Abstrakt

tato studie byla navržena tak, aby hodnotit oxidativní stres, stejně jako terapeutický účinek Agaricus blazei Muril (A. Blazei) u potkanů s streptozotocin-indukované diabetes. Použili jsme 25 potkanů Wistar a DM byl indukován injekcí streptozotocinu (70 mg / Kg i.p.). Agaricus blazei Muril byl podáván denně počínaje 40 dny po nástupu onemocnění. A. Blazei byl testován jako vodný extrakt pro své fytochemické složení a byla také hodnocena jeho antioxidační aktivita in vitro. Lipoperoxidation (LPO) a superoxiddismutázy (SOD), kataláza a glutathion peroxidáza aktivity byly měřeny v plicní tkáni, stejně jako přítomnost indukovatelné syntázy oxidu dusnatého (iNOS), pomocí imunohistochemie. Byla také provedena anatomopatologická studie. Fytochemický screening a. Blazei detekoval přítomnost alkaloidů a saponinů. Extrakt vykazoval významnou antioxidační aktivitu v DPPH-scavenging a testech hipoxanthin / xanthin oxidázy. Plicní LPO se zvýšil u diabetických zvířat (;) ve srovnání s kontrolní skupinou (), následované snížením ve skupině léčené a. Blazei (;). iNOS byl zjištěn zvýšený v plicích u diabetických potkanů a snížený ve skupině léčené a. Blazei. Plicní tkáň u diabetických potkanů vykazovala oxidační změny související s léčbou streptozotocinem. Léčba a. Blazei účinně snížila oxidační stres a přispěla k regeneraci tkání.

1. Úvod

Diabetes mellitus (DM) je endokrinní metabolické onemocnění s rostoucí incidencí a klinickým významem s vysokou morbiditou a úmrtností . Mezi jeho chronické komplikace patří mikro-a makro vaskulární poruchy související s renálním, kardiovaskulárním a nervovým systémem . V posledních dvou desetiletích však byly v klinických a experimentálních studiích hlášeny také změny respiračních funkcí. Pokles plicní funkce v průběhu let, týkající se snížila opatření plicní objemy a kapacity, byly patrné u diabetických pacientů s poruchou metabolické kontroly . Strukturální změny v bazální membráně plicního kapilárního endotelu jsou přítomny také v DM, s zahušťování alveolus-kapilární membrány a snížení difúzní schopnosti . Kromě toho jsou diabetičtí pacienti náchylnější k plicním infekcím, zejména tuberkulóze, která má v této konkrétní populaci čtyřikrát větší výskyt . I když všechny tyto změny byly patrné v klinických a experimentálních studií, několika studiích zkoumány hlavní physiopathologic mechanismy zahrnující plicní komplikace související s DM.

existují 4 cesty spojené s chronickými komplikacemi DM, jmenovitě polyolová dráha, aktivace protein kinázy C (PKC), zvýšený průtok v hexosaminové dráze a cesta pokročilých konečných produktů glykosilace (věk). Ačkoli se v každém případě projevuje odlišně, oxidační stres (OS )je zapojen do čtyř výše uvedených cest.

Tam je spousta důkazů, které ukazují, že nárůst oxidu dusnatého (no), vytvořený působením indukovatelné syntázy oxidu dusnatého (iNOS) je jedním z faktorů, zodpovědný za patogenezi a komplikace vyplývající z DM . Použití exogenní antioxidanty mohou představovat velký terapeutický potenciál pro léčbu DM

basidiomycete Agaricus blazei Murill (A. Blazei), populárně známý jako „sluneční houba“, je původem z Brazílie a je široce pěstuje v Japonsku, protože jeho léčivé vlastnosti. Tato houba se tradičně používá při léčbě aterosklerózy, hepatitidy, hyperlipidémie, dermatitidy a rakoviny a bylo prokázáno, že má imunomodulační a antimutagenní účinky in vivo I in vitro. Polysacharidy α-glykan a β-glykan jsou zodpovědné za funkci imunologické a protinádorové stimulace .

a. Blazei již bylo prokázáno, že je prospěšný v inzulínové rezistenci související s diabetem typu 2, ale žádná studie neprokázala antioxidační potenciál a. Blazei in vivo u DM . Tato studie byla tedy navržena tak, aby vyhodnotila oxidační stres a terapeutický účinek a.Blazei v plicní tkáni zvířat s DM indukovaným streptozotocinem.

