Effect van Agaricus blazei Murill op het longweefsel van dieren met Streptozotocine-geïnduceerde Diabetes
Abstract
deze studie werd opgezet om zowel de oxidatieve stress als het therapeutische effect van Agaricus blazei Muril (A. Blazei) bij ratten met streptozotocine-geïnduceerde diabetes te evalueren. We gebruikten 25 Wistar ratten, en DM werd veroorzaakt door het injecteren van streptozotocin (70 mg/Kg i.p.). Agaricus blazei Muril werd dagelijks toegediend vanaf 40 dagen na het begin van de ziekte. A. Blazei werd getest als een waterig extract op zijn fytochemische samenstelling, en de antioxiderende activiteit in vitro werd ook geëvalueerd. Lipoperoxidatie (LPO), en superoxide dismutase (SOD), catalase, en glutathion peroxidase activiteiten werden gemeten in het longweefsel, evenals de aanwezigheid van induceerbare stikstofmonoxide synthase (iNOS), door middel van immunohistochemie. Er werd ook een anatomopathologisch onderzoek uitgevoerd. Fytochemische screening van A. Blazei detecteerde de aanwezigheid van alkaloïden en saponinen. Het extract vertoonde een significante antioxidantactiviteit in de dpph-aaseters en de hipoxanthine/xanthine-oxidase-assays. Pulmonale LPO nam toe bij diabetische dieren (; ) in vergelijking met de controlegroep (), gevolgd door een afname in de met A. Blazei behandelde groep (; ). iNOS werd bij diabetische ratten verhoogd in de longen en verlaagd in de A. Blazei-groep. Het longweefsel bij diabetische ratten vertoonde oxidatieve veranderingen gerelateerd aan de streptozotocine behandeling. De A. Blazei behandeling verminderde effectief de oxidatieve stress en droeg bij aan weefselherstel.
1.
Diabetes mellitus (DM) is een endocriene metabole ziekte met een toenemende incidentie en klinische relevantie met een hoge morbiditeit en mortaliteit . Onder zijn chronische complicaties zijn de micro-en macro vasculaire aandoeningen met betrekking tot de nier, cardiovasculaire, en zenuwstelsel . In de laatste twee decennia zijn echter ook veranderingen in de ademhalingsfunctie gemeld in klinische en experimentele studies. Dalingen van de longfunctie in de loop der jaren, gerelateerd aan de verlaagde maten van pulmonale volumes en capaciteit, werden aangetoond bij diabetespatiënten met een verminderde metabole controle . Structurele veranderingen aan het basale membraan van het pulmonale capillaire endotheel zijn ook aanwezig in DM, met een verdikking van het alveolus-capillaire membraan en vermindering van het diffusievermogen . Bovendien zijn diabetespatiënten gevoeliger voor longinfecties, in het bijzonder tuberculose, die vier keer zo vaak voorkomt in deze specifieke populatie . Hoewel al deze veranderingen werden aangetoond in klinische en experimentele studies, werden in weinig studies de belangrijkste fysiopathologische mechanismen onderzocht waarbij pulmonale complicaties in verband met DM betrokken waren.
Er zijn 4 routes geassocieerd met chronische complicaties van DM, namelijk de polyol route, proteïne kinase C (PKC) activering, verhoogde flow in de hexosamine route, en de route van geavanceerde glycosilatie eindproducten (leeftijd). Hoewel de presentatie in elk geval verschillend is, is oxidatieve stress (OS) betrokken bij de vier bovengenoemde routes .
Er zijn voldoende aanwijzingen dat de toename van stikstofmonoxide (NO), gevormd door de werking van induceerbare stikstofmonidesynthase (Inos), een van de factoren is die verantwoordelijk is voor zowel de pathogenese als de complicaties als gevolg van DM . Het gebruik van exogene antioxidanten kan een groot therapeutisch potentieel vertegenwoordigen voor de behandeling van DM
de basidiomycete Agaricus blazei Murill (A. Blazei), in de volksmond bekend als “zonnezwam”, is inheems in Brazilië en op grote schaal geteeld in Japan vanwege zijn geneeskrachtige eigenschappen. Deze paddenstoel wordt traditioneel gebruikt in de behandeling van atherosclerose, hepatitis, hyperlipidemia, dermatitis, en kanker, en het is getoond om immunomodulerende en antimutagenic gevolgen zowel in vivo als in vitro te hebben. Polysacchariden α-glycaan en β-glycaan zijn verantwoordelijk voor de functie van immunologische en antitumorale stimulatie .
