blod-och Märganalys

Begränsningar som följer med generering av cellsuspensioner gäller inte patienter med blod eller märg involvering av kroniska lymfoproliferativa störningar. Underklassificering av dessa lesioner är starkt beroende av flödescytometri.42,44,49-51 kronisk lymfocytisk leukemi (CLL) definieras väsentligen av dess immunofenotypiska egenskaper. Andra B-cell lymfoproliferativa störningar har karakteristiska, om inte alltid helt specifika fenotyper. Mantelcelllymfom kan ofta kännas igen i sin leukemiska fas, även om den mest specifika markören, cyklin D1, är mycket svår att upptäcka genom flöde med nuvarande tekniker. Hårig cellleukemi har omvänt inte bara en egenskap utan också en mycket specifik fenotyp42,50,52; ibland kan patienter med oförklarlig pancytopeni bestämmas att ha hårig cellleukemi när endast ett litet antal blodkroppar med den klassiska fenotypen identifieras52 (Fig. 15-3).

flödescytometri kan också upptäcka prognostiska faktorer hos personer med CLL. Erkänner att CLL kan delas in i en dålig prognos typ associerad med icke-muterade immunglobulin v Region gener och en bättre prognos muterad fenotyp, flera studier har försökt att identifiera flöde surrogat. Den första markören som visade sig vara prognostisk var CD38, även om korrelationen med antingen mutationsstatus eller prognos är ofullkomlig.53,54 Zeta-kedjeassocierat proteinkinas 70 (ZAP 70) verkar vara en bättre surrogatmarkör, även om den inte är perfekt; det ger dock prognostisk information.55-57 men även om denna analys är allmänt tillgänglig, särskilt i kommersiella referenslaboratorier, kan avbrott mellan positiva och negativa vara godtyckliga, och därmed kan betydande variationer i resultat förekomma bland laboratorier.58,59 försök har gjorts för att förbättra reproducerbarheten, 60 men det är inte alltid säkert att en viss analys kommer att ge samma resultat som i den publicerade kliniska litteraturen. Andra försök har gjorts för att definiera prognostiskt signifikanta delmängder av patienter med CLL med andra kombinationer av markörer,61 men dessa kombinationer har inte antagits i rutinmässig praxis.

det primära värdet av flödescytometri vid bedömning av kroniska leukemier är dess förmåga att visa klonalitet i b-cellpopulationer baserat på begränsat uttryck av en typ av immunoglobulinljuskedja. Denna funktion är särskilt värdefull vid utvärderingen av patienter med oförklarlig lymfocytos62,63 och är också användbar för att bestämma scenen hos patienter med B-cell non-Hodgkin lymfom,64,65 eftersom närvaron av så lite som 0,5% till 1% av en klonal B-cellpopulation, eller ännu mindre, kan demonstreras i märgen eller blodet hos vissa patienter. Den höga känsligheten hos flödescytometri för detektering av klonpopulationer har emellertid visat små klonala B-cellpopulationer hos vissa patienter utan uppenbart lymfom eller leukemi.66 således bör upptäckten av en liten märgklon tolkas med försiktighet i avsaknad av andra bevis på lymfom, analogt med att hitta en monoklonal gammopati hos en patient utan bevis på myelom.

flödescytometri har också använts i stor utsträckning i studien av patienter med myelom. En begränsning av flödescytometri är att plasmaceller är underrepresenterade på margspirater studerade av flöde jämfört med förekomsten av celler på filmer eller i biopsier; som ett resultat kan denna teknik inte användas för att kvantifiera myelomceller och kan därför inte ersätta morfologi vid tillämpning av traditionella diagnostiska kriterier. Plasmaceller har emellertid en karakteristisk fenotyp, inklusive mycket ljust uttryck av CD38 och uttryck av CD138,67,68 och är därför lätta att känna igen. Med användning av membranpermeabiliseringstekniker är det lätt att demonstrera cytoplasmatisk immunoglobulin (Ig) lättkedjebegränsning.67 det är av större betydelse att neoplastiska plasmaceller vanligtvis har onormala fenotyper. Även om ingen enskild specifik fenotypisk abnormitet tillåter skillnad mellan godartad monoklonal gammopati och myelom, kan flödescytometri fortfarande vara till hjälp för att skilja myelom från monoklonal gammopati av obestämd betydelse eller för att förutsäga progression av monoklonal gammopati av obestämd betydelse eller smoldering myelom.69-71 dessutom har flödescytometrisk bedömning av onormala plasmaceller vid tidpunkten för diagnos av myelom visat sig ha prognostisk betydelse.72 dessutom är detektion av cirkulerande plasmaceller eller persistens av en onormal fenotyp efter behandling, inklusive detektion av minimal kvarvarande sjukdom, förutsägbart för resultat hos patienter med myelom.69,71,73-76

Klonalitet av T-cellpopulationer kan också demonstreras genom flödescytometri, även om metoden är mer komplex och inte är lika allmänt tillgänglig som den som används för B-celler. Denna teknik är baserad på demonstration av begränsning av v-beta-genanvändning i t-cellsleukemier.77-79 T-cell maligniteter visar också ofta onormala t-cellfenotyper, som oftast kännetecknas av förlust av ett normalt pan-T-antigen eller uttryck av ett t-cellantigen vid onormal intensitet.44,80,81 eftersom vissa små, Ovanliga och till och med klonala t-cellpopulationer kan ses i litet antal i icke-neoplastiska tillstånd, har denna teknik mer begränsad känslighet än demonstration av en klonal B-cellpopulation. Men när onormala T-celler står för mer än en mycket liten andel celler, visar multiparameterflödescytometri enkelt dem och spelar en viktig roll för att kategorisera dessa ovanliga tumörer.