GEZONDHEID van MENS EN DIER

Wilde zwijnen (Sus scrofa scrofa) testes morphometry

Deiler Sampaio CostaI, *; José Frederico Straggiotti SilvaII

ILaboratório de Saúde Dier; [email protected]
IILaboratório van Reprodução Dier, Universidade Estadual do Norte Fluminense; Avenida Alberto Lamego, 2000; 28013-600; Campos dos Goytacazes – RJ – Brazilië

ABSTRACTE

Het doel van deze gegevens te analyseren, morfologie en functie van de seminifere tubulus in volwassen wilde zwijnen. Er werden Testes gebruikt die door eenzijdige castratie van vijf dieren werden verwijderd. Het testiculaire parenchym bestond uit 82,1±2,2% van de tubulus seminiferus en 17,9±2,2% van het intertubulaire Weefsel. De buisdiameter was 249,2±33,0 µm en de lengte van de tubulus seminiferus per gram testis was 19,3±4,9 m. de spermatogoniale mitose-efficiëntiecoëfficiënt, de meiotische index en de spermatogenese-efficiëntie waren respectievelijk 10,34, 2,71 en 30,5. Elke Sertoli-cel ondersteunde ongeveer 13 kiemcellen. De bestudeerde hystometrische parameters waren zeer vergelijkbaar met die voor gedomesticeerde beren, maar de intrinsieke efficiëntie van spermatogenese en Sertoli-cellen was kleiner dan bij gedomesticeerde beren.

sleutelwoorden: Seminiferous tubule, wild zwijn, Sus scrofa scrofa

SUMMARY

Objectivou-se com esta pesquisa estudar as características morphometricas e funcionais dos tubulos seminiferos de javalis adultos. De testes van vijf dieren die unilaterale orchidectomie ondergaan werden gebruikt. Het testiculaire parenchym bestond uit 82,1 ± 2,2% seminifereuze tubuli en 17,9 ± 2,2% intertubulair Weefsel. De buisdiameter was 249,2 ± 33,0 µm en de lengte van de zaadbuisjes per gram testis was 19,3 ± 4,9 m.de efficientiecoëfficiënt van spermatogonische mitoses, de meiotische opbrengst en de totale opbrengst van spermatogenese waren, respectievelijk, 10,34, 2,71 en 30,50. Elke Sértoli-cel ondersteunde ongeveer 13 kiemcellen. De conclusie luidt dat de histometrische parameters die in dit onderzoek werden bestudeerd, sterk overeenkwamen met de waarden die voor als huisdier gehouden varkens werden gerapporteerd, maar de intrinsieke opbrengst van spermatogenese en de indices van Sertoli-cellen van wilde zwijnen waren relatief laag in vergelijking met die dieren.

inleiding

spermatogenese is een georganiseerd en complex proces dat plaatsvindt in de tubuli seminiferus bij geslachtsrijpe dieren. Dit is verdeeld in drie verschillende fasen: proliferatieve, meiotische en differentiatiefase. Hoewel de algemene organisatie van spermatogenese bij alle zoogdieren gelijk is, zijn er bijzondere kenmerken onder de soorten als volumetrische verhouding die wordt ingenomen door testiculaire parenchym componenten, aantal spermatogonia generaties, cellulaire populatie in seminifereuze tubuli, sperma dagelijkse productie, Sertoli celsnelheid en algemene spermatogenese opbrengst (França and Russell, 1998).het wild zwijn (Sus scrofa scrofa) is een niet-gedomesticeerde zwijn die oorspronkelijk verspreid werd in Eurazië en een groot deel van het Afrikaanse continent. Er was ook een overvloedige populatie van deze soort op de continentale eilanden van Europa en de Filippijnen (Nowak, 1999). Door menselijke actie werd het wild zwijn verspreid naar andere continenten vanwege de voedingseigenschappen en de merkbare smaak van het vlees. De precieze entreeplaats in Zuid-Amerika is niet bekend. Het is echter bekend dat deze soort zich goed heeft aangepast aan de natuurlijke omstandigheden van Argentinië en een grote populatie vormt. Vanaf deze oorspronkelijke habitat hebben wilde zwijnen zich verspreid tot het zuiden van Chili, Brazilië en ook Uruguay (Ciluzzo et al., 2001). Deze swines commerciële productie in Brazilië werd gestart in de jaren 1980, toen boeren in de Rio Grande do Sul staat verworven dieren uit de dierentuin en Argentinië te verkopen op de lokale markt. Met de grote acceptatie vlees door de consumenten, de productie geïntensiveerd en verspreid over het hele land (Gimenez, 2001). Zo werden in de jaren ‘ 90 de eerste boerderijen in de staat São Paulo geïnitieerd, met dieren uit de staat Rio Grande do Sul. Op dit moment zijn deze staten de grootste varkensvleesproducenten van het land, terwijl de staten Minas Gerais, Paraná, Espírito Santo, Mato Grosso en Mato Grosso do Sul een nog bescheiden bijdrage leveren aan de consumentenmarkt.