A. Blazei bleek al nuttig te zijn bij insulineresistentie gerelateerd aan type 2 diabetes, maar geen studie heeft het antioxiderende potentieel van A. Blazei in vivo bij DM aangetoond . Daarom werd deze studie ontworpen om zowel de oxidatieve stress als het therapeutische effect van A. Blazei in het longweefsel van dieren met STREPTOZOTOCINE-geïnduceerde DM te evalueren.
2. Methoden
2.1. Paddenstoelen
Luchtgedroogde paddenstoelen van de soort Agaricus blazei Murill (C-type) waren een geschenk van Dr.Luiz Antônio Graciollo, afdeling Engeneering aan de Staatsuniversiteit van São Paulo (UNESP), Brazilië.
2.2. Bereiding van A. blazei waterig Extract
Luchtgedroogde delen (100 g) werden gemalen en het geëxtraheerde water werd bereid door middel van infusie (1/10 paddenstoel/oplosmiddel). De infusie bleef 30 minuten op kamertemperatuur. Na afkoeling en filtratie werd het extract gedurende vijf dagen ‘ s nachts ingevroren en geconcentreerd door lyofilisatie om het A. blazei-waterige extract te verkrijgen.
2.3. Chemische stoffen en reagentia
2,2-Difenil-1-picrylhidrazyl( DPPH), hypoxanthine, xanthine-oxidase, trolox en salicylzuur werden gekocht bij Sigma (St.Louis, USA).
2.4. Fytochemische Screening
de fytochemische analyse (flavonoïden, tannines, antrachinonen, alkaloïden, saponinen, cumarinen en hartglycosiden) van A. blazei werd uitgevoerd volgens de methoden beschreven door Harborne . De dunnelaagchromatografie analyses werden uitgevoerd volgens systemen en ontwikkelaars aangegeven door Wagner en Bladt .
2.5. Hypoxanthine / Xanthine-Oxidase-bepaling
de methode die werd gebruikt om het hydroxylradicaalvangvermogen van de extracten te bepalen, was gebaseerd op de methode van Owen et al. . In het kort werd het extract opgelost in de assay buffer (hypoxanthine, Fe(III), EDTA en salicylzuur) in een concentratie van 2,0 mg/mL en op passende wijze verdund (in triplicaat) in assay buffer tot een eindvolume van 1.0 mL geeft een bereik van 0,1-2,0 mg/mL. Een 5 l aliquot van xanthine oxidase opgelost in 3.2 M (NH4) 2SO4 werd toegevoegd om de reactie in gang te zetten. De monsterbuisjes werden gedurende 3 uur bij 37°C geïncubeerd, waarna de reactie volledig was. Een 30 l aliquot van het reactiemengsel werd geanalyseerd door HPLC met behulp van chromatografische omstandigheden zoals beschreven door Owen et al. . Chromatografische analyse werd uitgevoerd met behulp van een gradiënt op basis van methanol/water/azijnzuur met een µBondaPak C18 omgekeerde fase kolom en detectie bij 325 nm. De HPLC-apparatuur had een 2695 scheidingsmodule en UV-detector 2487. De hydroxylering van salicylzuur en hypoxanthine werd gecontroleerd bij respectievelijk a = 325 en a = 278 nm. De hoeveelheid dihydroxyfenolen (2,5-dihydroxibenzoëzuur en 2,3-dihydroxibenzoëzuur) (2,5-DHBA en 2,3-DHBA) geproduceerd door hydroxylradicaal (OH•) aanval op salicylzuur werd bepaald aan de hand van standaardkrommen bereid met de respectieve zuivere dihydroxyfenolen.