2. Metody

2.1. Houby

Vzduchem sušené houby druhu Agaricus blazei Murill (typ C) byl to dárek od Dr. Luiz Antonio Graciollo, Katedra Inženýrství na State University of São Paulo (UNESP), Brazílie.

2.2. Příprava A. blazei Vodný Extrakt

Vzduch-sušené části (100 g) byly frézované a vodná extrahována byla připravena podle infuze (1/10 hub/rozpouštědlo). Infuze stála při pokojové teplotě po dobu 30 minut. Po ochlazení a filtraci byl extrakt zmrazen a koncentrován lyofilizací po dobu pěti dnů přes noc, aby se získal vodný extrakt a.blazei.

2.3. Chemikálie a Činidla

2,2-Diphenil-1-picrylhidrazyl (DPPH), hypoxanthin, xanthin oxidáza, trolox a kyselina salicylová byly zakoupeny od Sigma (St. Louis, USA).

2.4. Fytochemické Prověřování

fytochemické analýzy (flavonoidy, třísloviny, antrachinony, alkaloidy, saponiny, kumariny a srdeční glykosidy). blazei byl proveden podle metod popsaných Harbornem . Analýzy chromatografie na tenké vrstvě byly provedeny podle systémů a vývojářů označených Wagnerem a Bladtem .

2.5. Hypoxanthin/Xanthin Oxidáza Assay

metody použité ke stanovení obsahu hydroxylových radikál úklidu schopnost extraktů byla založena na metodě Owen et al. . Krátce, extrakt byl rozpuštěn v testu pufr (hypoxanthin, Fe(III) – EDTA a salicylová kyselina) v koncentraci 2,0 mg/mL a zředí vhodným způsobem (ve trojím vyhotovení) v testu pufrem na konečný objem 1.0 mL dává rozsah 0,1-2,0 mg / ml. K zahájení reakce se přidá 5 L alikvot xanthinoxidázy rozpuštěné v 3,2 M (NH4)2SO4. Zkumavky se vzorkem byly inkubovány po dobu 3 hodin při 37°C, kdy byla reakce dokončena. A 30 L alikvot reakční směsi byl analyzován HPLC za použití chromatografických podmínek popsaných Owenem et al. . Chromatografická analýza byla provedena pomocí gradientu založeného na methanolu/vodě / kyselině octové s kolonou reverzní fáze µBondaPak C18 a detekcí při 325 nm. Zařízení HPLC mělo separační modul 2695 a UV detektor 2487. Hydroxylace kyseliny salicylové a hypoxanthinu byly sledovány při A = 325 a a = 278 nm. Množství dihydroxyphenols (2,5-dihydroxibenzoic kyseliny a 2,3-dihydroxibenzoic kyselina) (2,5-DHBA 2,3-DHBA) produkován hydroxylový radikál (OH•) útok na kyselinu salicylovou byla stanovena od standardní křivky připravené s příslušnými čisté dihydroxyphenols.

2.6. DPPH-Úklidová Assay

Úklidu DPPH volného radikálu byla měřena pomocí modifikované metody popsané Yamaguchi et al. ve kterém byly různé methanolové rostlinné extrakty přidány do pufru Tris–HCl (100 mM), pH 7,0, obsahujícího 250 mM DPPH rozpuštěného v methanolu. Nejméně šest různých ředění každého extraktu byly testovány, a nechá se stát 20 minut ve tmě, než absorbance byla měřena při 517 nm pomocí spektrofotometru Shimadzu model UV-1602PC (Kjóto, Japonsko). Experiment byl proveden ve trojím vyhotovení. Antioxidační aktivita (AOA) byla vyjádřena jako IC50 (inhibiční koncentrace v g/mL vzorky nebo pozitivní kontroly nezbytné ke snížení absorbance DPPH na 50% ve srovnání s negativní kontrolou). Čím nižší je IC50, tím vyšší je AOA .

2.7. Zvířata a Experimentální Protokol

experimentální protokol použit v souladu s normami stanovenými Etické a Zdravotní Výzkum Výboru Skupiny pro Výzkum a Postgraduální Studium v Nemocnici de Clínicas Porto Alegre, jakož i se Zásadami pro Výzkum Zahrnující Zvířata (NAS). Pouze samec Wistar potkanů byly použity, získané z chovné kolonie Instituto de Ciências Básicas da Saúde da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (UFRGS). Průměrná hmotnost zvířat na začátku studie byla 200-300 gramů. Oni byli drženi v 12 : 12 hodin světlo/tma cyklu (světlo od 7 hodin do 7 hodin) v teplota-kontrolované prostředí (22 ± 4°C).