de gedomesticeerde beren hebben 2n = 38 chromosomen, onafhankelijk van hun oorsprong en ras, terwijl de Europese wilde zwijnen 2n=36 chromosomen hebben (Darre et al., 1992). Het feit dat het Europese wild zwijn tot dezelfde soort behoort als het gedomesticeerde zwijn, dat deze kruisingen van ondersoorten leiden tot hybriden met een normale vruchtbaarheid voor de soort (Ciluzzo et al., 2001; Gimenez, 2001) en dat het hybride fenotype fouten in de pure dieren identificatie toelaat, hebben een aantal verkeerd geïnformeerde of gewetenloze boeren genomen om deze kruising te oefenen als een manier om hun dieren zoötechnische indexen te verbeteren (Gimenez, 2001). Echter, wanneer dit soort koppeling wordt uitgevoerd, zelfs met de bedoeling om te profiteren van de gedomesticeerde varkens betere groeiomstandigheden, het creëert dieren met vlees met bijzondere organoleptische kenmerken (Matsuoka et al., 1991).

hoewel het commerciële potentieel van wilde zwijnen in de afgelopen tien jaar grotendeels is onderzocht, zijn er nog steeds weinig onderzoeken met betrekking tot de reproductieve biologie van wilde zwijnen. Het is echter bekend dat de eerste bevalling bij wilde zwijnen 13 maanden duurt, met een variatie van 2 tot 9 zuignappen per jaar (gemiddeld 4 varkens) en dat de bevalling ongeveer 7 maanden duurt (Gimenez, 2001). In dezelfde studie werd opgemerkt dat de gedomesticeerde beren een grotere reproductieve efficiëntie hebben dan de wilde zwijnen, wat gemakkelijk te verklaren is door de korte tijd van kunstmatige selectie, als gevolg van de recente implantatie van deze dierenkwekerijen. In Argentinië, is het bekend dat de wilde zwijnen voortplantingsseizoen begint in April-mei en eindigt in oktober (Ciluzzo et al., 2001). In Braziliaanse boerderijen werd geen seizoensgebonden effect waargenomen op de voortplanting van deze soort.

dit onderzoek had tot doel de morfometrische en functionele kenmerken van de seminifereuze buisjes van wilde zwijnen te bestuderen, aangezien de informatie over de voortplantingsfysiologie van de mannetjes bij deze soort nog schaars was.