2.6. Dpph-Scavenging Assay
Scavenging van dpph-vrije radicalen werd gemeten met behulp van een aangepaste methode beschreven door Yamaguchi et al. waarin de verschillende methanolische plantenextracten werden toegevoegd aan Tris-HCl (100 mM) buffer, pH 7.0, met 250 mM dpph opgelost in methanol. Ten minste zes verschillende verdunningen van elk extract werden getest en mochten 20 minuten in het donker staan, voordat de absorptie werd gemeten bij 517 nm met behulp van een Shimadzu spectrofotometer model UV-1602PC (Kyoto, Japan). Het experiment werd in drievoud uitgevoerd. Antioxidantactiviteit (AOA) werd uitgedrukt als IC50 (remmende concentratie in g/mL van monsters of positieve controles die nodig zijn om de absorptie van DPPH met 50% te verminderen in vergelijking met de negatieve controle). Hoe lager de IC50, hoe hoger de AOA .
2.7. Dier-en proefprotocol
het gebruikte proefprotocol voldeed aan de normen die zijn vastgesteld door de ethische en Gezondheidsonderzoekscommissie van de groep onderzoek en postdoctorale Studies van het Hospital de Clínicas van Porto Alegre en aan de beginselen voor onderzoek met dieren (NAS). Alleen mannelijke wistarratten werden gebruikt, verkregen uit de broedkolonie van het Instituto de Ciências Básicas da Saúde da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS). Het gemiddelde gewicht van de dieren aan het begin van de studie was 200-300 gram. Ze werden gehouden onder een 12: 12 uur licht / donker cyclus (licht van 7 uur ’s ochtends tot 19 uur’ s avonds) in een temperatuur gecontroleerde omgeving (22 ± 4°C).
DM werd geïnduceerd door een enkele injectie streptozotocine i.p. (STZ, Sigma Chemical Company, St .Louis, MO, ere) in een dosis van 70 mg / Kg lichaamsgewicht. STZ werd opgelost in natriumcitraatbuffer (0,1 M, pH 4.5) en toegediend in de linkerbuikstreek van het dier ongeveer 10 minuten na oplossen in de bufferoplossing. De dieren in de controlegroep ontvingen slechts NaCl 0,9% i.p. bij hetzelfde volume van de buffer die werd gebruikt om STZ op te lossen. Het A. blazei-extract werd verdund tot een concentratie van 0,1 g/mL (10%) in een oplossing van gedestilleerd water en gedurende 2 uur bij kamertemperatuur bewaard . De toedieningsroute was een maagsonde met een uiteindelijke oplossing van 2 mL en de behandeling werd gestart vanaf de 40e dag van diabetes-inductie. De dieren werden gerandomiseerd in de verschillende groepen: controle (CO), diabetes behandeld met NaCl (DM), en diabetes behandeld met A. blazei (DM + A. blazei). Bloedmonsters werden genomen van de retro-orbitale plexus een dag voor de inductie, en 2 en 30 dagen na het begin van het experiment. Aan het einde van de 60 dagen van proef werden de dieren tot euthanasie door leegbloeden, na verdoofd met xilasine en ketamine. Bloed van de retro-orbitale plexus werd bemonsterd en de rechterlong werd ontleed en bewaard in 4% formaldehyde voor histologische analyse. De linkerlong werd verwijderd en ingevroren bij -80°C voor aanvullende analyses.
2.8. Serumanalyses
de bloedmonsters werden in een testbuis met heparine (Liquemine) geplaatst om stolling te voorkomen. Het materiaal werd vervolgens gedurende 15 minuten gecentrifugeerd op 1.800 g. Het neerslag werd weggegooid en het plasma werd verwijderd.
om de glucose -, cholesterol-en triglyceridenspiegels te bepalen gebruikten we de colorimetrische enzymatische test (Kit Labtest, Bio Diagnóstica) en de absorptie werd gemeten in spectrofotometer (CARY 3E-UV-Visible spectrofotometer Varian). Dieren met een glucoseconcentratie hoger dan 250 mg / dL werden beschouwd als diabetisch.