DM byla vyvolána tím, že jediná injekce streptozotocin jsem.p. (STZ, Sigma Chemical Company, St. Louis, MO, EUA) v dávce 70 mg/Kg tělesné hmotnosti . STZ byl rozpuštěn v pufru citrátu sodného (0,1 M, pH 4.5) a podáván v levé části břicha zvířete asi 10 minut po rozpuštění v roztoku pufru. Zvířata v kontrolní skupině dostávala pouze NaCl 0,9% i. p. při stejném objemu pufru použitého k rozpuštění STZ. Extrakt a. blazei se zředí na koncentraci 0,1 g / mL (10%) v roztoku destilované vody a nechá se 2 hodiny při pokojové teplotě . Cesta podání byla žaludeční sondou s konečným roztokem 2 mL a léčba byla zahájena od 40. dne indukce diabetu. Zvířata byla randomizována do různých skupin: kontrolní (CO), diabetik léčený NaCl (DM) a diabetik léčený a.blazei (DM + a. blazei). Vzorky krve byly odebrány z retro-orbitálního plexu jeden den před indukcí a 2 a 30 dní po začátku experimentu. Na konci 60 dnů pokusu byla zvířata indukována k eutanazii exsanguinací po anestetizaci xilasinem a ketaminem. Krev z retro-orbitálního plexu byla odebrána a pravá plíce byla vyříznuta a udržována ve 4% formaldehydu pro histologickou analýzu. Levá plíce byla odstraněna a zmrazena při -80°C pro další analýzy.

2.8. Sérové analýzy

vzorky krve byly umístěny do zkumavky s heparinem (Liqueminem), aby se zabránilo koagulaci. Materiál byl poté centrifugován při 1.800 g po dobu 15 minut. Sraženina byla zlikvidována a plazma odstraněna.

určit, glukózy, cholesterolu a triglyceridů úrovně jsme použili enzymatické kolorimetrické zkoušce (Kit Labtest, Bio Diagnóstica) a absorbance byla měřena na spektrofotometru (CARY 3E-UV-Visible Spektrofotometr Varian). Zvířata s koncentrací glukózy vyšší než 250 mg/dL byla považována za diabetická.

2.9. Biochemické Analýzy Oxidační Stres a Antioxidační Test

plíce byly homogenizovány s 9 mL fosfátového pufru (140 mM KCL, 20 mM fosfát, pH 7.4) na gram tkáně. Koncentrace proteinu v těchto plicních homogenátech byla stanovena za použití standardního roztoku bovinního albuminu podle Lowryho et al. .

plicní lipoperoxidace byla stanovena metodou reaktivních látek kyseliny thiobarbiturové (TBA-RS).

aktivita superoxiddismutázy (SOD)v plicní tkáni byla stanovena technikou založenou na inhibici tvorby adrenochromu při autoxidaci epinefrinu . Kataláza (CAT), aktivita v plicní tkáni byla stanovena, jak je popsáno jinde a stanovení selen-dependentní glutathion peroxidázy v plicní tkáni byla získaná prostřednictvím techniky spočívající v měření NADPH oxidací glutathion reduktázy .

2.10. Histologická studie

pro histologickou analýzu byly vzorky vloženy do parafínu dvakrát. Pomocí mikrotomu byly parafínové bloky rozřezány na 3-m seriátové sekce. Ve fázi barvení byly diapozitivy ponořeny do hematoxylinu-eosinu a pikrosiria. Ve fázi dehydratace prošly struktury třemi nádobami s absolutním alkoholem a dvěma nádobami s xylolem. Čtení bylo provedeno světelnou mikroskopií (Nikon Labophot) při 100. Analýzu provedli 2 patologové, kteří neznali podrobnosti studie.