materiaal en methoden

vijf volwassen Europese wilde zwijnen (12,6±0,9 maanden oud), afkomstig van een gespecialiseerde boerderij “Yacan do Alto Agronegócios Ltda” (opsluitingssysteem) werden bij deze werkzaamheden gebruikt. De dieren werden gewogen, verdoofd met 1.0ml / 20kg azaperone en na het perineum en scrotum huid antisepsis, onderworpen aan verdoving infiltratie in de chirurgische incisie lijn voor de unilaterale castratie prestatie als een routine techniek. Kort na de operatie, werd de testis gescheiden van zijn respectievelijke epididymis, gewogen en de testiculaire slagader werd gekanuleerd voor perfusie met zoutoplossing 0,9%, met 5.000 UI heparine per liter oplossing gedurende vijf minuten bij kamertemperatuur. Onmiddellijk na deze testes werden opnieuw geperforeerd met een glutaaraldehyde 4% fixeeroplossing in fosfaatbuffer 0,05 M, pH 7,2 gedurende 20 minuten. De testiculaire parenchym monsters, 1,0 tot 3,0 mm dik, werden genomen van het orgaan capitata extremiteit, het medium derde en de caudate extremiteit. De collectie werd altijd gemaakt in de buurt van de tunica albuginea. Dergelijke fragmenten werden opnieuw gefixeerd door onderdompeling in een nieuwe glutaaraldehyde-oplossing van 4% in fosfaatbuffer gedurende ten minste één uur en werden later bij 4ºC bewaard tot hun histologische verwerking.

de monsters werden om de 30 minuten gedehydrateerd in alcohol (70, 80, 90, 95 en 100%). Hierna werden de fragmenten gedurende twee uur geïnfiltreerd met glycolmethacrylaat oplossing I (Leica Historesin inbedding Kit – Leica Instruments) en vervolgens overgebracht naar de glycol methacrylaat oplossing II, waar ze voor 12 stonden. Vervolgens werden de testiculaire fragmenten opgenomen in dezelfde hars met een katalysator-toevoeging, zoals aanbevolen door de fabrikant. De fragmenten werden bewaard in een fles met silicagel totdat ze volledig droog waren. Vier micrometer dikte sneden werden uitgevoerd met behulp van glas scheermes in microtoom. De secties waren gekleurd met toluïdine blauw-natriumboraat 1%, als routine techniek.de histologische secties werden gefotografeerd met een Nikon E-600 microscoop uitgerust met een digitale camera en geanalyseerd met de ImageJ 1.33 s software (Wayne Rasband – National Institute of Health, USA). De gemiddelde diameter van de tubuli van het seminiferum werd verkregen uit de diameter van 20 dwarse secties in elke testismeting, onafhankelijk van de cyclus fase. In hetzelfde gedeelte waarin de buisdiameter werd verkregen, werd ook de hoogte van het seminifereus epitheel gemeten, rekening houdend met het basale membraan tot aan de lumenrand. Uit elke dwarsdoorsnede werden twee noten verkregen, waarbij als representatieve meting Het gemiddelde van beide werd beschouwd. De volumetrische snelheid van de testiculaire parenchym componenten werd geschat met behulp van een 400 punten raster. In elk dier werden 15 velden willekeurig onderzocht. De tubuli seminiferus en het intertubulair weefsel werden berekend.

De celpopulatie van de seminifereuze tubuli werd geschat door het tellen van de nucleolus van het spermatogene geslacht van verschillende celtypes, als de nucleolus van de Sertoli-cellen in de fase 1 van de seminifereuze epitheel cyclus, gekarakteriseerd volgens het tubulaire morfologiesysteem (Berndtson en Desjardins, 1974). Elk celtype (Sertoli-cellen, spermatogonia, spermatocyten en spermatiden) werd in Fase 1 van de cyclus in ten minste 10 buisjes in transversale secties geteld. De telling werd gecorrigeerd voor de gemiddelde kerndiameter en de dikte van de snede met behulp van de formule Abercrombie (1946), gewijzigd door Amann (1962). Omdat de Sertoli-cel een onregelmatige kern vertoonde, werd deze correctie toegepast op basis van de gemiddelde nucleolaire diameter.

de intrinsieke opbrengst van de spermatogenese werd bepaald op basis van de verhoudingen tussen de gecorrigeerde celaantallen. De volgende percentages werden berekend: spermatogonial mitoses efficiency coëfficiënt (verhouding tussen het aantal primaire spermatocytes in de pre-leptotene/leptotene en het aantal van spermatogonia A); meiotische index (verhouding tussen het aantal afgeronde spermatids en het aantal pachyteen primaire spermatocytes); de algemene spermatogenese efficiëntie (verhouding tussen het afgeronde spermatids en het aantal van het type A-spermatogonia); en de cellulaire verliezen optreden tijdens de meiotische profase (verhouding tussen de primaire spermatocytes aantal in de pre-leptotene/leptotene en het pachyteen primaire spermatocytes nummer).