2.9. Biochemische Analyses van oxidatieve Stress en antioxidant Assay
de longen werden gehomogeniseerd met 9 mL fosfaatbuffer (KCL 140 mM, fosfaat 20 mM, pH 7,4) per gram weefsel. De eiwitconcentratie in deze longhomogenaten werd bepaald met behulp van een standaardoplossing van boviene albumine volgens Lowry et al. .
pulmonale lipoperoxidatie werd bepaald met behulp van thiobarbituurzuurreactieve stoffen (TBA-RS) .
Superoxide dismutase (SOD) activiteit in het longweefsel werd bepaald met behulp van een techniek gebaseerd op de remming van adrenochrome vorming in epinefrine autoxidatie . De activiteit van Catalase (CAT) in het longweefsel werd bepaald zoals elders beschreven en de bepaling van selenium-afhankelijke glutathionperoxidase in het longweefsel werd verkregen door middel van een techniek die bestond uit het meten van NADPH oxidatie door glutathionreductase .
2.10. Histologisch onderzoek
voor de histologische analyse werden de monsters tweemaal in paraffine ingebed. Met behulp van een microtoom, werden de paraffineblokken gesneden in 3-m serie secties. In de kleuringsfase werden de dia ‘ s ondergedompeld in hematoxyline-eosine en picrosirius. In de dehydratiefase gingen de structuren door drie containers met absolute alcohol en twee containers met xylol. Het lezen werd uitgevoerd met lichtmicroscopie (Nikon Labophot) op 100. De analyse werd uitgevoerd door 2 pathologen die de studiedetails niet kenden.
2.11. Immunohistochemische detectie van Inos
immunohistochemische reacties werden uitgevoerd in de longweefselsecties door middel van de techniek van streptavidine-biotine peroxidase complex (StreptABC, DAKO). De objectglaasjes werden eerder gecoat met een silaanoplossing (APTS, Sigma) verdund in 4% aceton. 3 m dikke secties werden verkregen met behulp van een mechanisch microtoom. De secties werden vervolgens gedeparaffiniseerd en achtereenvolgens ondergedompeld in xylol en ethanol en onderworpen aan antigene terugwinning door bestralingswarmte in een snelkookpan (Eterna, Nigro) met citraatbuffer (10 mM, pH 6,0) gedurende 15 minuten. Peroxidase blokkering werd uitgevoerd met een waterstofperoxideoplossing van 3%, gevolgd door incubatie met primair antilichaam tegen NOS-2 (inos, 1 : 40, Santa Cruz). De reacties werden gemarkeerd met diaminobenzidine (DAB, Sigma) oplossing bij 60 mg% en werden tegengewerkt met Harris hematoxyline (Merck). Voor elke reactie werd een positieve controle gebruikt op weefsel waarvan bekend was dat het positief was voor het geteste antilichaam. Twee negatieve controles werden ook gebruikt, de eerste door afwezigheid van het primaire antilichaam en de tweede door het verwijderen van het secundaire antilichaam tijdens de reactiestappen. De gevallen werden als iNOS-positief beschouwd wanneer de bruine kleuring van ten minste matige intensiteit zichtbaar was in het celcytoplasma en in meer dan 10% van de cellen.
2.12. Statistische analyse
de gegevens worden gepresenteerd als gemiddelde ± standaarddeviatie (SD) en zijn geanalyseerd met behulp van statistische software SPSS 15.0. De variabelen werden getest op normaliteit door middel van de Kolmogorov-Smirnov test. Eenrichtingsanalyse van variantie (ANOVA) werd gebruikt voor intergroepverschillen. Student Newman-Keuls post hoc test werd gebruikt voor parametrische variabelen en Kruskal-Wallis voor de niet-parametrische variabelen. Het niveau van betekenis gebruikt was .
3. Resultaten
3.1. Fytochemische Analyses
fytochemische analyses van A. blazei wezen op de aanwezigheid van saponinen en alkaloïden. Andere secundaire metabolieten zoals antrachinonen, hartglycosiden, cumarines, flavonoïden, fenolzuren en tannines werden niet gedetecteerd.