2.11. Imunohistochemická Detekce iNOS

Imunohistochemické reakce, byly provedeny v plicní tkáni oddíly přes techniku streptavidin-biotin peroxidázy komplex (StreptABC, DAKO). Sklíčka byla předtím potažena silanovým roztokem (APTS, Sigma) zředěným 4% acetonem. Úseky o tloušťce 3 m byly získány pomocí mechanického mikrotomu. Řezy byly poté deparaffinized a postupně ponoří do xylolu a ethanolu a podrobeny antigenní oživení ozářením tepla v tlakovém hrnci (Eterna, Nigro) pomocí citrátovém pufru (10 mM, pH 6,0) po dobu 15 minut. Blokování peroxidázy bylo provedeno za použití 3% roztoku peroxidu vodíku s následnou inkubací s primární protilátkou proti NOS-2 (iNOS, 1: 40, Santa Cruz). Reakce byly označeny roztokem diaminobenzidinu (DAB, Sigma) v dávce 60 mg% a kontrastovány s Harrisovým hematoxylinem (Merck). Pro každou reakci byla použita pozitivní kontrola tkáně, o které bylo známo, že je pozitivní na testovanou protilátku. Byly také použity dvě negativní kontroly, první nepřítomností primární protilátky a druhá odstraněním sekundární protilátky během reakčních kroků. Případy byly považovány za iNOS-pozitivní, když je hnědé zbarvení alespoň střední intenzity bylo viditelné v buněčné cytoplazmě a ve více než 10% buněk.

2.12. Statistická analýza

data jsou prezentována jako průměr ± směrodatná odchylka (SD) a byla analyzována pomocí statistického softwaru SPSS 15.0. Proměnné byly testovány na normálnost pomocí Kolmogorov-Smirnovova testu. Pro meziskupinové rozdíly byla použita jednosměrná analýza rozptylu (ANOVA). Student Newman-Keuls post hoc test byl použit pro parametrické proměnné a Kruskal-Wallis pro neparametrické. Použitá úroveň významnosti byla .

3. Výsledky

3.1. Fytochemické analýzy

fytochemické analýzy a. blazei ukázaly přítomnost saponinů a alkaloidů. Jiné sekundární metabolity, jako jsou antrachinony, srdeční glykosidy, kumariny, flavonoidy, fenolové kyseliny a taniny, nebyly detekovány.

3.2. Hypoxanthin/Xanthin Oxidáza V Testu in Vitro

in vitro antioxidační aktivita extraktu byla stanovena pomocí sledování produkce hydroxylové kyseliny benzoové (DHBA) jako produkt hydroxylové radikální útok na kyselinu salicylovou v hipoxanthine-xantin oxidase assay. Snížení celkových oxidačních produktů v závislosti na koncentraci vodného extraktu a. blazei přidaného do testu vedlo k antioxidační kapacitě in vitro v závislosti na dávce. Vodný extrakt a. blazei snížil tvorbu obou druhů DHBA na 45.2 % v nejvyšší použité koncentraci (2 mg / mL). Hodnota IC50 byla vypočtena a bylo zjištěno, že je 0,99 mg / ml. Jako kontrolní vzorek byl použit druhý typ houby (Lentinula edodes), u kterého autoři nenalezli přítomnost alkaloidů (IC50 1,95 mg / mL). Trolox (vitamin E) byl použit jako pozitivní kontrola a zobrazí IC50 0,34 mg/mL (Obrázek 1).

Obrázek 1

Inhibice generace reaktivních forem kyslíku tím, že vodné extrakty z nadzemních částí Agaricus blazei (), Lentinula edodes () a Trolox, který se používá jako pozitivní kontrola (), pomocí hypoxanthin/xanthin oxidáza systému. Datové body jsou uvedeny jako průměr ± SD, = 3.

3.3. DPPH-Scavenging Assay

účinek zachytávání volných radikálů obou vodného extraktu a. blazei, L. edodoes vodný extrakt, stejně jako trolox, jako pozitivní kontrola, byl testován pomocí testu DPPH volných radikálů . Hodnoty IC50 pro vodný extrakt a. blazei a pro extrakt L. edodes jsou uvedeny v tabulce 1. K validaci testu byly použity výsledky účinku odstraňování volných radikálů troloxu (IC50 = 0, 02 mg/mL), který byl použit jako pozitivní kontrola. Ačkoli kapacity pro zachytávání volných radikálů extraktů byly nižší (vyšší koncentrace jsou nezbytné ke snížení absorbance DPPH o 50%) než účinek troloxu, a. blazei vodný extrakt (s nejvyšší flavanone obsahu) představila slibné antioxidační aktivitu s IC50 1,77 mg/mL. L. edodes měl naopak nejnižší Úklidovou aktivitu (IC50 = 3, 22 mg/mL), což je v souladu s nepřítomností alckloidů u tohoto druhu hub.