De ondersteunende capaciteit van de Sertoli-cellen in relatie tot de verschillende cellulaire typen seminifereus epitheel werd beoordeeld op basis van de volgende cellulaire verhoudingen: spermatogonia a / Sertoli-cellen; primaire spermatocyten (I) in pre-leptoteen-leptoteen / Sertoli-cellen; spermatocyten I in pachyteen / Sertoli-cellen; afgeronde spermatiden / Sertoli-cellen; en de totale kiemcellen / Sertoli-cellen. Alle verhoudingen werden berekend met behulp van de cellulaire tellingen van de fase 1 van de cyclus.

alle gegevens werden geanalyseerd met de “Excel for Windows” – software en de verkregen resultaten werden uitgedrukt als gemiddelde ± standaarddeviatie volgens Sampaio (1998).

resultaten en discussie

het lichaamsgewicht van de dieren (Tabel 1) was ongeveer 38% lager dan de waarde gerelateerd door Almeida (2002), die ook werkte met wilde zwijnen in opsluitingssystemen. Deze verschillen waren waarschijnlijk te wijten aan de verschillen in het voederbeheer tussen de bedrijven en de leeftijd in beide gevallen. Wilde zwijnen waren aanzienlijk lichter in vergelijking met varkens van gespecialiseerde rassen in vergelijkbare leeftijden. Echter, wanneer er niet-gespecialiseerde rassen werden gebruikt, als de Afrikaanse Varkens, met een gewicht van ongeveer 34kg (Okwun et al., 1996), en de Vietnam varkens met een 42kg gemiddelde (Evans en Ko, 1990), het merkte dat de verschillen waren niet zo divergent. Het testisgewicht bij de dieren van het huidige werk (tabel 1) was ongeveer drie keer kleiner dan dat van Almeida (2002). Een deel van dit verschil leek te worden verklaard door het verschil in lichaamsgewicht tussen de diergroepen. Aan de andere kant is het gebruikelijk dat verschillen tot 50% worden waargenomen voor het testiculaire gewicht bij individuen van dezelfde soort in vergelijkbare leeftijd (Berndtson et al., 1987).

het testispercentiel ingenomen door tunica albuginea en mediastinum was ongeveer 9,5% (Tabel 1). Door dit percentiel af te trekken van het testiculaire gewicht, werd ongeveer 18,5 g verkregen, wat overeenkomt met het testiculaire parenchym gewicht. Het testisgewicht werd direct omgezet in volume, aangezien de dichtheid van dit orgel ongeveer 1,04 was (Costa et al., 2004). De gemiddelde waarde van de testiculaire parenchym bij de dieren werd dus beschouwd als 18,4 ± 3,7 ml (Tabel 1).de volumedichtheid van de testiculaire parenchym-componenten varieerde sterk tussen de soorten, maar over het algemeen was het percentiel dat door tubuli seminiferus werd ingenomen ongeveer 60 tot 90% (Setchell, 1982) voor de meeste zoogdieren. De waarden in deze gegevens 82,1±2,2% (Tabel 1) waren zeer vergelijkbaar met de waarden die door Almeida (2002) werden gerapporteerd en ze waren vergelijkbaar met die voor als huisdier gehouden beren (Okwun et al., 1996, França and Russell, 1998).