3.2. Hypoxanthine / Xanthine Oxidase in Vitro Assay
De in vitro antioxidantactiviteit van het extract werd bepaald door de productie van hydroxylbenzoëzuren (DHBA) te controleren als een product van de hydroxylradicaalaanval op salicylzuur in de hipoxanthine-xanthine oxidase assay. De vermindering van de totale oxidatieproducten als functie van de concentratie van A. blazei waterig extract toegevoegd aan de assay resulteerde in een in vitro antioxidant capaciteit op een dosisafhankelijke manier. Het waterige extract van A. blazei verminderde de vorming van beide DHBA-soorten tot 45.2 % in de hoogste gebruikte concentratie (2 mg/mL). De IC50-waarde werd berekend en bleek 0,99 mg/mL te zijn. Een tweede type paddenstoel (Lentinula edodes) waarvoor de auteurs de aanwezigheid van alkaloïden niet vonden werd gebruikt als controlemonster (IC50 van 1,95 mg/mL). Trolox (vitamine E) werd gebruikt als positieve controle en vertoonde een IC50 van 0,34 mg/mL (figuur 1).
remming van de vorming van reactieve zuurstofsoorten door waterige extracten van bovengrondse delen van Agaricus blazei (), Lentinula edodes () en Trolox, gebruikt als positieve controle () met behulp van het hypoxanthine/xanthine-oxidasesysteem. De gegevenspunten worden weergegeven als gemiddelde van ± SD, = 3.
3.3. DPPH-Scavenging Assay
het vrije radicalen scavenging effect van de beide van A. blazei waterig extract, L. edodoes waterig extract, evenals trolox, als positieve controle, werd getest, met behulp van de dpph vrije radicalen scavenging assay . De IC50-waarden voor A. blazei waterig extract en voor L. edodes-extract zijn weergegeven in Tabel 1. De resultaten van het vrije radicalenafvangeffect van trolox (IC50 = 0,02 mg/mL), gebruikt als positieve controle, werden gebruikt om de test te valideren. Hoewel de vrije radicalen afvangcapaciteit van de extracten lager was (hogere concentratie is nodig om de absorptie van DPPH met 50% te verminderen) dan het effect van trolox, was de A. blazei waterig extract (met het hoogste flavanongehalte) bood veelbelovende antioxidante activiteit met een IC50 van 1,77 mg/mL. L. edodes daarentegen had de laagste afvangactiviteit (IC50 = 3,22 mg / mL), wat in overeenstemming is met de afwezigheid van alckloïden bij deze paddenstoelensoort.
| Monster | remming van DPPH (%) | oncentratie | 0,1 g/ml | 0,25 mg/ml | 0.5 mg/mL | 1 mg/mL | 2 mg/mL | IC50 (mg/mL) |
| Trolox | 91.27 | 93.53 | 96.71 | 99.03 | 99.89 | 0.02 ± 0.00 |
| Agaricus blazei | 7.28 | 10.77 | 17.09 | 46.32 | 48.81 | 1.77 ± 0.08 |
| Lentinula edodes | 2.19 | 4.68 | 8.33 | 18.56 | 30.63 | 3.22 ± 0.12 |
3.4. Lichaamsgewicht-en Serumanalyses
het lichaamsgewicht van diabetische dieren was significant verminderd en met A. Blazei behandelde dieren verloren nog meer gewicht (Tabel 2). Het A. Blazei-extract verminderde blijkbaar de glycemie bij diabetische ratten (), maar de glycemische curve was vergelijkbaar bij diabetische en behandelde dieren. A. Blazei verlaagde echter significant de totale cholesterol-en triglyceridenspiegels (). De DM en DM + A. Blazei groepen hadden verschillende steekproefgrootten vanwege de hogere sterfte van de dieren van DM groep tijdens het experiment.
|
|||||||||||||||||||||||||||||||
3.5. Biochemische analyse en oxidatieve Stress
A. Blazei verminderde significant () de lipoperoxidatieniveaus zoals bepaald door TBA-RS (Tabel 3). De activiteit van antioxidantenzymen SOD en CAT vertoonde echter geen verschillen tussen de groepen. De GPX-activiteit van het enzym was significant verhoogd in de diabetesgroep en afgenomen in de met A. Blazei behandelde groep ().