3.4. Tělesné Hmotnosti a Analýzy Séra

tělesné hmotnosti diabetické zvířata byla významně snížena, a. A. Blazei-léčených zvířat zhubla ještě více (Tabulka 2). Extrakt a. Blazei zjevně snížil glykémii u diabetických potkanů (), ale glykemická křivka byla podobná u diabetických a léčených zvířat. A.Blazei však významně snížil hladinu celkového cholesterolu a triglyceridů (). Skupiny DM a DM + a. Blazei měly různé velikosti vzorků kvůli vyšší úmrtnosti zvířat skupiny DM během experimentu.

3.5. Biochemická analýza a oxidační stres

a. Blazei významně snížil () hladiny lipoperoxidace stanovené TBA-RS (Tabulka 3). Aktivita antioxidačních enzymů SOD a CAT však neprokázala žádné rozdíly mezi skupinami. Aktivita enzymu GPx byla významně zvýšena ve skupině s diabetem a snížena ve skupině léčené a. Blazei ().

3.6. Histologické Analýzy

STZ-indukované Diabetes Mellitus způsobil vážné cévní poranění plicní tkáně (Obrázek 2(c)), kde alveolární změny, jako septa ruptura byly také svědčí. Picrosirius barvení odhalilo rozšíření konjunktivní tkáně v alveolokapilární prostor diabetické skupiny (viz Obrázek 2(d)) a zdánlivý návrat tohoto vzoru v Ab-experimentální skupina (Obrázek 2(f)).

(a)

(b)

(c)

(d)

(e)

(f)

(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
(f)

Figure 2

histologie plicní tkáně obarvené HE (a, c A e) a pikrosiriem (b, d A f). Zvětšení 100: (a) a (b): Kontrola, (c) a (d): Diabetes Mellitus, (e) a (f): Diabetes Mellitus léčen Agaricus blazei.

3.7. Imunohistochemická analýza iNOS

obrázek 3 ukazuje distribuci iNOS v plicní tkáni detekovanou imunohistochemií. Pozitivní hnědá skvrna pozorovaná v plicním bronchiálním epitelu a kapilárním endotelu ve skupině DM indikovala pozitivitu iNOS. INOS barvení bylo méně patrné v A. Blazei group and absent in the CO group.

(a)

(b)

(c)

(a)
(b)
(c)

Figure 3

iNOS immunohistochemistry in lung tissue. Magnification 400: There was no staining in the control group (a); reduction in the treated group (b) versus DM (c).

4. Diskuse

Výsledky volný radikální úklidu účinek. A. blazei vodný extrakt v hipoxantine/xantin oxidázy v testu in vitro a v DPPH volného radikálu úklidu test ukázal významnou in vitro antioxidační aktivitu. V obou testech extrakt vyjádřil vyšší antioxidační aktivitu ve srovnání s vodným extraktem L. edodes, což je další druh houby a který představuje pouze saponiny, ale ne alkaloidy, flavonoidy nebo taniny. To bylo navrženo Ribeiro et al. že antioxidační aktivita může souviset s přítomností alkaloidů v houbě. Jinými slovy, vyšší koncentrace alkaloidů vytvářejí lepší antioxidační aktivitu .

hlavním zjištěním této studie bylo snížení plicní lipoperoxidation u potkanů s streptozotocin-vyvolané cukrovky po ošetření s Agaricus blazei. Předchozí studie prokázaly účinek snižující glykémii, který snižuje inzulínovou rezistenci a zvyšuje její uvolňování pankreatickými buňkami. Nicméně, A. Léčba Blazei zde ukázala příznivý účinek, pokud jde o proměnné související s oxidačním stresem, přestože nesnižuje hyperglykémii.