De gemiddelde waarden voor de buisdiameter en de hoogte van het epitheel van het seminiferum zijn weergegeven in Tabel 1. De lineaire retractiefactor van de tubuli seminiferus als gevolg van histologische verwerking met kunsthars werd geschat op 5% (Amann, 1981). De buisdiameter werd als typisch beschouwd voor de meeste vruchtwaterpunctie (180 tot 300µm) (Roosen-Runge, 1977). De resultaten van dit experiment werden in dit gemiddelde (249,2±33,0 µm) opgenomen en kwamen zeer dicht in de buurt van die van geslachtsrijpe beren (Godinho en Cardoso, 1979, França, 1991). Meestal wordt de buisdiameter gebruikt als spermatogene activiteitsindicator bij het bestuderen van de testiculaire functie. De gemiddelde buisdiameter van de niet-seizoensgebonden dieren vertoont geen significante veranderingen na Geslachtsrijpheid (França en Russell, 1998). De toename van de testisgrootte na deze periode is te wijten aan de lengte van de tubulus en niet aan de diameter (Attal en Courot, 1963).

de hoogte van het seminifereus epitheel die in dit experiment voor wilde zwijnen werd gevonden (67.5µm) werd ingevoegd in het interval gerelateerd voor huisdieren, 60 tot 100µm (França en Russell, 1998) en was zeer vergelijkbaar met de gerapporteerde voor beren (Okwun et al., 1996). Dit verschilde niet tussen de seminiferous epitheel cyclus in verschillende stadia, ondanks de verschillende cellulaire associaties in elk (Wrobel et al., 1995).

de totale lengte van de tubuli seminiferus is een parameter die afhankelijk is van het gewicht van de testis en het volume van de tubuli seminiferus. Zo hebben dieren met groter testiculaire gewicht en volumetrische snelheid van de soortgelijke seminiferous tubuli een duidelijk voordeel op die met kleinere testiculaire gewicht. Vandaar dat de vergelijkingen tussen dieren met verschillende testiculaire gewicht heeft geen zin. Daarom worden deze vergelijkingen mogelijk bij het omzetten van de totale lengte van de zaadbuisjes in de zaadbuisjes per gram testis. In het algemeen, de meeste zoogdieren presenteren ongeveer 10 tot 20m van seminiferous tubuli per gram testis (França and Russell, 1998). Zo behoort wild zwijn, met bijna 20 meter, tot de soorten met de grootste waarden voor die parameter.

de cellulaire populatie wilde zwijnen seminiferous tubuli is weergegeven in Tabel 2. De cellulaire hoeveelheden werden gecorrigeerd omdat er een grote variabiliteit van de resultaten was wanneer bruto aantallen werden gebruikt voor vergelijkingen tussen verschillende soorten en zelfs onder individuen van een zelfde soort (Cardoso, 1981). Deze variatie was voornamelijk te wijten aan verschillen in de gebruikte methodologie, waardoor ondoenlijke vergelijkingen tussen de verschillende auteurs konden worden gemaakt. De verkregen resultaten mogen echter, zelfs gecorrigeerd ,slechts als indicatief worden beschouwd (França, 1991), omdat andere factoren, zoals verschillende monsternemingen, leeftijd, ras en genetische selectie, ook het eindresultaat van de telling zouden kunnen beïnvloeden. Hoewel het aantal spermatogonia vergelijkbaar was met het aantal dat werd gerapporteerd voor Piaus beren (França, 1991), waren de andere kiemcellen en Sertoli cellen populatie steevast kleiner dan de waarden die werden gevonden in de meeste van de binnenlandse beren ras (Godinho en Cardoso, 1979, Wettermann en Desjardins, 1979, França, 1991).

de meest gebruikte vorm voor het schatten van de spermatogene procesefficiëntie bij zoogdieren is van numerieke proporties onder de cellulaire typen voor dwarsdoorsnede in Fase 1 van de cyclus. Zo is het mogelijk om vergelijkende studies te maken onder individuen van een zelfde soort en onder verschillende soorten, naast het toestaan van het lokaliseren van de fasen waarin cellulaire verliezen gebeuren en om ze te kwantificeren in percentiele termen (Russell et al., 1990).

met dit doel worden vier percentages algemeen gebruikt: de spermatogonial mitoses efficiëntie coëfficiënt, de meiotische index, de spermatogenese efficiëntie en de cellulaire verliezen optreden tijdens de meiotische profase. De bij de dieren verkregen resultaten van dit onderzoek zijn weergegeven in Tabel 3.