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Data appear as mean ± SD. CO: Control, DM: Diabetes Mellitus and DM + A. Blazei: Diabetes Mellitus+ Agaricus blazei. CO versus DM. DM versus DM + A. Blazei. |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||
3.6. Histologische analyse
Stz-geïnduceerde Diabetes Mellitus veroorzaakte ernstige vasculaire schade aan het longweefsel (Figuur 2(c)), waarbij ook alveolaire veranderingen zoals septaruptuur werden aangetoond. Picrosirius kleuring onthulde een uitbreiding van het bindweefsel in de alveolocapillaire ruimte van de diabetische groep (Figuur 2(d)) en een duidelijke terugkeer van dit patroon in de Ab-behandelde groep (Figuur 2(f)).
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)
3.7. Immunohistochemische analyse van iNOS
Figuur 3 toont de verdeling van iNOS in het longweefsel zoals gedetecteerd door immunohistochemie. De positieve bruine kleuring in het Long bronchiale epitheel en capillaire endotheel in de DM groep wees op Inos positiviteit. iNOS kleuring was minder duidelijk in de A. Blazei group and absent in the CO group.
(a)
(b)
(c)
(a)
(b)
(c)
iNOS immunohistochemistry in lung tissue. Magnification 400: There was no staining in the control group (a); reduction in the treated group (b) versus DM (c).
4. Discussie
resultaten van het effect van het waterige extract van A. blazei in de hipoxantine/xanthine-oxidase in vitro-assay en in de dpph-assay voor het opruimen van vrije radicalen toonden een significante in vitro antioxidantactiviteit aan. In beide tests gaf het extract een hogere antioxidantactiviteit te zien in vergelijking met het waterige extract van L. edodes, een andere paddenstoelensoort en dat alleen saponinen bevat, maar geen alkaloïden, flavonoïden of tannines. Het is voorgesteld door Ribeiro et al. dat de antioxidant activiteit kan worden gerelateerd aan de aanwezigheid van alkaloïden in de paddenstoel. Met andere woorden, hogere alkaloïde concentraties genereren een betere antioxidant activiteit .
de belangrijkste bevinding van deze studie was de vermindering van pulmonale lipoperoxidatie bij ratten met streptozotocine-geïnduceerde diabetes na behandeling met Agaricus blazei. De vorige studies hebben een glycemia-verminderend effect getoond, dat insulineresistentie vermindert en de versie van het door-alvleeskliercellen verbetert . Echter, A. Blazei behandeling toonde hier een gunstig effect met betrekking tot de variabelen met betrekking tot de oxidatieve stress, ondanks het niet verminderen van hyperglycemie.
Kim et al. beschreven antidiabetogene effecten van-glucanen geëxtraheerd uit A. Blazei en zijn enzymatisch gehydrolyseerde oligosachariden, waarbij de in vitro en in vivo effecten in cultuur van-pancreascellen en bij dieren met streptozotocine-geïnduceerde diabetes worden geëvalueerd. Na behandeling met-glucanen en oligosacharide vertoonden de dieren een daling in glycemie, triglyceriden en cholesterolspiegels en in atherosclerotische activiteit . In onze studie werd de behandeling uitgevoerd met een grofextract van A. Blazei, zonder een van zijn verbindingen te isoleren, en dit is waarschijnlijk de verklaring voor het gebrek aan antiglycemische werking.
het extract van A. Blazei vertoonde in vitro en in vivo antioxiderende werking, maar de behandeling verminderde het gewicht van de dieren significant. Dit feit kan worden verklaard als gevolg van hoge doses van A. blazei extract gebruikt in dit experiment, anders dan doses gebruikt in andere studies die geen gewichtsvermindering aantonen . In een studie om de subchronische toxiciteit van een waterig extract van 90 dagen bij ratten te evalueren, waren er echter geen consistente behandelingsgerelateerde veranderingen in klinische symptomen, lichaamsgewicht en voedselconsumptie bij de dosis van 2654 mg kg−1 voor mannelijke ratten, een hogere dosis dan in onze studie werd gebruikt . Er waren meer studies nodig om het toxische effect van A. Blazei in deze doses te evalueren, met de analyse van specifieke variabelen.
