Krve a kostní Dřeně Analýzy

Omezení obsluhy na vytváření buněčných suspenzí se nevztahují na pacienty s krví nebo kostní dřeně zapojení chronické lymfoproliferativní poruchy. Subklasifikace těchto lézí do značné míry závisí na průtokové cytometrii.42,44,49-51 chronická lymfocytární leukémie (CLL) je v podstatě definována svými imunofenotypovými charakteristikami. Jiné lymfoproliferativní poruchy B-buněk mají charakteristické, ne-li vždy zcela specifické fenotypy. Lymfom z plášťových buněk lze často rozpoznat ve své leukemické fázi, i když nejkonkrétnější marker, cyklin D1, je velmi obtížné detekovat proudem současnými technikami. Trichocelulární leukémie, naopak, má nejen charakteristický, ale také vysoce specifické phenotype42,50,52, občas, pacienti s nevysvětlitelnými pancytopenie může být určena trichocelulární leukémii, když jen nepatrný počet krvinek s klasickým fenotypem jsou identified52 (Obr. 15-3).

průtoková cytometrie může také detekovat prognostické faktory u osob s CLL. Uznávajíce, že CLL lze rozdělit do chudé-prognóza typ asociovaný s nonmutated imunoglobulinu V oblasti genů a lepší prognózu mutovaný fenotyp, několik studií se pokusili identifikovat tok náhradníky. První ukazatel zjištěno, prognostické byl CD38, i když korelace ani s mutační stav nebo prognóza je nedokonalé.53,54 protein kináza 70 spojená s řetězcem Zeta (ZAP 70) se zdá být lepším náhradním markerem, i když také není dokonalá; poskytuje však prognostické informace.55-57 Nicméně, i když toto vyšetření je široce dostupné, zejména v komerčních referenčních laboratoří, přerušením mezi pozitivní a negativní může být libovolný, a tedy značná variabilita ve výsledcích existují mezi laboratořemi.Bylo provedeno 58,59 pokusů o zlepšení reprodukovatelnosti, 60 ale není vždy jisté, že konkrétní test poskytne stejné výsledky jako výsledky v publikované klinické literatuře. Další pokusy byly provedeny definovat prognosticky významné podskupiny pacientů s CLL pomocí jiné kombinace markerů,61 ale tyto kombinace nebyly přijaty v rutinní praxi.

primární hodnota průtokové cytometrie při hodnocení chronické leukémie je jeho schopnost prokázat, klonalita v B-buněčné populace na základě omezených vyjádření jednoho typu lehkého řetězce imunoglobulinu. Tato funkce je zvláště cenné při hodnocení pacientů s nevysvětlitelnou lymphocytosis62,63 a také je užitečná pro určení fáze u pacientů s B-cell non-Hodgkin lymfomu,64,65, protože přítomnosti tak málo, jak je 0,5% až 1% z klonální B-buněčné populace, nebo dokonce méně, může být prokázána v kostní dřeni nebo krvi některých pacientů. Vysoká citlivost průtokové cytometrie pro detekci klonálních populací však prokázala malé populace klonálních B-buněk u některých pacientů bez zjevného lymfomu nebo leukémie.66 nález malého klonu dřeně by proto měl být interpretován s opatrností v nepřítomnosti jiných důkazů lymfomu, analogicky k nalezení monoklonální gamapatie u pacienta bez důkazů myelomu.

průtoková cytometrie byla také rozsáhle použita ve studii pacientů s myelomem. Jedním z omezení průtoková cytometrie je, že plazmatické buňky jsou nedostatečně zastoupeny na dřeň aspiráty studoval toku ve srovnání s převahou buněk na filmech nebo v biopsiích; v důsledku toho nelze tuto techniku použít ke kvantifikaci buněk myelomu, a proto nemůže nahradit morfologii při použití tradičních diagnostických kritérií. Nicméně, plazmatické buňky mají charakteristický fenotyp, včetně velmi světlé exprese CD38 a exprese CD138,67,68 a jsou tedy snadno rozpoznat. Při použití technik membránově permeabilizace je snadné prokázat omezení lehkého řetězce cytoplazmatického imunoglobulinu (Ig).67 významnější je, že neoplastické plazmatické buňky mají obvykle abnormální fenotypy. Ačkoli neexistuje specifické fenotypové abnormality umožňuje rozlišení mezi benigní monoklonální gamapatie a mnohočetný myelom, průtoková cytometrie může být stále užitečné pro odlišení myelomu od monoklonální gamapatie nejasného významu, nebo předpovědět progresi monoklonální gamapatie nejasného významu či doutnající myelom.69-71 navíc bylo prokázáno, že průtokové cytometrické hodnocení abnormálních plazmatických buněk v době diagnózy myelomu má prognostický význam.72 kromě toho, detekce cirkulujících plazmatických buněk nebo přetrvávající abnormální fenotyp po terapii, včetně detekce minimální reziduální nemoci, je ovlivněn výsledek u pacientů s myelomem.69,71,73-76

Klonalita T-lymfocytů také může být prokázána pomocí průtokové cytometrie, i když metoda je složitější a není tak široce dostupné, jako pro B buňky. Tato technika je založena na demonstraci omezení použití genu V-beta u leukémií T-buněk.77-79 malignit T-buněk také často vykazují abnormální fenotypy T-buněk, které jsou nejčastěji charakterizovány ztrátou normálního pan-T antigenu nebo expresí antigenu T-buněk při abnormální intenzitě.44,80,81, Protože některé malé, neobvyklé, a dokonce i klonální T-buněčných populací může být viděn v malých čísel v non-neoplastické podmínky, tato technika má omezenou citlivost než demonstrace klonální B-buněčné populace. Nicméně, když abnormální T-buňky tvoří více než velmi malé procento buněk, multiparametrový průtoková cytometrie snadno ukazuje jim, a hraje významnou roli při kategorizaci těchto méně časté nádory.