Kim et al. popsané antidiabetogenic účinky -glucanes extrahované z. A. Blazei a jeho enzymaticky hydrolyzovaný oligosacharides, hodnocení in vitro a in vivo efekty v kultuře -buňky pankreatu a u zvířat s streptozotocin-indukované diabetes. Po léčbě-glukany a oligosacharidem vykazovala zvířata snížení hladiny glykémie, triglyceridů a cholesterolu a aterosklerotické aktivity . V naší studii, byla provedena léčba pomocí hrubého extraktu z A. Blazei, bez izolace některé z jejích sloučenin, a to je asi vysvětlení pro nedostatek antiglycemic akce.

extrakt a. Blazei prokázal in vitro a in vivo antioxidační aktivitu, léčba však významně snížila hmotnost zvířat. Tuto skutečnost lze vysvětlit vysokými dávkami extraktu a. blazei použitého v tomto experimentu, odlišně od dávek použitých v jiných studiích, které neprokazují snížení hmotnosti . Nicméně, ve studii k vyhodnocení 90-denní studie subchronické toxicity vodného extraktu u potkanů, tam byly žádné konzistentní související s léčbou změny v klinické příznaky, tělesná hmotnost a spotřeba potravy v dávce 2654 mg kg−1 u samců potkana, vyšší dávka, než je použita v naší studii . K vyhodnocení toxického účinku a. Blazei v těchto dávkách bylo zapotřebí více studií s analýzou specifických proměnných.

GPx byl významně zvýšen ve skupině s diabetem a byl významně snížen po léčbě a. Blazei. Toto zvýšení GPx může odpovídat za snížené hladiny redukovaného glutathionu, protože je hlavním substrátem regulujícím jeho aktivitu. Gumieniczek a kol. ukázalo se, že v experimentálním DM je přítomen plicní oxidační stres z důvodu snížení aktivity antioxidačních enzymů a zvýšené lipoperoxidace. Tyto změny jsou významnější po týdnech po indukci. Během DM dochází ke snížení aktivity Cu, Zn-SOD a ke zvýšení aktivity katalázy . V naší studii nebyla aktivita SOD ani katalázy změněna v žádné z různých skupin. Možným vysvětlením našich zjištění odlišných od zjištění Gumieniczek je to, že v naší studii byla analýza antioxidačních enzymů provedena dříve.

v našem experimentálním modelu byly pozorovány četné histologické změny v plicním systému. Tyto změny jsou v souladu s těmi, které uvádí v literatuře , zejména pokud jde o zvýšení konjunktivní tkáně a ztluštění bazální lamina pozorován přes techniku picrosirius barvení. Po léčbě a. Blazei se tyto změny staly méně zřejmými. Tvorby intra-a intermolekulárních vazeb v kolagenu, vyplývající z procesu glycosilation, vede ke strukturální změny v tkáňové proteiny, jako je zvýšení tuhosti, odolnost vůči proteolytické trávení a extracelulární matrix (včetně fibronektinu, prokolagenu α2, typ III, IV a VI kolagenu, a laminina) . V naší studii lze hlavní faktor pro reverzi tohoto procesu po léčbě a. Blazei vysvětlit snížením poškození způsobeného oxidačním stresem prokázaným snížením plicní lipoperoxidace.

dlouhodobý hyperglykemický stav souvisí se změnami exprese iNOS v několika tkáních . V imunohistochemické analýze naší studie byl iNOS významně zvýšen v plicní tkáni diabetických potkanů a významně poklesl, když byla zvířata léčena a. Blazei. Studie prokázaly, že exprese mRNA endoteliální syntázy oxidu dusnatého (eNOS) je snížena, zatímco iNOS může být zvýšen spolu s tvorbou cyklického guanosin monofosfátu (c-GMP) .

v nedávno publikované studii byla hodnocena lipoperoxidace, aktivita superoxiddismutázy a distribuce izoforem iNOS a eNOS v plicní tkáni diabetických potkanů. Bylo pozorováno zvýšení oxidačního stresu souběžně se zvýšeným iNOS v plicní tkáni diabetických potkanů, které bylo obráceno ve skupině léčené antioxidační kyselinou α-lipoovou . Tato zjištění jsou v souladu s nálezy uvedenými v této práci,jako je pozorovaný zvýšený oxidační stres, histologické plicní změny a účinek antioxidační terapie v tomto modelu DM.

tato studie demonstruje příznivý účinek vodného extraktu a. Blazei, pokud jde o proměnné oxidačního stresu a plicní morfopatologii u diabetu indukovaného streptozotocinem. Tato zjištění mohou významně přispět k lepšímu pochopení plicní fyziopatologie u DM. Naše studie je také relevantní a s ohledem na terapeutický potenciál a. Blazei.

Potvrzení

Tato práce byla podpořena granty z Brazilské Agentury „Fundo de Incentvo à Pesquisa e Eventos (FIPE) Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA)“, a „Laboratório de Hepatologia e Fisiologia Experimentální da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (HCPA/UFRGS)“.