GPx was significant toegenomen in de diabetesgroep en was significant afgenomen na behandeling met A. Blazei. Deze toename van GPX kan verantwoordelijk zijn voor de verminderde niveaus van verminderde glutathion, omdat het het belangrijkste substraat is dat zijn activiteit reguleert. Gumieniczek et al. aangetoond dat in experimentele DM de pulmonale oxidatieve stress aanwezig is als gevolg van de vermindering van antioxidant enzymactiviteit en verhoogde lipoperoxidatie. Dergelijke veranderingen zijn meer significant na weken na inductie. Tijdens DM is er een afname van Cu,Zn-SOD activiteit en een toename van catalase activiteit . In onze studie, noch SOD noch catalase activiteit werden veranderd in geen van de verschillende groepen. Een mogelijke verklaring voor onze bevindingen die afwijken van die van Gumieniczek is dat in onze studie de analyse van antioxidantenzymen eerder werd uitgevoerd.
in ons experimentele model werden talrijke histologische veranderingen waargenomen in het longstelsel. Deze veranderingen zijn in overeenstemming met die in de literatuur , met name wat betreft de toename van het bindweefsel en verdikking van de basale lamina waargenomen door de techniek van picrosirius kleuring. Na behandeling met A. Blazei werden dergelijke veranderingen minder duidelijk. De vorming van intra-en intermoleculaire binding met collageen, als gevolg van het glycosilatieproces, leidt tot structurele veranderingen in weefseleiwitten zoals toename van de stijfheid, resistentie tegen proteolytische spijsvertering en de extracellulaire matrix (waaronder fibronectine, procollageen α2, type III -, IV-en VI-collageen en laminina) . In onze studie, kan de belangrijkste factor voor de terugkeer van dit proces na behandeling met A. Blazei worden verklaard door de vermindering van schade als gevolg van de oxidatieve stress aangetoond door de vermindering van pulmonale lipoperoxidatie.
een langdurige hyperglycemische toestand is gerelateerd aan veranderingen in de Inos-expressie in verschillende weefsels . In de immunohistochemische analyse van onze studie was iNOS significant verhoogd in het longweefsel van de diabetische ratten en significant afgenomen toen de dieren werden behandeld met A. Blazei. Studies hebben aangetoond dat mRNA-expressie van endotheliaal stikstofmonoxide synthase (eNOS) wordt verminderd, terwijl iNOS kan worden verhoogd samen met de generatie van cyclisch guanosine monofosfaat (c-GMP) .
in een recent gepubliceerde studie werden lipoperoxidatie, superoxide dismutase activiteit en de distributie van iNOS En eNOS isovormen geëvalueerd in het longweefsel van diabetische ratten. Een toename van de oxidatieve stress in combinatie met de toename van iNOS in het longweefsel van diabetische ratten werd waargenomen, die omgekeerd was in de groep die werd behandeld met antioxidant α-liponzuur . Deze bevindingen zijn in overeenstemming met die welke in dit werk worden gerapporteerd, zoals de waargenomen verhoogde oxidatieve stress, de histologische pulmonale veranderingen en het effect van een antioxidant therapie in dit DM model.
deze studie toont het gunstige effect aan van A. Blazei waterig extract met betrekking tot oxidatieve stressvariabelen en pulmonale morfopathologie bij streptozotocine-geïnduceerde diabetes. Deze bevindingen kunnen in belangrijke mate bijdragen tot een beter begrip van de pulmonale fysiopathologie bij DM. Onze studie is ook relevant en met betrekking tot het therapeutisch potentieel van A. Blazei. dit werk werd ondersteund door subsidies van de Braziliaanse agentschappen “Fundo de Incentvo à Pesquisa e Eventos (FIPE) do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA)” en “Laboratório de Hepatologia e Fisiologia Experimental da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (HCPA/UFRGS)”.
Leave a Reply