De spermatogoniale mitose-efficiëntiecoëfficiënt gaf aan dat in Fase 1 elke spermatogonia A1 verantwoordelijk was voor de vorming van 10,34 spermatocyten I in pre-leptoteen/leptoteen en rechtstreeks geassocieerd was met het aantal onderzochte spermatogonia-generaties. Bij analyse van de gegevens die door França en Russell (1998) werden beoordeeld, werd opgemerkt dat de meeste onderzochte dieren zes verschillende generaties spermatogonia hadden (A1-4, In en B of A1-3, in, B1-2), in dit geval zou theoretisch één spermatogonia A1 64 spermatocyten I vormen in pre-leptoteen/leptoteen, als er geen cellulaire verliezen waren tijdens die fase. Soorten zoals paarden en konijnen hebben vijf spermatogonia onderscheiden generaties (A1-3, B1-2 en A1-2, in1-2, B, respectievelijk). Daarom zouden 32 spermatocyten I in pre-leptoteen / leptoteen worden gevormd uit één spermatogonia A1.aangezien het aantal spermatocyten dat theoretisch verwacht werd in pre-leptoteen / leptoteen bij wilde zwijnen 64 cellen bedroeg, werd een verlies van ongeveer 84% tijdens de spermatogoniale divisies van die soort overwogen. Ongeveer 60 tot 80% van de cellulaire verliezen, in relatie tot het aantal spermatocyten I theoretisch verwacht in pre-leptoteen/leptoteen, zijn gevonden bij dieren van de meeste artikelen beoordeeld door França en Russell (1998).

uitgaande van de meiotische index kon worden geverifieerd dat één spermatocyt I in pachyteen 2 had gegenereerd.71 afgeronde spermatiden, gelijk aan een verlies van 32,5% wanneer het werd vergeleken met de verwachte theoretische verhouding (1:4) als de spermatogenese efficiëntie 100% was. Een vergelijkbaar resultaat werd gevonden bij volwassen beren (França, 1991), evenals bij verschillende soorten huisdieren (França en Russell, 1998). De spermatocyten I populatie tijdens de meiotische profase in de dieren in dit experiment bleef constant als gerelateerd voor de grote meerderheid van de zoogdieren (Berndtson en Desjardins, 1974, Godinho en Cardoso, 1979, Billaspuri en Guraya, 1986).

de spermatogenese-efficiëntie van wilde zwijnen was ruwweg 12%, d.w.z. één spermatogonia a produceerde slechts 30,5 afgeronde spermatiden. Gezien het feit dat dit proces opbrengst was 100%, 256 afgeronde spermatiden zou worden geproduceerd. Volgens França (1991) vertoonden de binnenlandse beren een grotere intrinsieke efficiëntie van spermatogenese (26,6%, dan de wilde zwijnen, 12%). Verschillende auteurs hebben degeneraties en cellulaire verliezen gerapporteerd tijdens de spermatogoniale proliferatiefase en de spermatogene proces meiotische divisies in dieren zonder enige reproductieve verandering (Berndtson en Desjardins, 1974, Billaspuri en Guraya, 1984, Roosen-Runge, 1973). Apoptose speelt een fundamentele rol tijdens de normale ontwikkeling en in multi-cellulaire organismen homeostase (Jacobson et al., 1997). In het seminifereuze epitheel gebeurt apoptose meestal spontaan of als reactie op verschillende factoren zoals chemotherapie, hoge temperatuur, hormonale stoornissen en groeifactoren verminderen (Blanco-Rodríguez en Martínez-Garcia, 1998).

