brasileñas «Fundo de Incentvo à Pesquisa e Eventos (FIPE) do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA)» y «Laboratório de Hepatologia e Fisiologia Experimental da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (HCPA/UFRGS)».
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