Articles

Animace 16: jeden gen vytváří jeden protein. :: Cshl dna Learning Center

Dobrý den, jsem George Beadle. V roce 1941, Edward Tatum a já jsem dělal experimenty s použitím Neurospora crassa – red Bread mold. Naše experimenty prokázaly teorii Archibalda Garroda z roku 1902, že dědičná onemocnění jsou „vrozené chyby metabolismu“ †“ chybějící nebo falešné kroky v chemických drahách těla. Po většinu svého životního cyklu je Neurospora haploidním organismem. To znamená, že existuje pouze jedna kopie každého genu, takže jsme se nemuseli starat o dominantní a recesivní alely, jako měl Mendel. V laboratoři roste Neurospora dobře na“ minimálním “ agaru, který obsahuje pouze několik jednoduchých cukrů, anorganických solí a vitamín biotin. Neurospora musí mít enzymy, které přeměňují tyto jednoduché látky na aminokyseliny a vitamíny nezbytné pro růst. Domlouvali jsme se, že pokud budeme mutaci některého z genů, které je enzym, například gen, měli bychom Neurospora napětí, které nemohou růst na minimálním médiu. Mutant by byl schopen růst, pokud přidáme enzymový produkt jako doplněk. Edward Tatum a já jsme se vydali najít tyto nutriční mutanty.V roce 1927 Herman Muller ukázal, že rentgenové záření způsobuje mutace v genech. Takže jsme ozařovali Neurosporovou kulturu rentgenovými paprsky. Očekávali jsme, že získáme nějaké vzácné mutanty, které nebudou růst na minimálních médiích. Potomstvo ozářené Neurospory jsme pěstovali na „kompletním“ médiu, které obsahovalo všechny vitamíny a aminokyseliny. Dále jsme testovali schopnost každé z těchto kultur růst na minimálních médiích. Potomstvo ozářené Neurospory jsme pěstovali na „kompletním“ médiu, které obsahovalo všechny vitamíny a aminokyseliny. Dále jsme testovali schopnost každé z těchto kultur růst na minimálním médiu. Většina těchto kultur rostla na minimálních médiích, což znamená, že neměly genetickou mutaci takového druhu, jaký jsme hledali. Nicméně, 299 kultura nerostla na minimálním médiu. Poté jsme vyzkoušeli pěstování kultury# 299 na minimálním médiu doplněném buď aminokyselinami nebo vitamíny. Zjistili jsme, že Kultura# 299 neměl růst na minimálním médiu s aminokyselin doplňky, ale rostou na minimálním médiu s vitaminových doplňků. Proto Kultura# 299 nesmí být schopna vyrobit jeden z vitamínů. Pak jsme museli zjistit, který vitamín chybí v kultuře# 299. Udělali jsme to testováním schopnosti kultury# 299 růst na minimálním médiu doplněném o jednotlivé vitamíny. Zjistili jsme, že kultura# 299 rostla pouze tehdy, pokud jsme poskytli vitamín B6 .Tohle byl náš první Neurosporový mutant. Nemohl vyrobit vitamín B6 sám o sobě, protože musí být ovlivněn jeden z enzymů v cestě syntézy B6. Gen vytvářející tento enzym tedy musel být mutován X-rays.By přidáním vitaminu B6 jako doplňku k minimálnímu médiu by mutace mohla být kompenzována a kultura# 299 by mohla růst. Pomocí této metody výběru a suplementace jsme izolovali mnoho různých typů Neurosporových mutantů. Genetické mutace ovlivňují metabolické dráhy a Potvrdili jsme cestu syntézy mnoha vitamínů a aminokyselin. Například aminokyselina arginin je syntetizována v postupném procesu katalyzovaném enzymy. Prekurzorová molekula se převede na ornitin, poté citrulin a nakonec arginin.Pokud jeden gen vytvoří jeden enzym, měla by existovat genetická mutace pro každý krok této cesty syntézy. Mezi argininovými mutanty by měly být kmeny, které potřebují buď ornitin nebo citrulin nebo arginin jako doplňky. V roce 1944 naši kolegové Adrian Srb a Norman Horowitz našli tyto mutantní kmeny. Začali s Neurospora kmeny, které potřebovaly arginin jako doplněk. Tyto kmeny měly mutace v různých genech. Například Mutant# 1 nemohl vyrobit ornithin. Takže gen, který tvoří enzym pro syntézu ornitinu, musel být mutován. Pokud se do média přidá ornithin, vytvoří se citrulin a poté arginin a Mutant# 1 by mohl růst. Podobně genetická mutace v mutantu# 2 ovlivnila enzym, který tvoří prekurzor argininu citrulin. Přidání citrulinu jako doplňku doplnilo mutaci a vedlo syntézu argininu k dokončení. A genetická mutace v #3 ovlivnila poslední krok syntézy argininu – konverze citrulinu na arginin. Přidáním argininu jako doplňku byla mutace doplněna a Mutant# 3 mohl růst. U každého mutovaného genu je ovlivněn pouze jeden krok metabolické dráhy. Proto je jeden gen zodpovědný za jeden enzym nebo protein. Měli jsme biochemický důkaz návrhu Sira Arthura Garroda z roku 1908 o “ vrozených chybách metabolismu.“