het evenwicht tussen proliferatie en apoptose speelt een zeer belangrijke rol bij de regulering van het aantal spermatogene cellen in het seminifereus epitheel. Vooral in de spermatogoniale fase wordt het homeostatische mechanisme van de apoptose-Regulatie als dichtheidsafhankelijk beschouwd, waardoor de hoeveelheid kiemcellen die in de meiotische fase binnenkomen wordt beperkt tot een aantal dat kan worden ondersteund door de beschikbare Sertoli-cellen (Huckins, 1978, Sharpe, 1994). De Sertoli cellen indexen zijn indicatieve parameters van de capaciteit die deze cellen hebben om kiemcellen in het seminifereus epitheel te ondersteunen, d.w.z., zij weerspiegelen de functionele efficiëntie van Sertoli cellen in een soort (França and Russell, 1998). Daarom, species waarin Sertoli cellen een grotere hoeveelheid kiemcellen ondersteunen neigen om een grotere dagelijkse spermatic productie te hebben, in vergelijking met die die kleinere waarden voor die parameter hebben.

in dit werk werden 7.27 afgeronde spermatiden voor elke Sertoli-cel gevonden (Tabel 3). Deze waarde was ongeveer 40% lager dan die voor piausboeren (12,4 – França, 1991). Dit verschil werd gehandhaafd voor de andere indexen, behalve in het geval van de spermatogonia een getal dat werd ondersteund door Sertoli cellen, die vergelijkbaar was met de waarde gevonden door França (1991). Het resultaat leek een reflex te zijn van het selectieproces waaraan de binnenlandse beren werden onderworpen, die waarschijnlijk culmineerde in efficiëntere Sertoli-cellen.

Er werd geconcludeerd dat de histometrische parameters die in dit onderzoek werden bestudeerd, zeer vergelijkbaar waren met de waarden die werden gerapporteerd voor gedomesticeerde beren, maar de intrinsieke efficiëntie van spermatogenese en de Sertoli-cellen van wilde zwijnen waren relatief laag in vergelijking met die dieren en de andere zoogdieren die reeds werden onderzocht.

Abercrombie, M. (1946), Estimation of nuclear populations from microtome sections. Anat. Rec., 94, 238-248.

Almeida, F. F. L. (2002), Estrutura e função testiculares em javalis (sus scrofa scrofa) sexualmente maduros. MS Thesis, Universidade Federal De Minas Gerais, Belo Horizonte, Brazilië.

Amann, R. P. (1962), Reproductive capacity of dairy bulls. IV. spermatogenese en testiculaire kiemcel degeneratie. Is. J. Anat., 110, 69-78.

Amann, R. P. (1981), a critical review of methods for evaluation of spermatogenesis from seminal characteristics. J. Androl., 2, 37-58.

Attal, J. en Courot, M. (1963), testiculaire ontwikkeling en oprichting van spermatogenese in Stier. Ann Biol. Anim. Bioch. Biophys., 3, 219-241. Berndtson, W. E. and Desjardins, C. (1974), The cycle of the seminiferous epithelium and spermatogenesis in the bovine testis. Is. J. Anat., 140, 167-180. Berndtson, W. E.; Igboeli, G. and Pickett, B. W. (1987), Relationship of absolute number of Sertoli cells to testiculaire size and spermatogenesis in young beef bulls. J. Anim. Sci., 64, 241-246.

Bilaspuri, G. S. en Guraya, S. S. (1986), the seminiferous epithelial cycle and spermatogenesis in rams (Ovis aries). Theriogenol., 25, 485-505.

Bilaspuri, G. S. and Guraya, S. S. (1984), the seminiferous epithelial cycle and spermatogenesis in goats (Capra hircus). J. Agric. Sci., 103, 359-368. Blanco-Rodriguez, J. en Martínez-Garcia, C. (1998). Apoptose patroon veroorzaakt door verschillende apoptogene middelen op het seminifereuze epithelum van de volwassen testis bij ratten. J. Androl., 19, 487-497.

Cardoso, F. M. (1981), morphology, kinetics and quantification of spermatogenesis in Zebus (Bos indicus). DS Thesis, Universidade Federal De Minas Gerais, Belo Horizonte, Brazilië.

Ciluzzo, J. N.; Vieites, C. M.; Basso, C. P. et al. (2001), Jabalies cruza en Argentina: crescimiento, la alimentícia y reses. In. Dierenarts., 3, 49-53.

