NAD + wurde erstmals 1906 von Arthur Harden und William John Young identifiziert, als die beiden die Fermentation besser verstehen wollten — bei der Hefe Zucker metabolisiert und Alkohol und CO2 erzeugt. Es dauerte fast 20 Jahre für mehr NAD + Anerkennung, als Harden 1929 den Nobelpreis für Chemie mit Hans von Euler-Chelpin für ihre Arbeit an der Fermentation teilte. Euler-Chelpin identifizierte, dass die Struktur von NAD + aus zwei Nukleotiden besteht, den Bausteinen für Nukleinsäuren, aus denen die DNA besteht. Der Befund, dass die Fermentation, ein Stoffwechselprozess, auf NAD + beruhte, ließ ahnen, was wir jetzt über NAD + wissen, das eine entscheidende Rolle bei Stoffwechselprozessen beim Menschen spielt.

Euler-Chelpin bezeichnete NAD + in seiner Nobelpreisrede von 1930 als Cozymase, wie es einst genannt wurde, und wirbt für seine Vitalität. „Der Grund für unsere so viel Arbeit an der Reinigung und Bestimmung der Konstitution dieser Substanz“, sagte er, „ist, dass Cozymase einer der am weitesten verbreiteten und biologisch wichtigsten Aktivatoren in der Pflanzen- und Tierwelt ist.Otto Heinrich Warburg — bekannt für den „Warburg-Effekt“ – brachte die Wissenschaft in den 1930er Jahren voran, wobei die Forschung weiter erklärte, dass NAD + eine Rolle bei Stoffwechselreaktionen spielt. 1931 stellten die Chemiker Conrad A. Elvehjem und C.K. Koehn fest, dass Nikotinsäure, ein Vorläufer von NAD +, der mildernde Faktor bei Pellagra war. Joseph Goldberger, Arzt des öffentlichen Gesundheitsdienstes der Vereinigten Staaten, hatte zuvor festgestellt, dass die tödliche Krankheit mit etwas verbunden war, das in der Ernährung fehlte, was er dann PPF für „Pellagra Preventive Factor“ nannte.“ Goldberger starb vor der endgültigen Entdeckung, dass es sich um Nikotinsäure handelte, aber seine Beiträge führten zu der Entdeckung, die auch die eventuelle Gesetzgebung informierte, die die Anreicherung von Mehl und Reis auf internationaler Ebene vorschrieb.Im nächsten Jahrzehnt entdeckte Arthur Kornberg, der später den Nobelpreis dafür erhielt, wie DNA und RNA gebildet werden, die NAD-Synthetase, das Enzym, das NAD + herstellt. Diese Forschung markierte den Beginn des Verständnisses der Bausteine von NAD +. Im Jahr 1958 definierten die Wissenschaftler Jack Preiss und Philip Handler den sogenannten Preiss-Handler-Weg. Der Weg zeigt, wie Nikotinsäure – die gleiche Form von Vitamin B3, die zur Heilung von Pellagra beigetragen hat – zu NAD + wird. Dies half den Wissenschaftlern, die Rolle von NAD + in der Ernährung weiter zu verstehen. Handler erhielt später die National Medal of Science von Präsident Ronald Reagan, der Handlers „herausragende Beiträge zur biomedizinischen Forschung“ zitierte…förderung des Standes der amerikanischen Wissenschaft.“Während die Wissenschaftler nun die Bedeutung von NAD + erkannt hatten, mussten sie noch seine komplizierten Auswirkungen auf zellulärer Ebene entdecken. Bevorstehende Technologien in der wissenschaftlichen Forschung in Verbindung mit der umfassenden Anerkennung der Bedeutung des Coenzyms ermutigten die Wissenschaftler schließlich, das Molekül weiter zu untersuchen.