Costa, D. S.; Henry, M. and Paula, T. A. R. (2004), Espermatogênese de Catetos (Tayassu tajaku). Arq. Arm. Med. Dierenarts. Zootec., 56, 46-51. Darre, R.; Berlandh, M.; Goustat, A. (1992), Chromosomal status of wild bear populations cultured and farmed in France. Rev.Med. Dierenarts., 143, 225-232.

Evans, L. E. en Ko, J. C. H. (1990), Electro-ejaculatie en kunstmatige inseminatie in vietnamese potbuik miniatuur varkens. J. Am. Dierenarts. Med. Assoc., 197, 1366-1367.

França, L. R. (1991), morphofunctional analysis of spermatogenesis of adult pigs of the piau ras. PhD Thesis, Universidade Federal De Minas Gerais, Belo Horizonte, Brazilië.

France, L. R. and Russell, L. D. (1998), the testis of domestic animals. In: Regadera, J. and Martinez-Garcia, F. (Eds.). Mannelijke voortplanting. Een multidisciplinair overzicht. Madrid: Churchill Livingstone. pp. 197-219.

Gimenez, D. L. (2001), chromosomal analysis of the European Beer Sua scrofa and hybridizations with the domestic pig Sus scrofa domesticus comparing the qualitative characteristics of the carcass and meat. MS Thesis, Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho, Botucatu, Brazilië. Godinho, H. P. and Cardoso, F. M. (1979), sexual development of Yorkshire pigs. II. oprichting en evolutie van spermatogenese. Arq. Esc. Dierenarts. UFMG, 31, 351-361

Huckins, C. (1978), the morphology and kinetics of spermatogonial degeneration in normal adult rats: een analyse met behulp van een vereenvoudigde classificatie van het germinale epitheel. Anat. Rec., 190, 905-26.

Jacobson, M. D.; Weil, M. and Raff, M. C. (1997), Programmed cell death in animal development. Cel., 88, 347-354. Matsuoka, A.; Yamano, J.; Furokawa, N. et al. (1991), Studies on meat quality of varkens crossed with everzwijnen. Jap. J. S. Sci., 28, 203-212. Nowak, R. M. (1999), Walker ‘ s mammals of the world. 6. ed. London: Johns Hopkins University Press. v. 2. PP. 1053-1062.

Okwun, O. E.; Igboeli, G.; Ford, J. J. et al. (1996), aantal en functie van sertoli-cellen, aantal en opbrengst van spermatogonia, en dagelijkse spermaproductie in drie berenrassen. J. Reprod. Fertil., 107, 137-149.

Roosen-Runge, E. C. (1973), Germinal-cell loss in normal metazoan spermatogenesis. J. Reprod. Fertil., 35, 339-348.

Roosen-Runge, E. C. (1977), The process of spermatogenesis in animals. Cambridge: University Press. Russell, L. D.; Ettlin, R. A.; Sinha-Hikim, A. P. et al. (1990) Histological and histopathological evaluation of the testis. Clearwater, Florida: Cache River Press.

Sampaio, I. B. M. (1998), Estatística aplicada à experimentação animal. Belo Horizonte: FEPMVZ, UFMG.

Setchell, B. P. (1982), Spermatogenesis and spermatozoa. In: Austin, C. R. and Short, R. V. (Eds.). Voortplanting bij zoogdieren. London: Elek. pp. 63-101.

Sharpe, R. M. (1994), Regulation of spermatogenesis. In: Knobil, E. and Neil, J. D. (Eds.). De phisiologie van de voortplanting. 2nd ed. New York: Raven Press. PP. 1363-1434.

Wettermann, R. P. and Desjardins, C. (1979), testiculaire functie in beren blootgesteld aan verhoogde omgevingstemperatuur. Biol. Reprod., 20, 235-241.

Wrobel, K. H.; Reichold, J. and Schimmel, M. (1995), Quantitative morphology of the ovine seminiferous epithelium. Anat. Anz., 177, 19-32.